132例家族聚集性慢性乙型肝炎病毒感染者影响自然病程进展的相关因素分析*

郭素娟，李　娟，李智伟

132例家族聚集性慢性乙型肝炎病毒感染者影响自然病程进展的相关因素分析*

郭素娟，李娟，李智伟

目的探讨慢性乙型肝炎病毒感染者自然病程进展规律及其与感染持续时间、血清HBV DNA载量、HBeAg状态和脾脏厚度的关系。方法2007年1月至2010年8月就诊于中国医科大学附属盛京医院感染病科的家族聚集性慢性乙型肝炎病毒感染者132例，常规行肝组织活检病理学检查，采用化学发光法检测血清HBV标记物；采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA；使用西门子S200二维彩超诊断仪测量脾脏厚度。结果在132例慢性乙型肝炎患者中，年龄≥30岁患者肝组织炎症评分≥5分和纤维化评分≥3分发生率分别为33.3%和38.4%，显著高于年龄＜30岁组（14.9%和14.8%，P<0.05）；肝功能正常组肝组织炎症评分≤4分和纤维化评分≤2分发生率分别为92.0%和92.0%，肝功能异常组为53.6%和16.74%（P<0.05）；肝功能反复异常＞1年的患者肝组织炎症评分≥5分和纤维化评分≥3分发生率分别为42.8%和51.5%，显著高于肝功能异常≤1年组（31.9%和31.9%，P<0.05）；血清HBV DNA载量为3～5 lg copies/ml组肝组织炎症评分为≤4分和纤维化评分为≤2分发生率分别为50.0%和27.8%，显著高于病毒载量<3 lg copies/ml组（P<0.05）；血清HBeAg阴性组纤维化评分在3～4分和≥5分发生率分别为23.1%和20.5%，显著高于HBeAg阳性组的11.8%和9.7%（P<0.05）；血清HBeAg阳性与否与肝组织炎症无显著相关性（P>0.05）；脾脏厚度≥4 cm组肝组织炎症≥5分和纤维化评分≥5分发生率分别为76.9%、7.7%和76.9%，显著高于脾脏厚度＜4 cm组的16.0%、3.4%和5.9%（P<0.05）；多因素分析发现脾脏厚度与肝组织炎症（t=2.153）和纤维化程度（t=4.654）呈显著独立正相关（P=0.033）；血清HBV DNA载量与肝组织纤维化程度（t=-2.826）也呈独立相关（P=0.005）。结论家族聚集性的慢性乙型肝炎病毒感染者肝组织炎症和纤维化程度与感染持续时间成正相关，年龄大于30岁时更易出现肝脏疾病的进展。肝功能异常时间越长肝脏炎症和纤维化改变越显著。脾脏厚度与肝组织炎症和纤维化程度具有独立正相关。血清HBV DNA载量为1×103～105copies/ml时肝组织炎症和纤维化改变更显著。

慢性乙型肝炎；HBV DNA；HBeAg；纤维化

【Abstract】ObjectiveTo illuminate the relationship between natural progressive course of chronic hepatitis B virus infection and the factors such as the time of infection，serum HBV DNA load，HBeAg status，and thickness of spleen.Method132 patients with chronic hepatitis B infected with family cluster were enrolled in Shengjing hospital affiliated to China Medical University from January 2007 to August 2010.Liver biopsy，serum HBV markers and HBV DNA were routinely obtained.ResultsThe prevalence of hepatic inflammation score≥5 and fibrosis score≥3 were 33.3%and 38.4%in patients aged＞30 years old，significantly higher than 14.9%and 14.8%in age≤30 years group（P<0.05）；The prevalence of inflammation score≤4 and fibrosis score≤2were 92.0%and 92.0%in individuals with normal liver function group，significantly higher than 53.6%and 16.74%in with abnormal liver function group（P<0.05）；The prevalence of inflammation score≤4 and fibrosis score≤2 were 100.0%and 83.3%in patients with serum HBV DNA load＜3 lg copies/ml，much higher than in patients with serum HBV DNA load>3 lg copies/ml；There was no statistical difference in hepatic inflammation score between patients with serum HBeAg-negative and HBeAg-postive group；The patients with spleenthickness≥4 cm had higher hepatic inflammation and fibrosis score than in with spleen thickness＜4 cm（P<0.05）；In multivariate analysis，the spleen thickness（P=0.033）and serum HBV DNA（P＜0.01）had independent positive correlation to liver inflammation and fibrosis.ConclusionThe time of infection has positive correlation to the severity of liver inflammation andfibrosis in patients with chronic hepatitis B virus infection with family cluster. It shows up the progress of liver disease go ahead when age is greater than 30 years old；The abnormal liver function continues，the more serious liverinflammation and fibrosis stands；Spleen thickness hasindependent positive correlation to liver inflammation and fibrosis；It is more serious in liver inflammation and fibrosis when serum HBV DNA load are in the range of 1×103～105copies/ml；Serum HBeAg-negative chronic hepatitis B patients with afamily cluster may have more serious liver fibrosis than in serum HBeAg-positive ones.

