白藜芦醇乳剂的制备

张莹莹，薛东江

(鲁南制药集团股份有限公司，山东 临沂 273400)

白藜芦醇乳剂的制备

张莹莹，薛东江

(鲁南制药集团股份有限公司，山东 临沂 273400)

目的：采用高速分散-探头超声法制备白藜芦醇注射乳剂，并对其进行处方及工艺优化。方法：以稳定常数为考察指标作正交试验，筛选最佳处方和制备工艺。结果：最后确定最优处方为：0.1 %的白藜芦醇、油酸0.3 %的pluronic F68、0.3 %的油酸、1.2 %磷脂、2.25 %甘油和10 %大豆油；最优工艺为：乳化温度70 ℃、高速分散时间8 min，转速11000 r/min，超声功率为400 w，超声时间5 min。结论：该处方工艺可行，所制备的白藜芦醇乳剂具有较高稳定性。

白藜芦醇；乳剂；高速分散-探头超声法

注射用乳剂是由注射用乳化剂、注射用水、注射用油及其它辅料组成，具有良好的生物相容性[1]。作为静脉给药载体，乳剂解决了难溶性药物的静注问题，增加药物的吸收；载药量大；在水包油型乳剂中，药物几乎都存在于油相和水包油的界面层中，避免了与水的直接接触，从而提高药物稳定性；延长药物作用时间；降低注射时的刺激性；使药物缓释、控释及具有一定的靶向性等特点。

白藜芦醇[2](Resveratrol，简称Res)化学名称为3，4，5一三羟基二苯乙烯，是含芪类结构的二苯乙烯芪类、非黄酮类多酚物质。大量研究表明白藜芦醇对心血管疾病有明显的治疗和预防作用，具有抗突变、抗氧化、降低血小板聚集等生物活性。体内外实验表明它还能够诱导大部分肿瘤细胞凋亡，具有抗肿瘤活性，被喻为又一新的绿色抗癌药物[3]。

由于白藜芦醇难溶于水，不易被吸收，给药后体内消除半衰期短，在血液中较快的清除[4]。所以本文将白藜芦醇制成乳剂，延长体内作用时间，缓慢释药，促进药物吸收，提高生物利用度，增强它的药理作用，降低毒性。

1 仪器及试药

1.1 仪器

XS205-DU分析天平；高效液相色谱仪；JY92-llN型超声波细胞粉碎机；0516-1台式离心机；FJ-200高速分散匀质机

1.2 试药及试剂

白藜芦醇(郑州荔诺生物科技有限公司，含量98 %)；注射用大豆油(铁岭北亚药用油有限公司)；注射用大豆磷脂(上海太伟药业药业有限公司)；注射用普朗尼克F-68(德国BASF)；注射用甘油(浙江遂昌惠康药业有限公司)。

2 方法与结果

2.1 白藜芦醇乳剂含量测定方法的建立

2.1.1 储备液的制备

精密称取白藜芦醇乳剂标准品25 mg于250 mL容量瓶中，加甲醇适量超声使溶解，用甲醇稀释至刻度，混匀，得0.1 mg/mL的白藜芦醇标准品储备液。

2.1.2 色谱条件

色谱柱：Ultrasphere ODS C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇：水(80：20)；流速：0.8 mL/min；检测波长：306 nm；进样量：20 μL。

2.1.3 标准曲线的绘制

取100 μg/mL的白藜芦醇标准品储备液10 mL置于100 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为10?g/mL的白藜芦醇标准溶液。分别精密吸取白藜芦醇标准品储备液0.05 mL、1.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、15.0 mL、20.0 mL、25.0 mL置于100 mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度分别为0.05 μg/mL、1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、15.0 μg/mL、20.0 μg/mL、25.0 μg/mL的系列溶液，分别进样20 μL，以峰面积(A)为纵坐标。以浓度(C)为横坐标进行线性回归，标准曲线方程：A=109509C+2311.9(R=0.9999)，白藜芦醇在浓度0.05～25 μg/mL范围内，峰面积与测定浓度曲线呈良好的线性关系，回收率高，重现性好，能准确快速的进行含量测定。

2.2 注射乳剂的质量评价指标

2.2.1 外观

乳白色、没有油滴、不分层、流动性好为合格乳剂。

2.2.2 离心稳定性

将乳剂5 mL置离心管以4500 r/min离心10 min，微量进样器精密量取离心管底部样50 μL置于10 mL量瓶中，用蒸馏水(过0.22 μm微孔滤膜)稀释定容，用蒸馏水做空白对照，500 nm处用紫外一可见分光光度计测定吸收度(n=3)，记做A。未离心的乳剂用相同方法测定吸收度(n=3)，记做A0。按Ke =︱A0-A︱/A0×100%来计算乳剂的稳定性参数Ke。计算所得的Ke值越小，则乳剂中分散乳滴在离心力作用下上浮的越少，说明乳剂越稳定。

