羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能、血液硒含量及抗氧化功能的影响

2016-09-16梁易晓刘丽娜秦顺义唐晓娟赵方红

中国饲料 2016年11期

关键词：羧甲基壳聚糖酸钠

梁易晓，刘丽娜，秦顺义，王　昕，唐晓娟，赵方红

（天津农学院动物科学与动物医学学院，天津西青300384）

羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能、血液硒含量及抗氧化功能的影响

梁易晓，刘丽娜，秦顺义*，王昕，唐晓娟，赵方红

（天津农学院动物科学与动物医学学院，天津西青300384）

为研究羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能、血液硒含量及抗氧化功能的影响，本试验将120只KM小鼠（雌雄各半），随机均分为C组、TI组和T2组，分别喂基础日粮、添加亚硒酸钠的基础日粮和添加羧甲基壳聚糖硒的基础日粮，试验持续28 d。结果表明：T2组小鼠采食量和料重比较C组和T1组分别降低了5.24%、8.66%和4.27%、4.29%；但T2组、T1组和C组间小鼠的采食量、料重比及增重均无显著差异（P＞0.05）。T2组小鼠全血硒含量和血浆总抗氧化能力（T-AOC），较C组和T1组分别提高了78.95%（P＜0.01）、17.50%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）8.05%（P＜0.05）；T1组小鼠全血硒含量和血浆T-AOC较C组分别提高了52.63%（P＜0.05）和8.75%（P＜0.05）。T2组和T1组小鼠全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性分别较C组提高了24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2组小鼠全血GSH-Px活性较T1组提高了9.22%，但未达差异显著水平（P＞0.05）。T2组小鼠血浆丙二醛（MDA）含量分别较C组和T1组降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1组小鼠血浆MDA含量较C组降低了13.21%（P＜0.05）。结果提示：羧甲基壳聚糖硒能够提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果优于亚硒酸钠；羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能无影响。

羧甲基壳聚糖硒；小鼠；生长性能；硒含量；抗氧化功能

［Abstract］This experiment was conducted to determine the effects of carboxymethyl chitosan selenium on growth performance，blood selenium content and antioxidation capacity in mice.One hundred and twenty KM mice，female and male in half，were randomly assigned into three dietary treatment groups for a 28 days study，which were fed basal diets，basal diets supplemented with sodium selenite and basal diets supplemented with carboxymethyl chitosan selenium，respectively. The results showed that feed intake and feed/gain ratio（F/G）in T2 group were 5.24%，8.66%and 4.27%，4.29%lower than those in T1 group and C group，while there were no significant differences in feed intake，F/G and weight gains of mice among T2 group，T1 group and C group（P＞0.05）.Blood selenium contents and plasma total antioxidant capacity（T-AOC）levels in T2 group were 78.95%（P＜0.01），17.50%（P＜0.01）and 17.24%（P＜0.05），8.05%（P＜0.05）higher than those in C group and T1 group，blood selenium contents and plasma T-AOC levels in T1group were 52.63%（P＜0.05）and 8.75%（P＜0.05）higher than those of C group.Blood glutathione peroxidase（GSH-Px）activities in T2 group and T1 group were 24.65%（P＜0.01）and 14.13%（P＜0.05）higher than that of C group.Blood GSH-Px activities in T2 group were 9.22%higher than that in T1 group（P＞0.05）.Plasma malonaldehyde（MDA）contents in T2 group were 29.40%（P＜0.01）and 18.66%（P＜0.05）lower than that in C group and T1 group.Plasma MDA contents in T1 group were 13.21%（P ＜0.05）lower than that in C group.The results indicated that carboxymethyl-chitosan selenium supplementation could increase blood selenium content and antioxidant capacity in mice，and its effects were better than sodium selenite in mice. While carboxymethyl-chitosan selenium had no effect on growth performance in mice.

［Key words］carboxymethyl-chitosan selenium；mice；growth performance；selenium content；antioxidation capacity

大量研究表明，微量元素硒具有抗氧化、促生长、提高免疫力等多种生物学功能。饲料中添加的硒包括有机硒和无机硒两大类，与无机硒相比，有机硒具有毒性低、吸收利用率高、适口性好等特点。羧甲基壳聚糖硒是通过壳聚糖的羧甲基化修饰和硒化的方法合成的新型有机硒制剂（金黎明等，2012），能够同时发挥有机硒和羧甲基壳聚糖的双重作用。本试验研究羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能、血液硒含量和抗氧化能力的影响，以期为羧甲基壳聚糖硒作为饲料添加剂的实际应用提供理论依据。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂PF6-2非色散原子荧光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；高性能硒空心阴极灯（北京有色金属研究总院）；微控数显电热板（北京莱伯泰科仪器股份有限公司）；UV-1100型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；JA2003电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；羧甲基壳聚糖硒（天津农学院动物医学实验室制备）；亚硒酸钠（天津市化学试剂研究所）；盐酸、硝酸、高氯酸，均为分析纯，购自天津化学试剂二厂。

1.2试验设计清洁级KM小鼠120只（雌雄各半，购自中国军事科学研究院），体重18～22 g，经3 d的适应性饲养后，随机分为C组、T1组和T2组，每组40只（雌雄各半），每组有4个重复，每个重复10只小鼠。C组饲喂基础日粮作为对照组，T1组和T2组分别在基础日粮中添加亚硒酸钠和羧甲基壳聚糖硒（其剂量以硒计，均为0.2 mg/kg日粮）。小鼠自由采食及饮水，每日更换饮水及垫料。试验持续28 d。

