新生儿败血症早产儿与足月儿的病原学特点分析

李清红，杨军兰，何阿玲，郭金珍，李占魁

(西北妇女儿童医院新生儿科，陕西 西安 710061)



新生儿败血症早产儿与足月儿的病原学特点分析

李清红，杨军兰，何阿玲，郭金珍，李占魁

(西北妇女儿童医院新生儿科，陕西 西安 710061)

[摘要]目的探讨新生儿败血症早产儿与足月儿的病原菌构成及耐药性状况，为临床合理用药提供依据。方法回顾性分析西北妇女儿童医院2012年1月1日至2014年12月31日经临床和血培养确诊的97例早产儿与43例足月儿败血症的病原学资料，并对其进行统计学分析。结果革兰氏阳性球菌在足月儿组中检出比例高于早产儿组(χ2=15.36，P<0.01)，真菌仅在早产儿组中检出(χ2=8.57，P<0.01)。葡萄球菌和肠杆菌对常用抗菌药物耐药严重，且呈多药耐药。万古霉素、利奈唑胺、亚胺培南未发现耐药株。结论早产儿与足月儿败血症在病原菌方面存在一定差异，早产儿易发生真菌性感染。检出的葡萄球菌和肠杆菌对常用抗菌药物耐药严重，应引起重视。

[关键词]新生儿败血症；足月儿；早产儿；病原菌；耐药性

新生儿病房中败血症仍是引起死亡和严重并发症的主要原因之一，尤其是早产儿[1]。随着新生儿救治水平的提高及抗菌药物的不断研发应用，新生儿败血症的病原菌特点也随之发生变化。因此，研究新生儿败血症的病原菌分布特点、细菌耐药变迁趋势对有效控制新生儿感染，减少新生儿死亡率具有重要作用。本文回顾性分析了西北妇女儿童医院2012年1月至2014年12月140例确诊为新生儿败血症的病原学资料，研究早产儿与足月儿的病原菌及耐药性状况，以期为临床诊治、合理用药提供重要依据。

1资料与方法

1.1研究对象

选择2012年1月1日至2014年12月30日期间，在西北妇女儿童医院住院的新生儿中，经临床和血培养确诊的140例新生儿败血症资料进行回顾性研究，均经监护人知情同意。新生儿败血症的诊断依据中华医学会儿科学分会新生儿学组和中华医学会中华儿科杂志编辑委员会的《新生儿败血症诊疗方案》(2003年)。根据胎龄大小分为足月儿(≥37周)和早产儿(<37周)。在140例新生儿败血症中，男80例(57.14%)，女60例(42.86%)；早产儿97例(69.29%)，足月儿43例(30.71%)；早发型败血症43例(30.71%)，晚发型败血症97例(69.29%)。

1.2标本采集

全部病例均在抗菌药物治疗前，严格无菌操作下，在两个不同部位分别采血1.5～2mL注入专用血培养瓶中送本院细菌室进行血培养及药物敏感试验。

1.3仪器和试剂

采用法国生物梅里埃公司的BacT/ALERT3D全自动血培养仪，BacT/ALERT PF血培养瓶。细菌的分离鉴定参照全国临床检验规程进行操作，并经法国生物梅里埃公司VITEK 2-compact生化鉴定系统进行鉴定。葡萄球菌、肠细菌药敏试剂盒均为法国生物梅里埃公司生产。

1.4质控菌株

标准质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853作为药敏试验质控菌，大肠埃希菌ATCC25922和肺炎克雷伯菌ATCC700603分别作为ESBLs纸片法筛选和确证试验的阴性和阳性质控菌。

1.5统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件进行分析，计数资料用例数及百分率表示，组间比较应用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1病原菌种类构成比的变化情况