2.2.3 粒径大小及粒径分布

注射乳剂属于非均相体系，存在物理稳定性的问题，所以应该把乳剂的粒径大小和分布作为控制乳剂质量的重要指标。

2.3 白藜芦醇乳剂正交设计优化处方工艺

经过单因素考察和多次预试验，确定了以下处方组成：白藜芦醇0.1 %，甘油2.25 %，油酸0.3 %。以稳定性常数为考察指标，用正交设计考察磷脂的用量(A)、F68的用量(B)、油相比例(C)的不同水平对乳剂稳定性的影响。

表1 因素水平表

根据以上各因素、水平按L9(3*4)安排试验，结果见表2。

表2 正交试验结果表

表2(续)

以稳定性常数为指标对正交设计结果进行评价，由极差R可知， B

最优组合为油相的用量为10 %，磷脂用量为1.2 %，pluronicF68用量为0.3 %，油酸的用量为0.3 %，甘油的用量为2.25 %。

2.4 工艺因素考察

在单因素考察的基础上，固定乳剂制备温度70 ℃，以稳定性常数为评价指标对制备过程重要的工艺因素采用正交设计。考察制备时匀质速度(A)、高速匀质时间(B)、超声功率(C)和超声时间(D)的不同水平对乳剂稳定性的影响。

表3 因素水平表

根据以上各因素、水平按L9(3*4)安排试验，结果见表4。

表4 正交试验结果表

实验结果表明，各因素的影响程度为A>B>D>C，即在乳剂的制备工艺中高速匀化的转速对稳定性影响最大，其次是高速匀化的时间，超声功率和超声时间。最佳工艺组合为：A1B1C2D3。即：高速匀化转速为11000 r/min，匀化时间为8 min，超声时间为5 min，超声功率为400 W。

3 小结与讨论

(1) 研究了白藜芦醇乳剂的处方及制备工艺。以稳定性常数为考察指标，高速搅拌-探头超声两步乳化法制备白藜芦醇乳剂。乳化剂在最佳乳化温度时，油水界面上两种复合乳化剂紧紧排列形成了稳定的复合界面膜。由于磷脂存在着相转化温度，在其相转化温度附近制备的乳剂粒径较小，乳剂的稳定性较高，另外，适宜的乳化温度能使油相的粘度降低，得到的乳剂粒径小且均匀。

(2)单独使用磷脂作为乳化剂时所形成的单层乳化膜流动性较大，这样油相就很易通过乳化膜间隙向水相中扩散。加入F68作为辅助乳化剂时，此时具有较小亲水端的磷脂和F68的长PEO嵌段组成了很厚的亲水界面层，就克服了单层乳化膜的不足，这样就在油水界面形成较厚的复合乳化膜，增强乳剂的稳定性。

[1] 游荣辉,丛龙波,袁海龙.静脉亚微乳研究进展及其在现代中药研究中的应用[J].中草药,2007, 38(6):946-948.

[2] 康彦芳，封军来.白藜芦醇药理作用及制备方法[J] .粮食与油脂，2006(11)：37-39.

[3] 向 敏，匡小东．白黎芦醇及其药理保健功能的研究[J] .中国食品添加剂，2004(5)：16-20．

[4] 李延华，王伟军.白藜芦醇的研究现状及应用前景[J] .中国酿造，2008(4)：10-12.

(本文文献格式：张莹莹，薛东江.白藜芦醇乳剂的制备[J].山东化工，2016，45(12)：20-21，24.)

The Preparation of Resveratrol Emulsion

Zhang Yingying, Xue Dongjiang

(Lunan Pharmaceutical Company Ltd., Linyi 273400, China)

Objective:Preparation of Resveratrol emulsion for two-step emulsification(high speed stirring-ultrasonic wave).Methods: The Ke as investigation of formulation factors and process factors investigated, and the orthogonal design optimization formulation. Results:The optimized formula was composed of 0.1 % Resveratrol，10 % admixture of Soybean oil, 0.3 %Pluronic F68，0.3 % oleic acid and 1.2 % SPC astheemulsifying agent, 2.25 %glycerol as the is osmotic adjusting agent. The optimized manufacturing parameters: working temperature was 70 ℃, stirring time was 8 min,stirring speed was 11000 r/min, ultrasonic power was 400 w, ultrasonic time was 5 min.Conclusion:The formulation technology is feasible, the preparation of Resveratrol emulsion with high stability.

Resveratrol; emulsion; high speed stirring-ultrasonic wave

2016-01-06

张莹莹(1984—)，女，助理工程师，从事新药质量标准研究。

TQ469

A

1008-021X(2016)12-0020-02