结肠癌中Ezrin蛋白的表达及临床病理学意义

贺爱军,任　羽

(延安大学附属医院,1.普通外科; 2.血液科,陕西 延安,716000)



结肠癌中Ezrin蛋白的表达及临床病理学意义

贺爱军1,任羽2

(延安大学附属医院,1.普通外科; 2.血液科,陕西 延安,716000)

摘要:目的观察和分析结肠癌中Ezrin蛋白的表达及临床病理学意义。方法选取100例结肠癌组织标本、100例癌旁组织标本、56例转移淋巴结组织标本作为研究材料，应用免疫组化法对各类标本中的Ezrin蛋白表达水平进行检测和比较。结果转移淋巴结组织中的Ezrin蛋白表达阳性率显著高于结肠癌组织或癌旁组织，结肠癌组织中的Ezrin蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05); 不同肿瘤分化程度、侵犯浆膜情况、淋巴结转移情况、临床分期和生存时间患者的结肠癌组织中的Ezrin蛋白表达阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论结肠癌的侵袭和转移等临床病理特征与肿瘤组织中的Ezrin蛋白高表达密切相关，Ezrin蛋白表达水平可作为评价结肠癌病理特征和患者预后的辅助指标。

关键词:结肠癌; Ezrin蛋白; 免疫组化法; 病理学特征

结肠癌是临床上较为常见的胃肠道恶性肿瘤，以40～60岁人群的发病率最高[1]。目前，临床上针对结肠癌的主要治疗方式为手术治疗，在保证根除病灶的前提下，综合应用术后化疗、靶向治疗、内分泌治疗及免疫治疗能够减少转移的发生率和复发率，提高患者的生活质量和生存率[2]。消化道是血供和淋巴循环分布丰富的组织，结肠癌易早期出现血行转移和淋巴结转移，而且结肠癌细胞的生物学行为存在较大的异质性，这导致结肠癌患者的肿瘤病理特征和预后也存在着较大的差异[3]。本研究分析结肠癌中Ezrin蛋白的表达及临床病理学意义，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2009年1月—2013年5月在本院行手术切除的结肠癌标本100份，标本均来自不同患者，均经术后病理检查证实为结肠癌。所有纳入患者术前均未经化疗治疗，且均无远处脏器转移，其中男61例，女39例，年龄为35～76岁，平均为(54.3±9.2)岁；高分化癌51例，中等分化癌33例，低分化癌16例; 59例患者的肿瘤直径≤5 cm者,41例患者的肿瘤直径>5 cm者; 56例患者伴有淋巴结转移,48例患者的肿瘤侵及浆膜。同时选取与上述肿瘤组织一并切除的100例癌旁良性组织、56例转移淋巴结组织作为研究对象。

1.2研究方法

应用免疫组化法对上述组织中的Ezrin蛋白表达情况进行检测和分析，具体方法为:取上述标本组织，经脱蜡、水化，抗原修复后以PBS漂洗，置于H2O2中10 min后于正常血清中在37 ℃温度下孵育15 min,加入1:50稀释的抗Ezrin单克隆抗体，以PBS代替一抗作为对照，在4 ℃的温度下过夜，加人二抗在37℃下孵育60 min,经DAB显色、苏木精复染后封片镜检。Ezrin蛋白阳性着色主要分布在细胞质或细胞膜中，根据细胞染色强度和表达阳性细胞比例进行分级，其中各视野中均无着色细胞计为(-),各视野平均着色细胞数<50%或染色较浅计为(+),各视野中平均着色细胞数>50%且染色较深计为(2+),以分级结果为(+)或(2+)为阳性表达。

1.3统计学方法

应用 SPSS 22.0统计软件进行统计学分析，计数资料以百分比的形式表示，有等级关系的计数资料比较应用频数表的秩和检验(Mann-Whitney U法)进行处理，无等级关系的计数资料应用卡方检验或Fisher 精确概率法进行处理，均以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1不同组织中的Ezrin蛋白表达阳性率的比较

三种组织标本中的Ezrin蛋白表达阳性率的差异有统计学意义(χ2=27.243,P<0.01),其中转移淋巴结组织中的Ezrin蛋白表达阳性率显著高于结肠癌组织或癌旁组织，结肠癌组织中的Ezrin蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),见表1。

表1　不同组织中的Ezrin蛋白表达阳性率的比较

与癌组织比较,*P<0.05; 与癌旁组织比较,##P<0.05。

2.2Ezrin蛋白表达与结肠癌临床病理学特征的相关性分析

不同肿瘤分化程度、侵犯浆膜情况、淋巴结转移情况、临床分期和生存时间患者的结肠癌组织中的Ezrin蛋白表达阳性率差异均有统计学意义(U=2.995、4.576,χ2=13.675、21.645、15.818,P<0.05),见表2。

