三环唑对黄鳝鱼种的急性毒性及安全浓度评价

胡钱东，熊小琴（.内江市市中区水产渔政局，四川 内江　64000；.中国科学院水生生物研究所，湖北 武汉　43007）

三环唑对黄鳝鱼种的急性毒性及安全浓度评价

胡钱东1，熊小琴2
（1.内江市市中区水产渔政局，四川 内江641000；2.中国科学院水生生物研究所，湖北 武汉430072）

在常温条件下［水温为（23±2）℃，pH值6.8，溶氧4.6 mg/L］用经过处理的自来水，采用静水试验法，对平均体质量8.7 g/尾黄鳝鱼种进行三环唑的急性毒性试验。随着药物浓度的上升和浸泡时间的延长，黄鳝鱼种死亡量上升。三环唑对黄鳝鱼种24 h、48 h和96 h半致死浓度分别为9.87 mg/L、8.36 mg/L、6.53 mg/L，安全浓度为0.653 mg/L.结果表明：黄鳝鱼种对三环唑敏感，毒性为中毒级。

三环唑，黄鳝，急性毒性，半致死浓度

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.04.003

黄鳝（Monopterus albus Zuiew）在脊椎动物分类学上属硬骨鱼纲，合鳃目，合鳃科，黄鳝属。多生活在湖泊、塘堰、河道、沟渠、稻田及池沼中的底部，有性逆转现象［1-3］。由于黄鳝肉质细嫩，味道鲜美，富含不饱和脂肪酸，具有滋阴补肾的药用价值和食用价值，深受广大消费者的青睐，在国内外市场上销量大。稻田养鳝具有成本低、管理方便、疾病少、收益高等特点，稻田天然饵料比较丰富，水深正好适合黄鳝养殖的要求。而且黄鳝在田中钻洞打穴，疏松土壤，捕食稻田中的各种水生、陆生昆虫及其幼虫，减少水稻病虫害促进水稻生长，提高水稻产量［4-5］。因此，稻田养殖黄鳝意义重大。然而稻田施用农药与养鱼的矛盾尤为突出。在稻田养鱼过程中我们应选用高效、低毒、低残留、广谱性的农药，并且掌握农药的正常使用量和对鱼类的安全浓度［6-8］。

三环唑是中国稻田里常用的农药，主要用来治疗稻瘟病。其化学式为5-甲基-1，2，4三唑骈［3，4-b］苯骈噻唑，属于中等毒性杀菌剂，剂型95%原药，20%、40%、75%三环唑可湿性粉剂，30%悬浮剂，1%、4%粉剂，20%溶胶剂。特点为具有较强的内吸性的保护性杀菌剂。能迅速被各部位吸收，持效期长，药效稳定，用量低并且抗雨水冲刷［9］。在以往的研究中有三环唑对鲤鱼、鲫鱼、草鱼等稻田主养鱼的毒性报道［6］，但对黄鳝鱼种的毒性研究还未曾有过，所以我们选择这种药物对其进行急性毒性试验，找出三环唑对黄鳝苗种的安全浓度，希望在水稻增产的同时保护好稻田中的黄鳝资源，做到稻鱼双丰收，并为稻田中合理施用三环唑提供参考。

1　材料及方法

1.1供试鱼种和用水

黄鳝鱼种采购于内江农贸市场，平均体长16.8 cm，平均体质量8.7 g/尾；鱼种体表无伤痕，在水中游动正常，身体健康。试验用水为经充分曝气的自来水，pH值6.8，溶氧4.6 mg/L，水温为常温（23± 2）℃。

试验前黄鳝鱼种在试验室内规格为25 cm×30 cm×50 cm的水族缸内暂养7 d，使其适应试验环境，并剔除不活泼个体。试验前一天停止喂食，试验期间也不喂食［10］。