本次共分离出病原菌种类26株，凝固酶阴性葡萄球菌检出率最高，共38例(27.14%)，其中以表皮葡萄球菌为主，有20例(14.29%)；肠球菌次之，共22例(15.71%)，其中以屎肠球菌为主，有19例(13.57%)；真菌第3，共17例(12.14%)；大肠埃希菌第4，共15例(10.71%)；肺炎克雷伯菌第5，共12例(8.57%)。

2012年检出前5位病原菌分别为肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、真菌、屎肠球菌；2013年前5位病原菌分别为屎肠球菌、真菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌；2014年前5位病原菌分别为表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、屎肠球菌、沃氏葡萄球菌、大肠埃希菌，见图1。

图12012至2014年新生儿败血症病原菌检出前5位

Fig.1The first 5 kinds of pathogens isolated in neonatal sepsis which were detected in the period of 2012 to 2014

2.2早产儿与足月儿败血症病原菌种类构成情况

引起早产儿败血症的前5位病原菌分别为屎肠球菌19例(19.59%)、真菌17例(17.53%)、大肠埃希菌11例(11.34%)、肺炎克雷伯菌10例(10.31%)、表皮葡萄球菌8例(8.25%)；引起足月儿败血症的前5位病原菌分别为表皮葡萄球菌12例(27.91%)、无乳链球菌6例(13.95%)、金黄色葡萄球菌5例(11.63%)、大肠埃希菌4例(9.30%)、粪肠球菌3例(6.98%)，见图2。

两组病原菌中均以革兰氏阳性球菌所占比例最多，其中以凝固酶阴性葡萄球菌为主。革兰氏阳性球菌在足月儿组中检出比例高于早产儿组，差异有统计学意义(P<0.01)；真菌仅在早产儿组中检出，足月儿组中未检出(P<0.01)；革兰氏阳性杆菌和革兰氏阴性杆菌在两组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)，见表1。

2.3主要检出菌耐药性情况

2.3.1葡萄球菌耐药性情况

45例葡萄球菌中检出耐药菌株28例(62.22%)，其中早产儿组耐药菌株16例(57.14%)、足月儿组耐药菌株12例(42.86%)。两组检出金黄色葡萄球菌共7例，仅在足月儿组中检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA)2例，产酶率28.57%。两组检出凝固酶阴性葡萄球菌共38例，其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin resistant coagulase-negative staphylococci，MRCNS)26例(早产儿组16例，足月儿组10例)，产酶率68.42%。仅在早产儿组中检出红霉素诱导克林霉素耐药试验(D-试验)阳性2例，阳性率7.69%(2/26)。早产儿组中左氧氟沙星耐药率最高，达85.71%；足月儿组中头孢唑林耐药率最高，达75.00%；万古霉素和利奈唑胺在两组中均未发现耐药株，见表2。

2.3.2肠杆菌耐药性分析

36例肠杆菌中检出产超广谱 -内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases，ESBLs)菌株19例，产酶率为52.78%。早产儿组肠杆菌29例，ESBLs耐药菌株17例(58.62%)。足月儿组肠杆菌7例，ESBLs耐药菌株2例(28.57%)。早产儿组发生耐药率较足月儿组高。在所有药敏中，不加酶头孢菌素类耐药率均较高，加酶后耐药率明显降低。亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦在两组中均未发现耐药株，见表3。

图2两组新生儿败血症检出的前5位病原菌

Fig.2The first 5 kinds of pathogens isolated in preterm and full-term infants with sepsis

表1新生儿败血症早产儿与足月儿的病原菌构成比较结果[n(%)]

Table 1 Number and percentage of pathogens isolated in preterm and full-term infants with sepsis[n(%)]

表2葡萄球菌耐药性分析

Table 2Analysis of drug resistance to staphylococcus

抗菌药物 早产儿(n=21) 足月儿(n=24) 株数(n)耐药率(%)株数(n)耐药率(%)青霉素1676.191354.17头孢唑林1571.431875.00头孢西丁942.86833.33红霉素314.29416.67克林霉素29.52312.50阿米卡星942.86729.17利福平733.33625.00左氧氟沙星1885.711666.67万古霉素0000替考拉宁314.2900利奈唑胺0000复方新诺明838.101458.33

