化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒标志物的临床比较

董春兰（青海省西宁市回族医院检验科，青海 西宁 810000）



化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙型肝炎病毒标志物的临床比较

董春兰
（青海省西宁市回族医院检验科，青海 西宁 810000）

目的 探讨比较化学发光免疫分析法（CLIA）与酶联免疫吸附法（ELISA）检测乙型肝炎病毒标志物的临床应用价值。方法 收集我院2014年12月至2015年4月142份血清标本，采用CLIA与ELISA两种方法进行HBV-M检测，分析比较两种方法下的检测结果。结果 142例乙型肝炎病毒患者的血清中，对于乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗体（HBeAb）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）三项标志物CLIA检出率明显高于ELISA，差异比较具有统计学意义（P＜0.05），而对于乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）两项标志物，CLIA与ELISA的检出率比较无统计学意义（P＞0.05）；CLIA检测较低HBsAg水平的敏感度要高于ELISA，但差异比较无统计学意义（P＞0.05）。结论 ELISA操作便捷，但敏感度欠佳；而CLIA可定量检测HBsAb、HBsAg，敏感度更高，对临床早期诊断及动态监测病情的适用价值高。

化学发光免疫分析法；酶联免疫吸附法；乙型肝炎病毒标志物

感染乙型肝炎病毒（HBV）后可进一步发展为急、慢性肝炎、肝功能衰竭、肝硬化等多种疾病，已成为引起全球关注的公共卫生问题之一。HBV感染的监测是预防及诊治乙型肝炎的重要方面，目前，酶联免疫吸附法（ELISA）是应用最多的检测手段之一，但仅仅限于定性检测，无法有效地进行定量分析，不利于动态监测病情的发展，使得多数患者的HBV感染的复制情况都无法呈现出来［1］。化学发光免疫分析法（CLIA）是近些年才逐渐发展起来的新一代标记免疫测定技术，不仅操作简单，且灵敏度、结果准确率都得到了大大的提升，在临床定量测定 HBV血清学标志物方面的应用逐渐深入，使得ELISA在定量方面的薄弱得到了很大的弥补。本文旨在通过对我院142份血清标本的研究，探讨比较CLIA与ELISA两种检测方法在乙型肝炎病毒标志物检测方面的应用价值，报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料：收集我院2014年12月至2015年4月142例门诊乙型肝炎患者的血清标本，其中男性76例，女性66例，年龄为16～66岁，平均年龄（43.8±2.1）岁。

1.2方法：采用CLIA与 ELISA两种方法对分别对142例血清标本进行HBV-M检测，HBV血清学标志物包括乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗体（HBeAb）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）等五项指标，按照试剂盒说明书进行操作，同时应用两种方法检测不同浓度的标准品。其中所应用到的仪器为：日立化学发光分析仪、美国SF-2100型酶标仪；化学发光免疫分析法试剂由郑州安图绿科生物工程有限公司提供，ELISA检测试剂盒由美国雅培公司提供。

1.3判断依据：①ELISA法以OD值与临界OD值的比值为分界点，其中HBsAg、HBeAg、HBsAb测定时，若比值≥1.00则判为阳性，否则为阴性，而HBeAb、HBcAb测定时，若比值≤1.00则判为阳性，否则为阴性。②CLIA法：其中HBsAg、HBsAb测定时以标准曲线作为参考，通过相对光强度（RLU）来计算浓度，此为定量法，当HBsAg ＞0.05 IU/mL则判为阳性，HBsAb＞10 IU/mL则判为阳性，否则为阴性；HBeAg与HBcAb测定时，以RLU值与临界RLU值的比值为分界点，当比值≥1.00则判为阳性，否则为阴性，而HBeAb测定时，若比值≤1.00则判为阳性，否则为阴性。

1.4统计学方法：应用SPSS13.0统计软件进行，计量资料以均值±标准差表示，采用t检验；计数资料用百分比表示，采用卡方检验。取P ＜0.05时差异具有统计学意义。

2　结 果

2.1CLIA与 ELISA两种方法测定。142例HBV-M结果比较：142例乙型肝炎病毒患者的血清中，对于乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗体（HBeAb）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）三项标志物CLIA检出率明显高于ELISA，差异比较具有统计学意义（P＜0.05），而对于乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）两项标志物，CLIA与ELISA的检出率比较无统计学意义（P＞0.05），见表1。

2.2CLIA与ELISA两种方法检测HBsAg的灵敏度试验：根据卫生部2.00 IU/mL HBsAg定值参比血清，使用双倍的阴性血清进行稀释，采用CLIA与ELISA两种方法进行检测，结果显示CLIA与ELISA检出最低浓度分别为0.03 IU/mL、0.13 IU/mL，CLIA检测较低HBsAg水平的敏感度要高于ELISA，但差异比较无统计学意义（P＞0.05）。

3　讨 论

表1　CLIA与ELISA两种方法测定142例HBV-M结果比较［n（%）］

我国为乙型肝炎的高发国家，据权威调查显示，我国乙型病毒肝炎发生率一直呈居高不下之势，表面抗原携带率达到15%左右［2］。HBV感染的监测是预防及诊治乙型肝炎的重要方面。传统检测方法ELISA检测HBV具有简便快速、价格低廉的好处，对临床乙型肝炎疾病诊断贡献较大，但是由于该检测方法仅限于定性分析，一旦血清标本中的检测指标浓度过大便会受到钩状效应的影响而导致最终结果呈假阴性［3］，同时检测过程中也存在着比较多的干扰因素而影响了结果的稳定性，且不利于动态监测病情的发展，使得多数患者的HBV感染的复制情况都无法呈现出来，因而这使得ELISA在临床的应用受限。而在医疗发展进步的当下，为了满足临床实际的需求，必定要有所突破来弥补ELISA的定量缺陷。CLIA是近些年才逐渐发展起来的新一代标记免疫测定技术，是根据发光底物的发光强度来进行检测分析，灵敏度高，本研究中CLIA检出最低浓度可低至0.03 IU/mL，而ELISA则相对高至0.13 IU/mL，这说明CLIA可准确有效地检测出低浓度的乙型肝炎病毒表面抗原。

本研究结果还显示，142例乙型肝炎病毒患者的血清中，对于HBsAg、HBeAb、HBeAg三项标志物CLIA检出率明显高于ELISA，比较具有统计学意义（P＜0.05），而对于HBsAb、HBcAb两项标志物CLIA与ELISA的检出率比较无统计学意义（P＞0.05），这进一步证实ELISA操作便捷，但敏感度欠佳；而CLIA可定量检测HBsAb、HBsAg，敏感度更高，对临床早期诊断及动态监测病情的适用价值高。

［1］ 梁秀云.时间分辨荧光免疫法和化学发光免疫分析法检测人血清乙肝病毒表面抗原浓度的差异性分析［J］.医学信息（上旬刊），2011，24（8）：4946-4947.

［2］ 李琦，尚晓泓.化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫吸附法检测感染性疾病抗原抗体的比较［J］.国际检验医学杂志，2012，33 （7）：846-847.

［3］ 陈瀑，史静，邹麟.HBsAg 定量检测在慢性乙型肝炎自然病程中的意义［J］.中国微生态学杂志，2013，25（8）：928-930.

R446.6；R512.6+2

B

1671-8194（2016）19-0044-02