1.2供试药品

在标正作物科学有限公司购买3袋100 g/袋的75%三环唑可湿性粉剂。

1.3试验方法

实验采用常温静水试验法，在试验室内规格为25 cm×30 cm×50 cm的水族缸内进行该试验，在通常使用的药物剂量适当扩大或缩小进行预备试验，观察黄鳝的活动情况及存活情况，确定试验浓度区间（4.00～12.00 mg/L）。

式中r为公比，b为最高致死剂量，a为最低致死剂量，n为组数.朱蓓蕾，动物毒理学）［11，12］设立4.00、5.26、6.93、9.12、12.00 mg/L 5个浓度梯度组。

同时各设对照组和平行组。各试验组中随机放入10尾黄鳝。每24 h换三环唑试验液一次，及时剔除死亡个体。

试验开始时起做8 h连续观察，然后继续观察24、48、96 h黄鳝鱼种的试验，记录试验其中毒症状和病死率［13］。

黄鳝的死亡以镊子夹起其口裂，身体完全不动，然后用大量水冲洗，放入清水中5 min中仍不动为准［14］。

1.4数据处理方法

根据黄鳝鱼种死亡数及死亡时间，利用寇氏法［15］计算半致死浓度LC50，安全浓度按96 h LC50×0.1求得。计算公式如下：LgLC50=Xm-d（∑p-0.5），式中Xm为最大剂量的对数，d为相邻剂量比值的对数，p为各组的病死率（病死率以小数表示），∑p为各组病死率的总和。查反对数求LC50。

2　结果与分析

2.1毒性反应及症状

三环唑的浓度为12.00 mg/L时，40 min后黄鳝急剧狂游、撞壁，1 h后表现出明显的中毒症状：鱼头朝上伸出水面，鱼体卷曲。10 h后开始死亡，24 h病死率达到90%，28 h达到100%；浓度为9.12 mg/ L时，1h后急剧狂游，7 h后有明显的中毒症状，16 h后开始死亡，24 h病死率为20%，48 h为40%，96 h为60%；浓度为6.93时，2.3 h后鱼群游动剧烈，10h时有明显的中毒症状，20 h时病死率为10%，48 h病死率为30%，96 h为50%；浓度为5.26 mg/L时，3 h有狂游、击壁现象，随后程度减弱，在48 h时病死率为10%，但96 h时高达40%切有明显的中毒症状；浓度为4.00 mg/L时，4 h后也出现狂游、击壁现象，然后变得安静，96 h时病死率为10%。黄鳝鱼种死后身体僵直、弯曲，鳃部肿大、出血，肛门红肿、出血，体表有大量黏液。

2.2半致死浓度及95%置信值

三环唑对黄鳝鱼种96 h的急性毒性试验结果，见表1（为2次平行试验的平均结果）。

表1　三环唑对黄鳝鱼种急性毒性试验死亡统计

从表1可知，黄鳝苗种的病死率随着药物浓度的增加而上升，在12.00 mg/L时达到100%。24 h时，4.00、5.26、6.93、9.12、12.00 mg/L组的病死率分别为0%、0%、10%、20%、90%；48 h分别为0%、10%、30%、40%、100%；96h分别为 10%、40%、50%、70%、100%。对表1中的数据按公式进行计算，分别计算出三环唑对黄鳝鱼种的半致死浓度及Lg LC50的95%可信限［16］，见表2。

表2　三环唑对黄鳝鱼种的半致死浓度及LgLC50的95%可信限

从表2可知，三环唑对黄鳝鱼种24，48，96 h的半致死浓度分别为9.87、8.36、6.53 mg/L，安全质量浓度为0.653 mg/L。

3　讨论

3.1三环唑安全浓度

有毒物质对鱼类的毒性按LC50的大小可分为剧毒、高毒、中毒、低毒和微毒5个等级。本试验中，三环唑对黄鳝鱼种96 h LC50为6.53 mg/L，属中毒级，与标准毒性评价相同［17-19］。而三环唑的使用方法是：每667 m2用75%可湿性粉剂22 g，对水20～50 L，全田喷施［20］，施用浓度为0.44～1.10 g/L大于黄鳝鱼种的安全浓度0.653 mg/L，而且室外温度变化多端，会影响三环唑的作用机制使其毒性发生改变，同实验室条件下所得到的数据会有偏差，因此建议养殖户在黄鳝稻田养殖过程中慎用此药物，且养殖用水一定要经过严格的水质检查。

