红景天总黄酮对小鼠急性肝损伤保护作用研究
2016-07-28中航工业三六三医院四川成都610041
王 刚(中航工业三六三医院,四川 成都 610041)
红景天总黄酮对小鼠急性肝损伤保护作用研究
王 刚
(中航工业三六三医院,四川 成都 610041)
[摘 要]目的:观察红景天总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:用四氯化碳制作小鼠肝损伤模型,分别灌胃给予小鼠不同剂量的红景天总黄酮,连续7d,末次给药1h后测定小鼠血清ALT、AST含量,以及肝脏、脾、胰腺指数,肝脏组织中SOD、MDA含量。结果:红景天总黄酮可明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT、AST 及肝组织匀浆中MDA 含量,提高SOD活性。结论:红景天总黄酮对小鼠急性肝损伤具有保护作用。
[关键词]红景天;总黄酮;小鼠;急性肝损伤
红景天(Rhodiola sachalimemsis A.Bor.)是景天科红景天属多年生草本植物,具有补气清肺、益智养心、收涩止血、散瘀消肿的功效,临床上用于刺激神经兴奋、治疗抑郁症、增加体能、清除疲劳、预防高原病等[1]。现代药理学研究发现,红景天提取物具有保护心血管、肝脏功能及抗疲劳、抗氧化、消炎、抗菌、抗病毒、抗抑郁等广泛的药理作用[2]。
目前,关于红景天对肝损伤的保护作用的报道多见于红景天苷类,而关于红景天总黄酮对急性肝损伤的研究鲜有报道。本实验采取四氯化碳制作小鼠急性肝损伤模型,以探讨红景天总黄酮护肝作用。
1 材料与方法
1.1 药物与试剂
红景天总黄酮提取物(由本院制剂室提取纯化而得,经定量检验证实总黄酮含量为25.7%),联苯双酯(Biphenyldimethylesterate,DDB,华北制药股份有限公司,国药准字H13023912),四氯化碳(成都市科龙化工试剂厂,批号20140609),甲醛(成都市科龙化工试剂厂,批号20120927),Evans Blue(Sigma公司,批号1001699862),λ-角叉菜胶(Sigma公司,批号17H1148),ALT、AST、SOD、MDA试剂盒(南京建成生物科技有限公司)。
1.2 动物
KM小鼠,SPF级,雄性,体质量18~22g,由成都达硕生物科技有限公司提供[合格证号scxk(川)2013-24]。动物饲养于标准环境:温度(23±1)℃,相对湿度(60±5)%,人工光照,12h明暗周期交替,标准饲料喂养。
1.3 仪器
Sorvall ST-16R离心机(美国Thermo公司),VARIOSKAN FLASH 2.4.3全波长多功能读数仪(美国Thermo公司),BS323S电子天平(Sartorius公司),101C-2电热鼓风干燥箱(上海实验仪器厂有限公司)。
1.4 实验方法
取健康雄性KM小鼠60只,按体质量随机分为5组,每组12只,分别为模型组、空白对照组、联苯双酯组(150mg/kg)、红景天总黄酮高、中、低剂量组(200mg/kg、100 mg/kg、50mg/kg)。连续灌胃给药7d,每天1次,模型组给予等量蒸馏水。各组小鼠末次给药1h后,除空白对照组外,将其余各组小鼠腹腔注射0.1% CCL4花生油(0.1mL/10g),禁食不禁水24h后取血及脏器进行测定。摘小鼠眼球取血,将凝固的血液于3000r/ min离心10min,4℃离心分离血清,取血清于-20℃保存,用于ALT、AST的测定。取血后快速取出肝脏、脾脏和胸腺,冰生理盐水漂洗拭净后称重并记录,计算肝脏、脾脏和胸腺指数。选肝脏右叶肝组织,加适量冰生理盐水,制备10%浓度匀浆后于-80℃冰箱保存,用于SOD、MDA含量测定。
2 结 果
红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠脏器指数的影响见表1。
表1 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠脏器指数的影响 (±s)
表1 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠脏器指数的影响 (±s)
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与空白组比较,△P<0.01。
(mg/kg) 胸腺指数(mg/kg) 脾脏指数(mg/kg) 肝脏指数(%)空白组 12 — 2.15±0.26 4.34±0.35 4.72±0.45模型组 12 — 3.57±0.62△5.47±0.51△5.71±0.81△联苯双酯组 12 150 2.53±0.37**4.48±0.32**4.93±0.63**红景天总黄酮高剂量组 12 200 2.75±0.53**4.57±0.49**5.17±0.68**红景天总黄酮中剂量组 12 100 2.73±0.42*4.82±0.53*5.33±0.46*红景天总黄酮低剂量组 12 50 3.05±0.71 4.96±0.45 5.56±0.55组别 n 剂量
红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠血清ALT、AST含量的影响见表2。
表2 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠ALT、AST含量的影响 (±s)
表2 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠ALT、AST含量的影响 (±s)
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与正常组比较,△P<0.01。
组别 n剂量(mg/kg) AST(mg/kg) ALT(mg/kg)空白组 12 — 24.05±3.46 65.34±15.47模型组 12 — 66.87±11.62△173.27±17.62△联苯双酯组 12 150 33.53±12.38**83.49±12.57**红景天总黄酮高剂量组 12 200 38.15±11.33**98.63±22.13**红景天总黄酮中剂量组 12 100 49.73±10.36*109.92±12.46*红景天总黄酮低剂量组 12 50 54.85±11.24 148.76±17.45