1.3测定指标及方法

1.3.1生长性能指标分别于试验开始和结束时，对小鼠进行称重，每日记录饲料消耗量，试验结束时计算生长性能相关指标。

1.3.2血液样品采集在试验结束时，从每组选取8只小鼠（每个重复中随机选取2只），氟烷麻醉之后，眼眶后静脉丛取血，存储于加入肝素的抗凝采血管中备用；部分分离血浆，-20℃保存备用。

1.3.3小鼠血液硒含量测定样品的消化处理：在250 mL锥形瓶中加入待测样品1 mL，再加入由浓硝酸与高氯酸组成的混酸（V/V，1∶1）10 mL，密闭常温消化12 h后，置于电热板上加热直至瓶内溶液变为透明清亮，冷却，然后加入6 mol/L盐酸5 mL，再次加热至溶液变为清亮无色，冷却后定容，待测。

硒含量的测定：参照高建忠等（2006）的方法，利用氢化物发生原子荧光光谱法测定全血硒含量。

1.3.4小鼠血液抗氧化功能指标测定全血谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、血浆总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量测定试剂盒由南京建成生物研究所提供，严格按照说明书进行操作，在紫外可见分光光度计上进行测定。

1.4数据处理用SPSS 17.0软件进行统计分析，采用一般线性模型中的单因素方差分析进行差异显著性检验。数据结果以“平均数±标准差”表示。

2　结果

2.1羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能的影响由表1可知，T2组小鼠采食量较C组和T1组分别降低了5.24%和4.27%，T2组小鼠料重比较C组和T1组分别降低了8.66%和4.29%；但T2组、T1组和C组间小鼠的采食量、料重比及增重均无显著差异（P＞0.05）。

表1　羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能的影响

2.2羧甲基壳聚糖硒对小鼠全血硒含量的影响由图1可知，T2组小鼠全血硒含量分别较C组和T1组提高了78.95%（P＜0.01）和17.24%（P＜0.05）；T1组小鼠全血硒含量较 C组提高了52.63%（P＜0.05）。

图1　羧甲基壳聚糖硒对小鼠全血硒含量的影响

2.3羧甲基壳聚糖硒对小鼠血液抗氧化功能的影响由表2可知，T2组和T1组小鼠全血GSH-Px活性分别较 C组提高了 24.65%（P＜0.01）和14.13%（P＜0.05）；T2组小鼠全血GSH-Px活性较T1组提高了9.22%，但未达差异显著水平（P＞0.05）。T2组小鼠血浆T-AOC分别较C组和T1组提高了 17.50%（P＜0.01）和 8.05%（P＜0.05）；T1组小鼠血浆T-AOC水平较C组提高了8.75%（P＜0.05）。T2组小鼠血浆MDA含量分别较C组和T1组降低了29.40%（P＜0.01）和18.66%（P＜0.05）；T1组小鼠血浆MDA含量较C组降低了13.21%（P＜0.05）。

表2　羧甲基壳聚糖硒对小鼠血液抗氧化功能的影响

3　讨论

本试验结果表明，与对照组相比，饲喂羧甲基壳聚糖硒的小鼠在增重提高3.43%的情况下，其采食量减少了5.24%，料重比降低了8.66%，但均未达差异显著水平（P＞0.05），这说明羧甲基壳聚糖硒可能具有提高小鼠生长性能的趋势。这可能与羧甲基壳聚糖硒中羧甲基壳聚糖作用的发挥有关，而与有机硒作用的发挥关系不大；但有在某些基础日粮中硒含量远低于正常值的情况下，硒能够显著提高绵羊、肉牛等动物的生产性能的文献报道（Wichtel等，1996），但一般认为，在基础日粮中硒含量到达正常水平的情况下硒对动物生产性能无影响（Mehdi等，2013），而壳聚糖及其衍生物提高动物生产性能、促进动物生长的作用已被大量研究证实（卢美鸾等，2008；赵燕等，2006）。

本试验结果表明，作为有机硒的羧甲基壳聚糖硒较无机硒的亚硒酸钠能更有效地提高小鼠血液硒含量。王昕等（2015）报道，羧甲基壳聚糖硒能更有效地提高肉兔血液硒含量，其效果优于亚硒酸钠。陈秀芸（2013）报道，硒化壳聚糖可显著提高蛋用种公鸡的血液硒含量，其效果优于亚硒酸钠。Gunter等（2003）、Mahan和Kim（1996）在猪和牛上的报道也表明有机硒较无机硒更能提高血硒的含量。

本试验结果表明，羧甲基壳聚糖硒能够提高小鼠血液T-AOC水平、GSH-Px活性，降低血浆MDA含量，其效果优于亚硒酸钠，这说明羧甲基壳聚糖硒较亚硒酸钠能更有效地提高小鼠血液抗氧化能力。这与王昕等（2015）、曲韵笙和朱连勤（1998）应用羧甲基壳聚糖硒或壳聚糖硒饲喂肉兔和小鼠所获得的试验结果相一致。这应该是有机硒和羧甲基壳聚糖共同发挥作用的结果：补硒提高动物抗氧化能力已为大量文献报道所证实（Mehdi等，2013）；而林友文等（2003）、吴迪等（2013）和王美娜等（2015）均报道了羧甲基壳聚糖在体内或体外都具有提高动物抗氧化能力的作用。

4　结论

羧甲基壳聚糖硒能够提高小鼠血液硒含量和抗氧化能力，其效果优于亚硒酸钠；羧甲基壳聚糖硒对小鼠生长性能无影响。

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