电化学发光免疫法和放射免疫法检测血清甲状腺激素的对比分析

盛晓光，常红叶，齐　力，谭　岩，方艳秋，王起来*

(1.吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林 长春130021；2.吉林省临床检验中心，吉林 长春130021)



电化学发光免疫法和放射免疫法检测血清甲状腺激素的对比分析

盛晓光1，常红叶2，齐力2，谭岩1，方艳秋1，王起来1*

(1.吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林 长春130021；2.吉林省临床检验中心，吉林 长春130021)

甲状腺功能紊乱是内分泌科常见疾病，甲状腺激素水平检测是临床常用的检测项目，RIA作为传统的检测手段[1]，将抗体用放射性碘元素标记来检测血清中甲状腺素。但因其需手工加样、操作过程繁琐，且检测过程中可能出现放射性污染、放射性元素的衰减影响检测结果，精准度相对降低[2]，在临床检验中的应用受到一定限制。新一代标记免疫检测技术ECLIA，由电化学发光(ECL)和免疫测定法结合而成[3]，具有检测迅速，灵敏度高等特点，近年来被广为使用。促甲状腺激素(TSH)由垂体前叶分泌，是一种糖蛋白类激素，促进甲状腺代谢，诊断甲状腺疾病最灵敏的标志物就是检测血清TSH水平，同时也是甲状腺功能检测的首选指标[4]。TSH分泌受血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)负反馈调节[5]。本文分别用放射免疫法及电化学发光免疫法对TSH、FT3、FT4进行检测，比较其结果。

1　材料与方法

1.1标本来源选取我院2012年10月至2013年11月门诊及住院患者共130例，其中正常对照组及甲状腺功能亢进组(甲亢组)各50例，甲状腺功能减退组(甲减组)各30例。

1.2仪器与试剂电化学发光法采用瑞士罗氏Cobase411全自动分析仪及原厂家配备的检测试剂；放射免疫法采用上海日环仪器厂的SH-682 放射免疫计数器,试剂盒来源于北京北方生物技术研究所。

1.3测定方法采空腹静脉血2管，每管3ml，所有操作严格按照试剂及仪器操作使用说明书，检测血清中TSH、FT3以及FT4水平，由经验丰富的检验员在2小时内完成。

2　结果

无论是正常组、甲亢组还是甲减组，利用RIA及ECLIA检测患者血清中甲状腺激素水平，所得到的结果均相似，两种方法所得到的结果差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表1-3。

表1　正常组检测比较情况

表2　甲亢组检测比较情况

表3　甲减组检测比较情况

3　讨论

RIA始于20世纪60年代，其原理是将抗原/抗体用放射性物质标记，与待检样本结合，形成抗原抗体复合物来进行测定。它分为竞争性放射免疫法和免疫放射分析法(IRMA)两种，前者也被称为传统的放射免疫测定方法，是对样品中的抗原含量的测定，其基本原理是利用放射性物质标记的抗原，与待检样本中未标记抗原竞争结合特异性抗体。后者在前者的基础上发展起来，是将足量抗体以放射性物质标记，直接结合待检抗原，采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析法。因为RIA测定的灵敏性、特异性及测定的精确性较好，对抗原和半抗原均可检测，仪器设备要求不高，被广泛用于生物医学测定，由于大部分检测项目都有上述两种放射免疫方法的试剂盒，故其仍是基层部门对超微量物质检测的主要技术。但其只能测定特定物质、因放射性物质有半衰期保存的时间较短、会造成环境污染和机体损伤等[6]，且不能形成自动化，不能快速地检测、出报告[7]。

ECLIA是目前标记免疫检测最前沿的技术手段，由电化学发光和免疫检测两个部分组成。标记物的发光原理主要是由电化学产生的,在电极表面特异性化学发光反应，抗原和抗体的结合有很高的特异性，所以精确度准、检测结果重复性高，临床检验结果稳定，ECLIA能有效的消除样本底产生的干扰以及对位量的散射，从而能真正的提高这一方法灵敏度。另一个优点ECLIA可以完全自动化，不仅操作简便而且能有效的减少工作中存在系统误差和随机误差。并且ECLIA试剂保存期长，测定结果快而准，且安全无毒，不会出现同位素辐射污染的问题[8]。随着技术的发展，ECLIA被广泛应用于多种激素的检测，病毒检测，肿瘤标记物检测，药物浓度的鉴定等，但也存在着需要引进特殊设备，试剂价格成本高等缺点。

本试验中两种方法的检测结果基本相同，都具有较高的准确性和精密度，不同单位可以根据自身情况结合两种检测方法的优缺点，酌情选择不同的方法进行检测，作为体外标记免疫分析的这两种方法在今后的检验领域发展中仍然会互补而存在。

[1]范旭.血标本采集方法对放射免疫分析甲状腺激素的影响[J].中国医药导报,2010,7(30):68.

[2]赵云霞,李培钢,王秀珠,等.放射免疫法和发光法测定甲状腺微粒体蛋白抗体、甲状腺球蛋白抗体及其相关性研究[J].中国实用内科杂志,2010,26(6):150.

[3]方光辉.放射免疫分析与电化学发光法检测血清HCG效果分析[J].中国现代医生,2010,48(27):74.

[4]王自正.现代医学标记免疫学[M].北京:人民军医出版社,2000.145-146.

[5]李少林,王荣福.核医学[M].北京:人民卫生出版社,2008.63-69.

[6]JohnPickup.ODLinsulinpumptherapyandcontinuousglucosemonitoring[J].OxfordMedicine,2011,13(78):1783.

[7]冯琴,杨骏,朱菩军.电化学发光分析与酶联免疫分析用于测定血清甲状腺激素的评价[J].地方病通报,2007,22(6):32.

[8]马红霞,周运恒,杨蔺,等.ELISA法和电化学发光免疫法检测血清HBsAg结果比较分析[J].医学检验,2010,25(6):473.

1007-4287(2016)08-1349-02

吉林省科技发展计划项目(20160622008JC)

2016-03-12)