3.2影响三环唑半致死浓度的因素

黄鳝苗种周身无鳞、多黏液，能用咽腔和表皮呼吸。同时，由于其体表直接接触水体，所以也容易受水体中化学物质的影响。在以往的研究中有三环唑对鲤鱼（平均体质量为21.3 g/尾）的LC50为16.0 mg/L，对鲫鱼（平均体质量为27.3 g/尾）LC50为24.0 mg/L，对草鱼（平均体质量为32.3 g/尾）LC50为15.5 mg/L，它们的毒性评价都为中毒级，与该试验结果相同，但由于黄鳝鱼种是无鳞鱼类相对于以上有鳞鱼类在受到外源性药物的毒理作用时缺少了鳞片的保护黄鳝鱼种更容易受到伤害［15］；体质量大小的不一致也可能是导致三环唑药物不同剂量的原因之一，因此黄鳝鱼种的LC50为6.53 mg/L小于以上半致死浓度在影响因素内。而且不同种之间的种间差异——主要体现在生理功能方面，在对药物刺激的反应上有着不同的应答，在排毒时间、耐受性等方面的强弱造成药物的安全浓度、半致死浓度、死亡浓度的差异都值得我们去研究、探求［21］。

试验测得的黄鳝鱼种的96 h LC50为6.53 mg/ L，是在实验室条件下获得的数据，而野外环境中如pH值、温度、溶氧等都和实验室环境有着很大的差异且各种环境数据很不稳定，这时黄鳝鱼种的实际半致死浓度就会偏离实验数据，因此实验数据只能作为养殖用药参考，在实际生产中我们要根据黄鳝鱼种的具体中毒情形采取妥善的措施进行施救，挽回经济损失。

LC50值是评价外源化学物急性毒性的重要参数，但仍存在一定的局限性，主要表现在，消耗动物量大；获得的信息有限，动物死亡和观察的症状不足以反应生理学、血液学和其他化验检查所提供的毒性信息；有许多因素影响LC50的测定，实际上测得的LC50是近似值［22］。因此，客观性存在不足，还有不少值得推敲和深入探讨之处，其需要在实践中不断的修改，加以完善。

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Acute toxicity of tricyclazole to Monopterus albus and its safety assessment

Hu Qiangdong1，Xiang Xiaoqin2
（1.Fisheries Bureau of Shizhongqu，Neijiang 641000，China；2.Institution of Hydrobiology，Chinese Academy of Science，Wuhan 430072，China）

At room temperature conditions［water temperature was（23±2）℃，pH value of 6.8，dissolved oxygen 4.6 mg/L］of treated water by using the hydrostatic test，the average weight of 8.7 g/fish for Monopterus albus tail tricyclazole acute toxicity test.The results showed that:the average mortality of the tested Monopterus albus was increased with the raise of concentrations of tricyclazole and the delay of saking time；24 h，48 h and 96 h median lethal concentration of 9.87 mg/L，8.36 mg/L，6.53 mg/L，the safe concentration was 0.653 mg/L.The results showed that:tricyclazole was very sensitive to Monopterus albus and the toxicity was middle level.

tricyclazole；Monopterus albus；acute toxicity；median lethal concentration

S966.4

A

1004-2091（2016）04-0012-04

胡钱东（1987-），男，硕士，专业方向为水产动物疾病与免疫.E-mail:hqd19871114@163.com

（2015-08-11）