一测多评法测定厚朴饮片中厚朴酚与和厚朴酚含量

邬伟魁　　严倩茹（梅州市食品药品监督检验所，广东 梅州　514071）

一测多评法测定厚朴饮片中厚朴酚与和厚朴酚含量

邬伟魁严倩茹
（梅州市食品药品监督检验所，广东 梅州514071）

目的：建立厚朴饮片中厚朴酚与和厚朴酚含量的一测多评方法。方法：在《中国药典》2010年版厚朴含量测定方法的基础上，测定厚朴酚与和厚朴酚间的相对校正因子，考察其重现性，比较计算值与测得值的差异。结果：用一测多评法对5批厚朴饮片中厚朴酚与和厚朴酚进行测定，与外标法实测值基本一致。结论：该方法可靠，结果准确，可用于厚朴饮片的质量控制。

一测多评；厚朴；厚朴酚；和厚朴酚

厚朴为木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.）或凹叶厚朴（Magnolia offinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥干皮、根皮及枝皮。功能燥湿消痰，下气除满。用于湿滞伤中，脘痞吐泻，食积气滞，腹胀便秘，痰饮喘咳。《中国药典》2010年版收载了厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定方法［1］。一测多评法（QAMS）可在某些对照品不易得到或不稳定的情况下，使用一个对照品辅以相对校正因子同步测定多成分的含量，已在中药材及饮片质量评价中广泛应用［2-6］。本实验以厚朴酚为内参物，用QAMS测定厚朴饮片中厚朴酚与和厚朴酚。

1　仪器与试药

高效液相系统（Agilent 1100；SHIMADZU LC-20AT，检测器SPD-20A；SHIMADZU LC-20AT，检测器SPD-M20A）；BP 211D电子分析天平（德国Sartorius公司）。厚朴（批号：20140203、20140309，广东联丰中药饮片有限公司；批号：1404004、1501001，江西樟树天齐堂中药饮片有限公司）；姜厚朴（批号：14081907，江西彭氏国药堂饮片有限公司）。厚朴酚对照品（批号：110729-200310，含量以 100%计）、和厚朴酚对照品（批号：110730-201011，含量以98.4%计）购于中国食品药品检定研究院。甲醇为色谱纯，水为超纯水。

2　方法

2.1色谱条件

色谱柱为：Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm× 4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水（78∶22）；检测波长为294 nm。理论板数按厚朴酚峰计算均应不低于3 800。

2.2对照品溶液的制备

取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每 1 mL含厚朴酚40.56 μg、和厚朴酚26.62 μg的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，摇匀，密塞，浸渍 24 h，滤过，精密量取续滤液 5 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.4测定法

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各4 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本实验参照《中国药典》2010年版中厚朴的含量测定［1］条件，方法成熟，故不做加样回收率试验等方法学考察。

3　 QAMS系统适用性考察

3.1不同含量考察

取厚朴酚与和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成系列混合溶液，考察含量对相对校正因子的影响，见表1。

表1　　不同含量的相对校正因子

3.2色谱柱考察

取“2.2”项下的混合对照溶液，在Agilent 1100高效液相色谱仪上进样，以厚朴酚为内标，计算和厚朴酚对厚朴酚的相对校正因子，考察了柱①：Ailent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱②：SIMADZU VP-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱③：SHIMADZU VP-ODS（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱④：依利特Kromasil C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）4种色谱柱对相对校正因子的影响，结果见表2，不同色谱柱的相对校正因子基本一致。

表2　　不同色谱柱的相对校正因子

3.3高效液相色谱仪考察

考察了 Agilent 1100、SHIMADZU LC-20AT（检测器SPD-20A）、SHIMADZU LC-20AT（检测器SPD-M20A）3台高效液相色谱仪对相对校正因子的影响，结果见表3，不同液相色谱系统所得相对校正因子基本一致。

表3　　不同液相色谱的相对校正因子

3.4色谱峰专属性考察

利用相对保留时间进行定位，即以和厚朴酚色谱峰与厚朴酚色谱峰的相对保留时间来确定，厚朴酚与和厚朴酚峰相对保留时间的平均值为1.37，RSD为1.3%，见表4。

表4　2种成分的相对保留时间

4　样品测定

用QAMS对5批样品中厚朴酚与和厚朴酚进行测定，用3种方法对计算值与外标法实测值进行比较：①QAMS计算值和实测值之间的夹角余弦值［2］为0.999 999，表明两种方法测得结果没有显著性差异。②用配对t检验［7］比较两种方法所得结果，P=0.1＞ 0.05，表明结果没有显著性差异。③两种方法测定5批样品结果的RSD在0.0～2.0%，认为结果基本一致。见表5。

表5　　厚朴酚与和厚朴酚的测定（n=2）

5　讨论

QAMS同时测定黄连［1］中小檗碱等5个成分含量、丹参［8］中3个丹参酮类成分含量的方法已被《中国药典》2010年版收载。部分对照品不易得到、不稳定或价格昂贵，QAMS给质量控制带来便利，可降低检验成本。中药材及饮片生产与监督环节中每年需要消耗大量的对照品。厚朴酚对照品（20 mg/支）为 164元，和厚朴酚对照品（20 mg/支）为252元。基于现行《中国药典》含量测定方法，建立厚朴的QAMS，对照品耗费可降低约60%。本实验以厚朴酚为内参物，采用QAMS测定厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量，方法可行，降低了检验成本。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：235，285.

［2]王智民，高慧敏，付雪涛，等.“一测多评”法中药质量评价模式方法学研究［J］.中国中药杂志，2006，31（23）：1925-1928.

［3］高慧敏，宋宗华，王智民，等.适合中药特点的质量评价模式——QAMS研究概述［J］.中国中药杂志，2012，37（4）：405-416.

［4]陈建维，刘圆，刘晟楠，等.一测多评法测定枳实中4种黄酮类成分［J］.中草药，2015，46（9）：1374-1377.

［5］刘圆，魏惠珍，龚建平，等.一测多评法测定健脾丸中4种黄酮类成分［J］.中成药，2015，37（5）：995-999.

［6]王智民，钱忠直，张启伟，等.一测多评法建立的技术指南［J］.中国中药杂志，2011，36（6）：657.

［7］柏冬，范斌，牛晓红，等.HPLC-系统内标法测定桂枝汤中芍药苷、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛和甘草酸［J］.中草药，2010，41（3）：387-390.

［8］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版第三增补本［S］.北京：中国医药科技出版社，2014：63.

Content Determination of Magnolol and Honokiol in Magnoliae Officmalis Cortex by Quantitative Analysis of Multi-components by Single-marker

Wu Weikui，Yan Qianru（Meizhou Institute for Food and Drug Control，Guangdong Meizhou 514071，China）

Objective：To develop a method of quantitative analysis of multi-components by single marker （QAMS）for determination of magnolol and honokiol in magnoliae officmalis cortex.Methods：Based on the method in Chinese Pharmacopoeia（2010 edition），the relative correction factor of honokiol was determined using magnolol as an internal reference substance，the method was evaluated for reproducibility，and the difference between calculated and measured values was compared.Results：The quantitative results of five batches of magnoliae officmalis cortex by QAMS was basically consistent with that by external standard method.Conclusion：The QAMS method was reliable and accurate，which might be used for the quality control of magnoliae officmalis cortex.

Quantitative Analysis of Multi-components by Single Marker（QAMS）；Magnoliae Officmalis Cortex；Magnolol；Honokiol

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.01.005

邬伟魁，男，硕士，主管中药师。主要从事药品质量研究工作。E-mail：weikuiwu@qq.com

2015-08-12）