鸡源致病性E.coli药物敏感性试验
2016-09-05陈占莉张永明付瑞霞
陈占莉 张永明 苏 震 付瑞霞 雷 艳
(榆林市府谷县武家庄镇畜牧兽医站,陕西府谷 719400)
鸡源致病性E.coli药物敏感性试验
陈占莉 张永明 苏 震付瑞霞雷 艳
(榆林市府谷县武家庄镇畜牧兽医站,陕西府谷 719400)
对2012-2015年分离于陕西榆林地区50株鸡源致病性E.colj进行8种常用喹诺酮类药物药物敏感性试验,为指导临床合理使用喹诺酮类药物提供数据参考。参照CLSI推荐的K-B药敏纸片法对所有菌株进行药物敏感性试验。结果显示50株被测菌株对喹诺酮类药物都产生了耐药性,可能会导致该药物耐药性的水平传播,应加强监控。
E.colj;药物敏感性试验
大肠埃希菌(E.coli)俗称大肠杆菌,是埃希氏菌属(Escherichia)的代表菌,是构成人类和大多数温血动物肠道中的正常菌群之一,也是环境中的常在菌。在一定条件下,由致病性大肠埃希菌引起鸡的大肠杆菌病是危害养鸡业的重要细菌性疾病,各个品种的鸡在不同日龄均可发病。本研究通过药物敏感性试验对鸡源致病性E.coli喹诺酮类药物耐药性进行检测。从而探讨鸡致病性E.coli中耐药性情况,对抑制喹诺酮类药物耐药性的迅速传播具有重要意义。
1 材料
菌株:50株E.coli于2012-2015年分离于陕西省榆林市陕西大匠农科产业集团有限公司。
药品:8种药敏纸片(喹诺酮类药物):吡哌酸、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、依诺沙星、洛美沙星、格帕沙星、吉米沙星均购自杭州天和微生物试剂有限公司。
2 方法
采用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验[1-4],将所保存的50株纯化菌株分别接种于普通肉汤中,37 ℃培养24 h后,用无菌生理盐水校正菌液浊度,使其与标准比浊管的浓度相同(一般为0.5麦氏单位)。用无菌棉签蘸取矫正过的菌液涂布于新鲜配制的普通琼脂平板上,37 ℃放置10 min后,用灭菌镊子将抗生素纸片贴附在琼脂表面(每张纸片间距不小于24 mm,纸片中心距边缘不小于15 mm),每种药物做两个重复,此操作全部在无菌间进行。置于恒温培养箱中37 ℃培养18~24 h后,测量抑菌圈直径,求其平均值。
结果判定:按2005年美国临床实验室标准化委员会(CLSI/ NCCLS)指导原则的标准计算E.coli对抗菌药物的耐药率(R%)、中介率(I%)、敏感率(S%)。(I%)、敏感率(S%)的标准。
表1 纸片法药物敏感性试验抑菌环直径判断标准(mm)
3 结果
试验中用吡哌酸、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、依诺沙星、洛美沙星、格帕沙星、吉米沙星来检测分离至陕西榆林地区的50株鸡源致病性E.coli对喹诺酮类药物的耐药情况。50株E.coli全部对喹诺酮类药物产生了耐药性,其中对诺氟沙星和氧氟沙星呈现严重耐药;对吉米沙星中度敏感,敏感率为58%;而对其它喹诺酮类药物则表现为耐药。试验结果见表2。
表2 50株分离菌药物敏感性试验情况(8种)
4 结论
陕西榆林地区分离的50株鸡源致病性E.coli对喹诺酮类药物产生了不同程度的耐药性,其中对诺氟沙星和氧氟沙星呈现严重耐药;对洛美沙星高度敏感敏感率为70%,其次为洛美沙星,敏感率为70%;对吉米沙星中度敏感,敏感率为58%;而对其它喹诺酮类药物则表现为耐药,引起兽医临床治疗的难度加大,有必要对其跟踪监视,以便采取必要措施。这一结果与张志峰等[6]在2008年及钟江国等[5-8]在1999年报道的不同,分析原因可能与各地区菌株的血清型不同或不同地区的用药习惯不同,进而产生耐药性不同有关。因此,临床应用药物防治鸡大肠杆菌病时,应该结合药物敏感性试验结果选取敏感药物,同时将2-3种敏感药物交替使用。应首选洛美沙星,也可将洛美沙星与吉米沙星交替使用,以避免新耐药性的产生;而且在每次用药之前都需通过药物敏感性试验掌握鸡群中E.coli对喹诺酮类药物及其他抗生素的敏感程度,最终选取敏感药物用于鸡大肠杆菌病的防治。
[1]徐海花,牛钟相,秦爱建.细菌耐药性研究进展[J].山东农业大学学报(自然科学版),2010,41(1):156-160.
陈占莉(1985—),女,陕西榆林人,助理兽医师,从事动物疫病防控工作。