表3肠杆菌耐药性分析

Table 3Analysis of drug resistance to enteric bacilli

抗菌药物 早产儿(n=29) 足月儿(n=7) 株数(n)耐药率(%)株数(n)耐药率(%)氨苄西林/舒巴坦724.14114.29头孢呋辛2275.86228.57头孢西丁310.34114.29头孢噻肟1862.07228.57头孢他啶1448.28114.29头孢哌酮/舒巴坦13.4500哌拉西林/他唑巴坦0000头孢肶肟1137.9300亚胺培南0000阿米卡星0000左氧氟沙星413.79228.57复方新诺明1448.28342.86

3讨论

新生儿败血症是指新生儿期细菌或真菌侵入血液循环并在其中生长繁殖，产生毒素所造成的全身感染，是新生儿期死亡的重要原因[2]。尽早明确病原菌及合理选用抗菌药物有利于治疗、改善结局和预后。随着新生儿诊治技术的进步及住院新生儿疾病谱的变化，新生儿败血症及病原菌特点也呈一定变迁，因此及时了解本地区病原菌的流行分布和耐药情况对指导临床合理使用抗生素、减少耐药菌和院内感染发生率具有重要意义。

3.1病原菌种类构成分析

2010年1月至2012年5月本院新生儿败血症检出前5位病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、无乳链球菌、产单核李斯特菌[3]。本研究收集了2012年1月至2014年12月本院新生儿败血症检出前5位病原菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、真菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌。近5年来凝固酶阴性葡萄球菌仍是第1位检出菌，与王健等[4]报道的102例新生儿败血症患儿83.3%为葡萄球菌感染相同。康喆等(2014年)对本院2009年1月至2012年6月早产儿败血症检出前5位病原菌依次为肺炎克

雷伯杆菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、真菌、屎肠球菌。本研究中引起早产儿败血症的前5位病原菌分别为屎肠球菌、真菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、表皮葡萄球菌；引起足月儿败血症的前5位病原菌分别为表皮葡萄球菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、粪肠球菌。无论是早产儿还是足月儿革兰氏阳性球菌引起的败血症均占比例最高，足月儿败血症中革兰氏阳性球菌(79.07%)的检出比例高于早产儿(43.30%)。得出结论与国内外报道基本相符，凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤黏膜的正常菌群之一，可产生黏附素滞留在各种物体表面，消毒处理困难，与NICU中新生儿败血症的发病率和病死率有重要关系[5-6]，革兰氏阳性菌仍是新生儿败血症的主要病原菌[7-8]。钟巧等[7]也发现革兰氏阳性球菌在足月儿组(84.1%)中检出比例高于早产儿组(64.2%)。引起早产儿败血症的病原菌近5年有变迁，本研究中17例真菌性败血症患儿均为早产儿，考虑与早产儿住院时间长、免疫功能低下、长期使用广谱抗生素、侵入性操作多、全肠外营养、机械通气等高危因素有关。

3.2耐药性分析

本研究显示，45例葡萄球菌中检出金黄色葡萄球菌7例，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌2例，产酶率为28.57%。凝固酶阴性葡萄球菌38例，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌26例，产酶率为68.42%，其中红霉素诱导克林霉素耐药试验(D-试验)阳性2例。早产儿和足月儿葡萄球菌败血症对青霉素、头孢唑林、左氧氟沙星的耐药率均较高，万古霉素和利奈唑胺未发现耐药株。在36例肠杆菌中检出产超广谱 -内酰胺酶细菌19例，产酶率为52.78%。与既往研究发现相同，两种菌的耐药率均较高[4,7]。在所有药敏中不加酶头孢菌素类耐药率高，加酶后耐药率明显降低，含酶抑制剂的第3代头孢菌素已成为新生儿危重感染的首选药物。早产儿肠杆菌败血症对常用抗菌药物耐药率比足月儿高，考虑与早产儿的抗生素使用率较高有关。在本研究中亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦未发现耐药株。但是近年来由于万古霉素、亚胺培南、头孢菌素等广谱抗生素的大量使用，多重耐药、高度耐药问题日益严重，迫切需要加强感染防控措施、合理应用抗生素、预防细菌耐药、降低广谱抗生素使用率。