【Key words】Chronic hepatitis B；HBV DNA；HBeAg；Inflammation；Fibrosis

在围生（产）期和婴幼儿时期感染HBV者中，分别有90%和25%～30%将发展成为慢性感染者[1～7]，成为肝硬化、肝癌的主要病因。本文对慢性乙型肝炎自然病程的影响因素进行了分析，以探讨慢性HBV感染持续时间，肝功能、HBeAg状态、HBV DNA定量和脾脏厚度的变化对病程的影响，现报告如下。

1　资料与方法

1.1研究对象自2007年1月至2010年8月就诊于中国医科大学盛京医院感染病科的慢性乙型肝炎病毒感染者132例，入选标准:①有乙型肝炎家族聚集史，即有乙型肝炎患者的父亲或母亲以及同胞中有两个以上感染了乙型肝炎病毒，包括家庭内水平传播和垂直传播；②HBsAg阳性＞6个月，肝功能异常或正常;③已行肝穿组织活检检查。除外合并有甲、丙、戊型肝炎病毒重叠感染和自身免疫性肝病、肝豆状核变性、酒精性或药物性肝损伤。

1.2资料收集采用调查表回顾性采集患者年龄、性别、饮酒史、吸烟史和HBV感染家族集聚史。

1.3检测使用雅培全自动生化分析仪检测肝功能指标；采用雅培化学发光法检测血清HBV标记物；采用BIOER Line-gene II荧光定量PCR法检测血清HBV DNA（ABI 7300 Real Time PCR系统和深圳凯杰生物工程公司试剂盒）。

1.4检查使用西门子S200二维彩超诊断仪测量脾脏厚度。

1.5肝活检在超声引导下使用14 G活检针行快速穿刺，取得活体肝组织长度大于1.5 cm，进行Masson、网状纤维和HE染色，使用OLYMPUS光学显微镜进行常规病理学检查。

1.6统计学处理应用SPSS 17.0统计学软件，计数资料采用卡方检验，采用多因素线性回归分析，P<0.05被认为具有统计学意义。

2　结果

2.1一般情况在入选的132例患者中，男性83例（62.9%），女性49例（37.1%）；年龄为8～62岁，平均年龄为（33.81±11.61）岁。26例（19.7%）有长期吸烟史，33例（25%）有长期饮酒史。90例（68.2%）出现ALT升高（表1）。肝组织炎症评分≤4分者为74.2%，22.0%在5～10分，3.8%＞10分；肝组织纤维化评分≤2分者占71.2%，评分为3～4分者占15.9%，≥5分者占12.9%。

表1　132例HBV感染者一般资料

2.2单因素分析见表2和表3。

2.3多因素分析将以上单因素分析中存在统计学意义的因素进行多因素分析，结果脾脏厚度（P=0.033）与肝组织炎症和纤维化程度呈显著独立正相关，而肝功能情况和感染者的年龄对肝组织炎症和纤维化的影响则无独立相关性（P＞0.05）。血清HBV DNA载量与肝组织纤维化程度具有独立相关性（P=0.005），而与肝组织炎症程度则无显著独立相关性（P=0.819）。HBeAg阳性与否与肝组织纤维化程度无独立相关性（P=0.188，表4、表5）。

表2　不同因素患者肝组织炎症评分（%）比较

表3　与肝组织炎症程度相关的多因素分析

表4　不同因素患者肝组织纤维化程度分布情况

表5　与肝组织纤维化程度相关因素的多因素分析

3　讨论

本研究单因素分析结果表明，肝组织炎症和纤维化程度与感染持续时间呈正相关。132例慢性乙型肝炎病毒感染者中有78例年龄在30岁以上，其中有33.3%肝组织炎症评分在5分以上，38.4%肝组织纤维化评分在3分以上，相对于30岁以下患者频率显著增加。在多因素分析中，我们发现血清HBV DNA载量与肝组织纤维化评分呈独立相关，但其相关系数却为负值，说明并非血清HBV DNA载量越高肝组织病理改变越重。在单因素分析中也显示:血清HBV DNA载量为1×103～105copies/ml时肝组织炎症和纤维化改变最为显著，可能与患者发生自身病毒清除有关。我们知道HBV感染在免疫清除期其肝组织学改变最为严重，可伴有中度或严重炎症坏死，并可出现纤维化的进展，而这一时期HBV DNA载量在1×104copies/ml左右[8～11]，说明在婴幼儿时期感染乙型肝炎病毒的慢性乙型肝炎病毒感染者，其血清HBV DNA载量在1×103～105copies/ml时更易出现肝脏疾病进展。台湾一项对3653例慢性乙型肝炎患者的研究表明，患者血清HBV DNA载量持续在＞1×105copies/ml以上者，发生肝硬化或肝癌的危险度是HBV DNA载量＜1×104copies/mL患者的10.1倍[2，3]。在本研究中，血清HBeAg阳性与阴性组肝组织炎症改变程度无明显差异，但HBeAg阴性组肝组织纤维化评分在3～4分和≥5分组肝纤维化所占比例均明显高于HBeAg阳性组，说明有家族聚集性的HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒感染者肝组织纤维化程度比HBeAg阳性者更重[12，13]。以往有不少研究证实，HBeAg状态与肝脏疾病进展及肝细胞癌发生的危险度成正相关[14，15]。然而，也有不少研究表明，在HBeAg发生血清转换后仍可能出现肝脏疾病的进展[2]。

