高效液相色谱法测定马来酸氨氯地平片的含量

李祖红，李传响

(1.海南卫康制药(潜山)有限公司,安徽 安庆　246300；2.安庆市食品药品检验中心,安徽 安庆　246001)



高效液相色谱法测定马来酸氨氯地平片的含量

李祖红1，李传响2

(1.海南卫康制药(潜山)有限公司,安徽 安庆246300；2.安庆市食品药品检验中心,安徽 安庆246001)

摘要：目的建立高效液相色谱法测定马来酸氨氯地平片的含量。方法采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相；检测波长365 nm；流速1.0 mL·min-1。结果马来酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1的线性范围内呈良好的线性关系，r=0.999 9(n=6)，平均回收率为99.4%，RSD=0.29%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、专属性好，适于马来酸氨氯地平片含量控制。

关键词：氨氯地平/分析；色谱法,高压液相；回收率；药物稳定性

氨氯地平(amlodipine)是三代钙拮抗剂，马来酸氨氯地平是氨氯地平与马来酸所成的盐，有较强的外周血管和冠状动脉扩张作用[1-2]。马来酸氨氯地平在国内已上市的剂型有片剂和胶囊剂，由于本品临床疗效高，毒副作用小，已成为临床用于降压的一线药物，应用非常广泛，但是其含量测定的检测标准还未纳入中国药典。本文采用以甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相；检测波长365 nm[3-4]的检测条件对马来酸氨氯地平片含量的测定方法进行研究。

1仪器与试药

1.1仪器岛津HPLC色谱仪(LC-20AT泵，SPD-M20A检测器，SIL-20A进样器，CTO-20AC柱温箱)，Lcsolution色谱工作站；梅特勒AB265-S电子分析天平；梅特勒AG8603精密pH计。

1.2试药样品(市场抽验，批号：140823；150402；150705)；对照品(中国药品生物制品检定所提供，纯度为99.8%，批号为20081208)。甲醇(色谱纯，国药集团)；水为重蒸馏水，乙酸铵(分析纯)。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-0.05 mol·mL-1乙酸铵(70∶30；v/v)；检测波长365 nm；流速1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；进样量：10 μL；理论塔板数按氨氯地平色谱峰计算应不低于3 000，见图1。

2.2供试品及对照品溶液制备

2.2.1供试品溶液制备取本品20片，研细，精密称取细粉适量(约相当于氨氯地平8 mg)，置于100 mL量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)适量，超声5 min溶解，并稀释至刻度，振摇，滤过，取续滤液作为供试品溶液

2.2.2对照品溶液制备精密称取马来酸氨氯地平对照品15 mg(实际称量14.5 mg，相当于氨氯地平11.2 mg)，置于50 mL容量瓶中，加盐酸溶液(9→1 000)适量超声振荡5 min溶解，并稀释至刻度，制成每1 mL中约含224.0 μg的溶液作为对照品溶液。

2.3线性关系考察取“2.2.2”项下对照品溶液(224.0 mg·L-1)适量，分别用水稀释配成22.4、44.8、67.2、112.0、224.0、336.0 mg·L-1。按“2.1”色谱条件项下，取20 μL进样分析，记录峰面积，并以峰面积(A)与样品浓度(C)作线性回归，回归方程为：A=20 870.9C+731.2，相关系数r=0.999 9，马来酸氨氯地平在线性范围22.4～336.0 mg·L-1内呈良好的线性关系。

对照品色谱图

样品色谱图

注：1.马来酸；2.氨氯地平。

图1马来酸氨氯地平高效液相色谱图

2.4精密度试验按“2.3”线性关系考察项下方法，用水稀释成高、中、低对照品溶液(22.4、67.2、224.0 mg·L-1)，分别连续进样3次，记录色谱图和峰面积，计算RSD分别为：0.20%、0.17%、0.12%(n=3)，结果具有良好精密度。

2.5稳定性研究取“2.2.1”项下供试品溶液80 mg·L-1，室温下放置，按“2.1”色谱条件项下操作，分别于0、2、4、8、12 h进样10 μL，记录色谱图，结果表明：供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.6回收率试验精密称取马来酸氨氯地平对照品溶液15、20、25 mg，加入已知准确浓度的样品(批号150705)溶液中，照“2.2.1”项下方法溶解，并加水稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液5 mL置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，取20 μL进样，记录色谱图；另取马来酸氨氯地平对照品溶液，按“2.1”色谱条件项下操作，计算回收率，得回收率平均值为99.4%，RSD为0.29%，结果见表1。

2.7样品测定取3种不同批次的样品，按“2.2.1”供试品溶液制备项下操作，照“2.1”色谱条件，进样10 μL分析，记录色谱图，计算三批样品的含量，结果见表2。

表1　样品回收率测定结果

表2　样品含量测定结果

3讨论

参考有关文献[5-12]，对马来酸氨氯地平的吸收波长、溶剂、及流动相进行反复试验比较，最终选定以(9→1 000)盐酸溶液为溶剂溶解，有效改善了氨氯地平溶解性的问题，在365 nm波长处测定，使测定结果更加准确，甲醇-0.05 mol·L-1乙酸铵溶液(70∶30)为流动相的试验条件，最适合本品溶解，准确定量，为制订科学的检验标准提供参考依据。

本文建立马来酸氨氯地平片含量的测定方法，并对测定方法给以验证，同时将三批样品测定结果与马来酸氨氯地平的现行国家药品标准[4]进行比较，不存在显著差异，反而更好的地改善了其溶解度，使测定结果更准确。实验结果表明，马来酸氨氯地平在22.4～336.0 mg·L-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系；杂质不干扰含量测定；因此，所建立含量测定的方法简便快速、准确、专属性好，能够有效的控制马来酸氨氯地平片的质量。

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HPLC determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets

LI Zu-hong1，LI Chuan-xiang2

(1.HainanWeikangPharmaceutical(Qianshan)Co.,Ltd,Anqing,Anhui246300，China；2.AnqingInstituteforFoodandDrugControl，Anqing,Anhui246001,China)

Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of the contents of Amlodipine maleate in tablets.MethodsThe separation was performed on a Kromasil C18column (4.6 mm×250 mm，5 μm).The mobile phase was composed of methanol-0.05 mol·L-1ammonium acetate (70∶30) at the flow rate of 1.0 mL·min-1.The detection was carried out with a UV detector at 365 nm.ResultsThe calibration curves were linear between 22.4～336.0 mg·L-1(r=0.999 9,n=6),and the average recovery was 99.4%,RSD=0.29%(n=9).ConclusionsThe method is simple,rapid,accurate and suitable for the determination of amlodipine maleate tablets.

Key words:Amlodipine/analysis;Chromatography,high pressure liquid;Retrieving rate;Drug stability

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.06.013

(收稿日期：2016-01-18，修回日期：2016-04-08)