东莞市屠宰场猪旋毛虫血清学调查
2016-09-20彭达平卢小明谢柱彬陈锦其张险朋东莞市虎门镇农业技术服务中心广东东莞5900东莞市东坑镇农业技术服务中心广东东莞5900东莞市动物疫病预防控制中心广东东莞5086
彭达平,卢小明,谢柱彬,陈锦其,张险朋(.东莞市虎门镇农业技术服务中心,广东 东莞 5900;.东莞市东坑镇农业技术服务中心,广东 东莞 5900;.东莞市动物疫病预防控制中心,广东 东莞 5086)
东莞市屠宰场猪旋毛虫血清学调查
彭达平1,卢小明2,谢柱彬2,陈锦其1,张险朋3
(1.东莞市虎门镇农业技术服务中心,广东 东莞 523900;2.东莞市东坑镇农业技术服务中心,广东 东莞 523900;3.东莞市动物疫病预防控制中心,广东 东莞 523086)
为了解东莞市猪旋毛虫的感染情况,2015年在东莞市15个镇(街)屠宰场采集225份血清,应用ELISA方法进行旋毛虫检测,结果在一个屠宰场中检出一份猪旋毛虫抗体阳性,阳性率为0.44%,结果表明东莞市屠宰场的猪可能存在猪旋毛虫的感染,建议采取综合防控措施防止人感染猪旋毛虫。
旋毛虫;猪;ELISA;血清学
旋毛虫病(trichinellosis)是由旋毛虫引起的一种严重的人兽共患寄生虫病。人类感染旋毛虫主要是通过食用含有旋毛虫幼虫的生肉或半生肉。旋毛虫病呈世界性分布,在欧洲和北美洲发病率比较高。我国在1964年首次在西藏的林芝地区发现人感染旋毛虫,此后在云南、四川、广西,河南、湖北、辽宁、吉林、黑龙江等省发生了多起暴发,近年来在少数民族地区时有发生。旋毛虫病不仅严重威胁到人类的公共卫生安全,还对猪的养殖造成严重的经济损失。在屠宰检疫中,旋毛虫是首检寄生虫,为肉类和肉制品的必检项目。在屠宰检疫中主要采取压片镜检法和免疫胶体金检测相结合的方式,根据了解猪的旋毛虫的检出率比较低。为了掌握东莞市屠宰场猪旋毛虫感染的情况,2015年在东莞市15个镇(街)的屠宰场采集了225份血清,进行了猪旋毛虫抗体检测,现报告如下。
1 材料与方法
1.1被检血清
2015年,在东莞市15个镇(街)屠宰场采集225份血清。采集的血清-20℃保存,集中检测。
1.2试剂和仪器
猪旋毛虫抗体ELISA试剂盒:购自法国IDvet公司,批号为814。SUNRISE酶标仪购自TECAN公司。
1.3ELISA方法
血清样品1:20稀释,每孔加入190μL样品稀释液,孔A1和B1加入10μL阴性对照,孔C1和D1加入10μL阳性对照,其余孔加入10μL稀释后的待检测样品,21℃(± 5℃)下孵育45min±4min。用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。加入100μL1:10稀释的酶标记结合物,21℃(± 5℃)下孵育30min±3min。用300μL洗涤液每孔洗涤3次。每孔加入100μL的底物溶液,21℃(±5℃)下暗室内孵育15min±2min。每孔加入100μL的终止液终止显色反应。在酶标仪的450nm波长读结果。阳性对照的平均OD>0.350,阳性对照与阴性对照平均OD值比值>3.5结果成立。S/P≤50%判为阴性,S/P>50%<60%判为可疑,S/P≥60%判为阳性。
2 结 果
共检测15个镇(街)的屠宰场,血清225份,在其中一个屠宰场中检出猪旋毛虫抗体阳性1份,抗体阳性率为0.44%,表明屠宰场的猪可能存在猪旋毛虫的感染,结果见表1。
表1 东莞市屠宰场猪戊型肝炎抗体检测结果
3 讨 论
3.1根据血清学的检测结果,只在其中的一个屠宰场中检出一份旋毛虫抗体阳性,抗体阳性率为0.44%,表明东莞市屠宰场的猪可能存在旋毛虫的感染,但感染率比较低。张月清等在1993年用目测快速双抗体夹心ELISA法,在河南检测了258份屠宰猪血清,抗体阳性15份,抗体阳性率为5.8%,其中有7份血清抗体的隔肌压片镜检也为阳性。
3.2目前,猪旋毛虫的检测方法包括肌肉压片镜检法、集样消化法和血清学方法。肌肉压片镜检法在感染不是很严重时容易漏检,集样消化法是国际旋毛虫病委员会推荐的方法,是旋毛虫检疫的“金标准”,但是集样消化法操作复杂而且时间长,不适合屠宰场的大规模的检疫。血清学方法包括免疫胶体金方法和ELISA方法,免疫胶体金方法操作简便、时间短,而且不需要仪器设备,目前在屠宰场检疫中应用很广泛应用,但是容易产生假阳性和假阴性的问题。ELISA广泛应用于旋毛虫的血清学诊断和血清流行病学调查,敏感性比较高,结果比较准确,但是只能用血清样品,对于屠宰后肉品无法检测。
3.3人类感染旋毛虫主要是通过食用生的或半生的肉感染,为了有效控制旋毛虫的感染,首先要加强人畜共患病知识宣传,提高人们的自我保护意识,提倡科学的饮食习惯,加强饮食行业的管理,做到生、熟分离。二是应加强猪只的屠宰检疫,把好检疫管,严禁私宰。三是加强猪旋毛虫的监测,发现有问题的猪肉及时无害化处理。
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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.08.024
彭达平(1978~),广东省兴宁市人,兽医师,从事动物疫病和人畜共患病防控工作