在对脾脏厚度与肝组织炎症或纤维化程度相关性的分析中，发现脾脏厚度≥4 cm组在肝脏炎症评分为≤4分、5～10分和＞10分组分别为15.4%、76.9%和7.7%，相对于脾脏厚度＜4 cm组的80.7%、16%和3.4%有明显差异。在肝脏纤维化评分为≤2分、3～4分和≥5分组脾肿大发生率分别为7.7%、15.4%和76.9%，可见脾脏越厚说明肝组织炎症和纤维化改变越重，这一结论对于无创检查技术评价患者肝脏疾病程度有着重要的意义。

本研究发现肝脏炎症和纤维化程度与患者吸烟史、饮酒史、性别和血清HBeAg状态均无明显的相关性。

进一步的多因素分析结果表明，脾脏厚度与肝组织炎症和纤维化程度呈独立正相关，血清HBV DNA载量与肝组织纤维化程度具有独立相关性，而与肝组织炎症无明显的相关性。其他因素如年龄、肝功能情况和HBeAg状态等不能判断肝组织炎症和纤维化程度。

[1]Centers for Disease Control and Prevention.Viral hepatitis:statisticsandsurveillance.http://www.cdc.gov/hepatitis/statistics.htm. Accessed January 2010.

[2]Chen CJ，Yang HI，Su J，et al.REVEAL-HBV Study Group. Risk of hepatocellular carcinoma across a biological gradient of serum hepatitis B virus DNA level.JAMA，2006，295:65–73.

[3]Iloeje UH，Yang HI，Su J，et al.The risk evaluation of viral load elevation and associated liver disease cancer-in HBV（the REVEAL-HBV）study group.Predicting cirrhosis risk based on the level of circulating hepatitis B viral load.Gastroenterology，2006，130:678-686.

[4]Lai CL，Yuen MF.The natural history of chronic hepatitis B.J Viral Hepat，2007，14（Suppl 1），6-10.

[5]Yang HI，Lu SN，Liaw YF，et al.Taiwan Community-Based Cancer Screening Project Group.Hepatitis B e antigen and the risk of hepatocellular carcinoma.N Engl J Med，2002，347:168-174.

[6]Yuen MF，Tanaka Y，Mizokami M，et al.Role of hepatitis B virus genotypes B and C，core promoter and precore mutations on hepatocellular carcinoma:a case control study.Carcinogenesis，2004，25:153-159.

[7]Yuen MF，Yuan HJ，Wong DK，et al.Prognostic determinants for chronichepatitisBinAsians:therapeuticimplications.Gut，2005，54:1610-1614.

[8]Alexander JV，Tin NT，Iser D，et al.Serum hepatitis B surface antigen and hepatitis B e antigen titers:Disease phase influences correlation with viral load and intrahepatic hepatitis B virus markers.Hepatology，2010，6（51）:1933-1944.

[9]Chen YC，Chu CM，Liaw YF.Age-specific prognosis following spontaneous hepatitis B eantigenseroconversioninchronic hepatitis B.Hepatology，2010，51（2）:435-444.

[10]中华医学会肝病学分会和感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）.实用肝脏病杂志，2011，14（2）：81-89.

[11]Ishak K，Baptista A，Bianchi L，et al.Histological grading and staging of chronic hepatitis.J Hepatol，1995，22:696-699.

[12]Manno M，Camma C，Schepis F，et al.Natural history of chronic HBV carriers in northern Italy:morbidity and mortality after 30 years.Gastroenterology，2004，127:756-763.

[13]Kim HC，Nam CM，Jee SH，et al.Normal serum aminotransferase concentration and risk of mortality from liver diseases:prospective cohort study.BMJ，2004，328:983.

[14]Anna SF，Lok B，McMahon J.Chronic hepatitis B:Update 2009. AASLD practice guidelines.Hepatology，2009，50（9）:1-36.

[15]European Association for the Study of the Liver.EASL Clinical Practice Guidelines:Management of chronic hepatitis B.J Hepatol，2009，50:115-123.

（收稿：2015-05-10）

（本文编辑：陈从新）

Natural progressive course of chronic hepatitis B virus infection in 132 patients with chronic hepatitis B virusinfectionwithfamilycluster

GuoSujuan，LiJuan，LiZhiwei.DepartmentofInfectiousDiseases，

Municipal Center Hospital，BaoJi 721008，Shannxi Province

10.3969/j.issn.1672-5069.2016.01.011

*辽宁省教育厅科学基金课题资助（编号：20060979）

721008陕西省宝鸡市中心医院感染病科（郭素娟）；中国医科大学附属盛京医院（李娟，李智伟）

郭素娟，E-mail：22255467@qq.com

李智伟，E-mail：Lizw2008@aliyun.com