红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠肝组织SOD、MDA含量的影响见表3。
表3 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠肝组织SOD、MDA的影响 (±s)
表3 红景天总黄酮对急性肝损伤小鼠肝组织SOD、MDA的影响 (±s)
MDA (nmol/mg)空白组 12 — 94.05±13.46 5.42±1.94模型组 12 — 66.87±11.62△ 7.68±1.99△联苯双酯组 12 150 83.53±12.38** 5.64±1.01*红景天总黄酮高剂量组 12 200 88.15±22.33** 5.97±1.28*红景天总黄酮中剂量组 12 100 79.73±12.36* 5.77±1.83*红景天总黄酮低剂量组 12 50 74.85±17.24 6.62±1.35组别 n 剂量(mg/kg)SOD (mg/kg)
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与正常组比较,△P<0.01。
3 讨 论
《本草纲目》中红景天被注为“草本上品”,具有明显的抗缺氧、抗寒冷、抗辐射、抗肿瘤、抗肝纤维化、抗疲劳等多方面药理作用。国内外临床资料及相关文献统计己表明红景天对肝纤维化的干预有良好的效果[3-4]。
本研究通过四氯化碳致小鼠急性肝损伤实验,小鼠血清生化指标检测结果表明。四氯化碳使小鼠血清中AST、ALT显著升高,肝组织中MDA含量显著升高,提示肝损伤很大可能是由于脂质过氧化作用。而红景天总黄酮高、中剂量能使小鼠血清AST、 ALT含量显著降低,说明红景天总黄酮具有一定的保肝作用。红景天总黄酮高、中剂量能使小鼠血清MDA含量显著降低,SOD活力显著升高,红景天总黄酮对四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤的保护途径之一为增强机体抗自由基的能力。
综上所述,红景天总黄酮对小鼠急性化学性肝损伤具有一定的预防保护作用,该作用可能与其抗氧化损伤作用有关。
[参考文献]
[1] KHANUM F,BAWA AS,SINGH B.Rhodiola rosea:a versatile adaptogen[J].Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety,2005,4 (3):55-62.
[2] KELLY GS,HODIOLA ROSEA:A possible plant adaptogen[J].Alternative Medicine Review,2001,6(3):293-302.
[3] PANOSSIAN A,WIKMAN G,SARRIS J ROSENROOT (RHODIOLA ROSEA) :Traditional usechemical composition,pharmacology and clinical efficacy[J].Phytomedicine,2010,17 (7):481-493.
[4] PENG JP,NARUI T,SUZUKI H,et al.Antiblood coagulation and cytotoxic effects of compounds from Chinese plants used for thrombosis-like diseases [J].Natural Medicines,1996,50(5):358-362.
[中图分类号]R285.5
[文献标识码]B
[文章编号]1004-2814(2016)06-0518-02
[收稿日期]2016-01-14
[Abstract]Objective:To observe the protective effect of total flavonoids of Rhodiola on acute liver injury of mice. Method:The mice models of acute liver injury were induced by CCl4.The mice were performed by intragastric administration with different dose of total flavonoids of Rhodiola and the serum levels of ALT and AST, the index of the liver, the spleen and the pancreas, the content of MDA and SOD in liver of the mice were measured at the time point of 1 hour after the last administration of drugs after 7 consecutive days. Result:The total flavonoids of Rhodiola significantly reduced the level of serum ALT and AST and the content of MDA and enhanced the activity of SOD in liver significantly .Conclusion:The total flavonoids of Rhodiola has protective effect on acute hepatic injury of mice.
[Key Words]Rhodiola;Total flavonoids;Mice;Acute liver injury