表2　Ezrin蛋白表达与结肠癌临床病理学特征的相关性

与同一临床特征的亚项比较,**P<0.01。

3讨论

侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，也是导致肿瘤患者死亡的重要原因之一。研究[4]发现，结肠癌的侵袭和转移与肿瘤浸润深度、分化程度及肿瘤所在的解剖部位等临床病理因素有关。近年来，随着分子生物学技术和人类基因组学研究的迅速发展，发现肿瘤转移是多种基因调控、多因素参与、多阶段发展的复杂病理过程，同时也发现了很多与之高度相关的基因及其产物，而他们也成为了临床肿瘤靶向治疗的重要靶点或评价肿瘤患者预后、转移的重要指标，针对肿瘤转移的相关蛋白研究已成为肿瘤研究领域的热点问题。相关研究结果[5-8]显示，磷脂酰肌醇3激酶(P13K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路、Wnt信号通路/Hedgehog(Hh)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等蛋白信号通路在结肠癌迁移、侵袭、相关血管内皮细胞功能异常、表皮生长因子和肝细胞生长因子表达水平上调等多种生物学行为中均发挥着重要的作用。

本研究结果显示，在结肠癌肿瘤组织和转移淋巴结组织中,Ezrin蛋白表达阳性率均明显升高，而且转移淋巴结组织中的Ezrin蛋白表达阳性率还要显著高于结肠癌组织，结肠癌组织中的Ezrin蛋白表达水平与肿瘤分化程度、侵犯浆膜情况、淋巴结转移情况、临床分期和患者生存时间等均具有相关性，这说明结肠癌的侵袭和转移等病理特征及患者预后均与Ezrin蛋白表达水平的上调具有密切的相关性。Ezrin蛋白表达水平可作为评价结肠癌病理特征和预后的重要辅助指标。Ezrin蛋白是ERM蛋白家族中的重要成员之一，是一种膜细胞骨架连接蛋白，能够通过介导细胞膜与细胞骨架的连接来调节细胞形态、运动、黏附及细胞信号转导，是细胞维持其形状、运动、极性及其信号转导所不可缺少的一种蛋白。研究结果[9]显示，Ezrin蛋白参与了微绒毛的形成并能够与CD43、CD44、E-cadherin、ICAM-1、F-型肌动蛋白等细胞膜和细胞骨架组件相连接而发挥多种生物学作用。Ezrin蛋白在1981年首次被发现，但其后的10多年中一直被认为只是细胞骨架的重要组成成分。直到2004年，有学者发现Ezrin蛋白表达水平异常与骨肉瘤、横纹肌肉瘤的转移有关,Ezrin蛋白的重要意义才被逐渐重视。近年来的研究[10]证实,Ezrin蛋白在妇科肿瘤、消化道肿瘤、黑色素瘤及鼻咽癌、成人软组织肿瘤等多种肿瘤细胞中存在高表达，并在肿瘤组织中的发生、发展、浸润、转移等生物学行为中发挥着重要作用，与多种肿瘤的发病风险、病情进展及预后高度相关。研究者[11]发现Ezrin蛋白的高表达能够通过改变肿瘤细胞极性和细胞运动、调节肿瘤细胞间及细胞外基质的黏附力、参与肿瘤细胞内信号转导等多种机制来影响恶性肿瘤的转移,Ezrin蛋白的高表达可打破正常细胞内的细胞信号转导相关分子(Rho)、受体酪氨酸蛋白激酶等信号传递网络，并借助这些信号转导网络对肿瘤细胞的形态、黏附、吞噬、运动、血管形成等一系列生物学行为发挥调控作用，最终赋予肿瘤细胞高转移活性。Ezrin蛋白的作用几乎贯穿于肿瘤细胞转移的整个过程，包括肿瘤细胞从原发灶脱落并具有运动性、侵入周围组织及脉管系统、穿透基底膜、在靶器官增殖形成转移灶等多个环节。

综上所述，结肠癌的侵袭和转移等临床病理特征与肿瘤组织中的Ezrin蛋白高表达密切相关,Ezrin蛋白表达水平可作为评价结肠癌病理特征和患者预后的辅助指标。

参考文献

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收稿日期:2016-04-11

中图分类号:R 735.3

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2016)15-050-03

DOI:10.7619/jcmp.201615014

Expression of Ezrin protein in colonic carcinoma and its clinical pathological significance

HE Aijun1,REN Yu2

(1.Department of General Surgery; 2.Department of Hematology,The Affiliated Hospital of Yan′an University,Yan′an,Shaanxi,716000)

ABSTRACT:ObjectiveTo observe and analyze the expression of Ezrin protein in colonic carcinoma and its clinical pathological significance.MethodsA total of 100 specimens of colonic carcinoma tissues,100 specimens of paracancerous tissues and 56 specimens of metastatic lymph node tissue were selected as the research materials.The immunohistochemical method was used to detect the expression of Ezrin protein in all kinds of specimens.ResultsThe positive expression rate of Ezrin protein in metastatic lymph node tissues was significantly higher than that in colonic carcinoma tissues or paracancerous tissues,and the positive expression rate of Ezrin protein in colonic carcinoma tissues was significantly higher than that in paracancerous tissues (P<0.05).There were significant differences in the positive expression rates of Ezrin protein among the patients with different conditions of tumor differentiation degree,serosa invasion,lymph node metastasis,clinical stage and survival time (P<0.05).ConclusionThe clinical pathological characteristics such as invasion and metastasis of colonic carcinoma are closely correlated with the high expression of Ezrin protein in tumor tissues,and the expression of Ezrin protein can be used as an auxiliary indicator to evaluate the clinical pathological characteristics and the prognosis of the patients with colonic carcinoma.

KEYWORDS:colonic carcinoma; Ezrin protein; immunohistochemistry method; pathological characteristics