抗疏健骨颗粒急性毒性实验研究

史传道，张荣强，张志刚，樊晓晨（.陕西中医药大学，陕西 咸阳 7046；.陕西省西安市红十字会医院，陕西 西安）

抗疏健骨颗粒急性毒性实验研究

史传道1，张荣强1，张志刚1，樊晓晨2
（1.陕西中医药大学，陕西 咸阳 712046；2.陕西省西安市红十字会医院，陕西 西安）

［摘 要］目的：通过对抗疏健骨颗粒的小鼠灌胃急性毒性实验研究，初步评价其安全性。方法：将抗疏健骨颗粒以最大浓度给SPF级昆明种小鼠灌胃给药后，小鼠未出现死亡，未测出LD50，测其最大给药量。结果：抗疏健骨颗粒最大给药量为96g/kg，无动物死亡，其全身状况、饮食、摄水和体质量增长均正常。结论：抗疏健骨颗粒具有较好的安全性。

［关键词］抗疏健骨颗粒；急性毒性实验；昆明种小鼠

抗疏健骨颗粒由淫羊藿、丹参、杜仲、怀牛膝、白术、骨碎补等中药组成，具有补肾、健脾，活血的功效，临床用于防治骨质疏松症。为了保证临床用药的安全性， 以及为进一步的作用机制研究提供客观依据，我们对此方进行急性毒性研究， 现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物。SPF级昆明种小鼠60只，雌雄各半，体质量18～22g， 由西安交通大学医学院实验动物中心提供［动物合格证号SCXK（陕）2012-003］。

实验药物。抗疏健骨颗粒：由淫羊藿、丹参、杜仲、怀牛膝、白术、骨碎补等中药制成的颗粒剂（陕西省中药基础与新药研究重点实验室提供），规格为每袋10g，相当于生药量13.5g。临床拟用量为每日3次，每次2袋。实验给药前用饮用水配置成相应浓度的混悬液备用。

实验条件。小鼠饲养于陕西省中药基础与新药研究重点实验室SPF级小鼠实验室，温度为22～24℃，湿度为40%～60%。自由饮水和每天饲喂灭菌的标准颗粒饲料［1-2］。

1.2 实验方法

预实验。取适应饲养6日后的昆明小鼠20只，雌雄各10只，禁食不禁水12h，依性别体质量分4组，每组5只。对照组以蒸馏水40mL/kg灌胃1次；给药组以最高浓度80%，最大给药体积40mL/kg体质量灌服抗疏健骨颗粒混悬1次。随后观察小鼠的外观、行为、活动、精神活动、食欲、大小便及其颜色体质量变化以及死亡情况；死亡动物及时尸检，发现病变器官作病理组织学检查；连续观察14d，给药后动物无异常发生，也不引起小鼠死亡，无法测出LD50，因此进行最大给药量试验。

最大给药量测定实验。取适应饲养3日的昆明小鼠40只，雌雄各半，禁食不禁水12h，依性别体质量分4组，每组10只。对照组以蒸馏水40mL/kg灌胃3次，给药组以最高浓度80%，最大给药体积40mL/kg体质量灌服抗疏健骨颗粒混悬3次，每次间隔6h，灌胃后每天3次观察小鼠的外观，行为活动，精神状况，食欲，呼吸，大小便及其颜色，体质量变化以及死亡情况；死亡动物及时尸检，发现病变器官作病理组织学检查，连续观察14d。

2 实验结果

连续观察14d，动物未出现震颤、抽搐、共济失调、麻痹，肌张力反应正常，植物神经反应、呼吸、皮肤颜色正常，饮食无异常，小鼠活动自如，未见叫声异常、惊厥、运动失调、流涎、流泪、流鼻涕、呼吸困难、腹泻、便秘、肠胀气等现象发生。动物皮毛光泽，给药后14d内小鼠未见死亡［3］。见表1、表2。

表1 预试验小鼠体质量及中毒反应变化 （g，±s）

表1 预试验小鼠体质量及中毒反应变化 （g，±s）

注：与对照组雌性比较，at=1.398，P=0.235；与对照组雄性比较，bt=1.579，P=0.200；与对照组雌性比较，ct=0.496，P=0.657；与对照组雌性比较，dt=1.523，P=0.203。

雄　32.0　5　20.6±1.0b31.5±1.5d组别　性别　剂量雄　0.0　5　20.5±1.2　30.5±1.1给药组　雌　32.0　5　18.7±0.7a27.9±1.1c无明显中毒反应亦无动物死亡（g/kg）　n　　体质量变化　　中毒反应0d　7d对照组　雌　0.0　5　18.6±0.6　27.8±1.2无明显中毒反应亦无动物死亡

表2 正式试验小鼠体质量及中毒反应变化 （g，±s）

表2 正式试验小鼠体质量及中毒反应变化 （g，±s）

注：与对照组雌性比较，at=1.765，P=0.091；与对照组雄性比较，bt=1.056，P=0.421；与对照组雌性比较，ct=0.596，P=0.513；与对照组雌性比较，dt=1.563，P=0.198。

组别　性别　　剂量（g/kg）　n　　体质量变化　　中毒反应0d　14d雄　96.0　10 20.5±1.1b31.3±1.5d对照组　雌　0.0　10 19.2±0.7 27.4±1.6无明显中毒反应亦无动物死亡雄　0.0　10 20.0±1.0 31.2±1.1给药组　雌　96.0　10 19.0±1.1a27.5±1.2c无明显中毒反应亦无动物死亡

抗疏健骨颗粒的小鼠最大给药剂量为4 0 m L/ kg×80g/100mL×3=96g/kg，相当于70kg成人日用量60g的112倍。

3 讨 论

抗疏健骨颗粒的急性毒性实验结果显示，受试小鼠在观察14d内无1例死亡，行为活动正常，饮食正常，毛发光泽，尿粪性状无异常。小鼠最大给药量为96g/kg，相当于临床70kg体质量人的用药剂量112倍，说明该药无明显毒理反应，安全可靠。

［参考文献］

［1］ 中华人民共和国卫生部药政管理局.中药新药研究指南（药学药理学毒理学）［M］.北京：人民卫

［2］ 陈奇等.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：119.

［3］ 王北婴.中药新药研制与申报［M］.北京：中国中医药出版社，1995：251.

［中图分类号］R285.5

［文献标识码］B

［文章编号］1004-2814（2016）06-0521-02

［基金项目］陕西省科技统筹创新工程计划项目（2012KTCL03-22）；陕西省中医管理局中医药科研项目（2013-LC069）；陕西省教育厅科研项目（2011JK0674）生出版社，1994：203-204.

［收稿日期］2016-01-20

［Abstract］Objective：To preliminary evaluate the safety of Kangshu Jiangu Granule according to the acute toxicity experiment research through taking gavage methods to the mice. Method: After the SPF Kunming mice were given Kangshu Jiangu Granule of maximum concentration by gavage methods， there was no mice dead and LD50 was not detected. Then， the maximum tolerance dose was detected.Result：The maximum dosage of Kangshu Jiangu Granule was 96g/kg. There was no mice dead and all the mice’s systemic conditions， food and fluid intake and weight gain was normal. Conclusion：Kangshu Jiangu Granule has good safety.

［Key Words］Kangshu Jiangu Granule；Acute toxicity experiment；Kunming mouse