如何进行转基因产品的检测*

2016-06-30李永光李文滨

大豆科技 2016年2期

关键词：外源转基因大豆

李永光，李文滨

（东北农业大学大豆研究所，哈尔滨　15500003300）

如何进行转基因产品的检测*

李永光，李文滨****

（东北农业大学大豆研究所，哈尔滨15500003300）

第一作者：李永光，博士，助理研究员，主要研究方向大豆生物技术

**通讯作者：李文滨，博士，教授，主要研究方向大豆遗传育种，E-mail: wenbinli@neau.edu.cn

近30年来，转基因食品的生产发展十分迅猛，各国都纷纷投入大量的人力、物力和财力进行研究，就连联合国前秘书长安南也曾在联合国大会上赞扬转基因食品是“继绿色革命后的一次蓝色革命”［1］。因此，转基因食品的安全问题也逐渐引起各国的关注，许多国家加强了对转基因食品的安全性评估和风险性分析，并制定了相应的管理法规。转基因产品的检测已经纳入了国内外检验检疫部门的检测项目。

转基因作物的检测主要是从染色体水平、转录组水平、蛋白组水平以及代谢组水平对外源基因及其表达产物进行检测，主要是针对外源转入基因的核苷酸序列以及蛋白表达产物进行检测。转基因产品的检测方法要求快速、准确、灵敏，适应样品量大、目标基因种类繁多等特点。

检测外源基因核苷酸序列的方法有常规性PCR，实时荧光定量PCR，基因芯片和微阵列，高通量测序，生物传感器技术等［2］。一般来说，对样品中的转基因成分进行检测的流程如下：

（1）是否含有转基因成分：检测样品中是否含有转基因作物的通用元件、标记基因等；

（2）具体含有什么转基因的作物品系：通过品系特异性的鉴定方法来确认基因成分属于某个特定的转基因品系；

（3）含有多少转基因成分：利用定量PCR的方法确定样品中转基因成分的具体含量［3］。因DNA较RNA和蛋白质具有更好的稳定性，已经成为转基因检测中最主要的靶标分析对象。目前，转基因生物检测主要是通过聚合链式反应（PCR）进行。PCR检测方法因具有快速、灵敏、费用低、检测仅需微量的DNA，并且可以同时检测多个样品的特点，正成为这一领域日趋成熟的方法之一。

检测外源蛋白表达产物的方法主要采用免疫学检测法，即Western杂交、酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫层析试纸法［4］。ELISA具备了酶反应的高灵敏度和抗原抗体反应的特异性，具有简便、快速和费用低等特点，但易出现本底过高的问题，且只能检测目的蛋白抗原性没有明显变化的粗加工产品。侧向流动免疫测定试纸条是一种快速简便的定性检测方法，将试纸条放在待测样品抽提物中，5～10 min就可得出结果，不需要特殊仪器和熟练技能，适合种业公司和农户使用。

随着转基因植物的种植面积逐年增加，转基因食品的安全问题越来越受到大家的重视。经典的定性定量PCR的检测方法依然是公认的通用方法，而新技术的涌现更给大家带来了希望：核酸等温扩增技术不需要温度的循环和精密的仪器；毛细管电泳检测方法逐步实现自动化；而芯片检测技术更使高通量检测成为可能。

［参考文献］

［1］蔡八弟.中国转基因食品商业化，何去何从?［J］.法制与经济, 2007（7）: 7-8.

［2］Querci M, Van B M, Zel J, et al. New approaches in GMO detec⁃tion［J］. Anal Bioanal Chem, 2010, 396（6）: 1991-2002.

［3］张建中,刘铁男,张海波,等.转基因生物核酸检测新技术研究进展［J］.上海农业学报, 2011, 27（1）: 117-120.

［4］Stave J W. Protein immunoassay methods for detection of biotech crops: applications, limitations, and practical considerations［J］. J AOAC Int, 2002, 85（3）: 780-786.