[参考文献]

[1]Miller A E, Morgan C, Vyankandondera J.Causes of puerperal and neonatal sepsis in resource-constrained settings and advocacy for an integrated community-based postnatal approach[J].Int J Gynaecol Obstet,2013,123(1):10-15.

[2]邵肖梅,叶鸿瑁,丘小汕.实用新生儿学[M].4版.北京:人民卫生出版社,2011:340.

[3]杨军兰,董玲,杨侠等.新生儿血培养病原菌分布及其耐药性分析[J].山西医药杂志(下半月版),2013,42(1):90-92.

[4]王健,刘彦慧,孙晓勉.新生儿败血症的临床治疗与病原菌药敏检测[J].中国妇幼健康研究,2011,22(2):175-176.

[5]Abd El Hafez M, Khalaf N G, El Ahmady M,etal.An outbreak of methicillin resistant Staphylococcus epidermidis among neonates in a hospital in Saudi Arabia[J].J Infect Dev Ctries,2011,5(10):692-699.

[6]Amaya E, Caceres M, Fanc H,etal.Antibiotic resistance patterns in gram-negative and gram-positive bacteria causing septicemia in newborns in León, Nicaragua:correlation with environmental samples[J].J Chemother,2010,22(1):25-29.

[7]钟巧,李晖,高晓玲,等.NICU早产与足月新生儿败血症特点对比研究[J].中华医院感染学杂志,2014,24(1):211-213.

[8]Ho T S, Wang S M, Wu YH,etal.Long-term characteristics of healthcare-associated infections in a neonatal intensive care unit[J].J Microbiol Immunol Infect,2010,43(5):407-415.

[专业责任编辑：周熙慧]

[收稿日期]2016-04-18

[作者简介]李清红(1976-)，女，主治医师，主要从事早产儿管理工作。

[通讯作者]李占魁，主任医师。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.07.004

[中图分类号]R722.13+1

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5293(2016)07-0798-03

Etiological analysis of neonatal sepsis in preterm and term infants

LI Qing-hong, YANG Jun-lan, HE A-ling, GUO Jin-zhen, LI Zhan-kui

(Department of Neonatology, Northwest Women and Children Hospital, Shaanxi Xi’an 710061, China)

[Abstract]Objective To evaluate the pathogenic bacterium constitution and drug resistance of neonatal sepsis in preterm and term infants, so as to provide evidence for reasonable medication in clinics. Methods The pathogenic data of 97 preterm and 43 term cases of neonatal sepsis diagnosed in department of neonatology in Northwest Women and Children Hospital from January 1, 2012 to November 31, 2014 were retrospectively analyzed. Statistical analysis was performed. Results The detection rate of Gram-positive cocci in term infant group was higher than that in preterm infant group (χ2=15.36, P<0.01). Fungal infection was only found in preterm infant group (χ2=8.57,P<0.01). Staphylococcus and enterobacteria were highly resistant to commonly used antibiotics and demonstrated multi-drug resistance. The pathogenic bacterium resistant to vancomycin, linezolid and imipenem were not found. Conclusion Preterm and term infants with sepsis are somewhat different in pathogenic bacterium. Preterm infants are more likely to suffer fungal infection. Staphylococcus and enterobacteria are highly resistant to commonly used antibiotics, which should attract great attention.

[Key words]neonatal sepsis; preterm infant; term infant; pathogenic bacteria; drug resistance