12～14岁青少年血清碱性磷酸酶生物参考区间验证

2016-06-27陈丽敏郭明卫

国际检验医学杂志 2016年11期

关键词：青少年

陈丽敏,郭明卫

(1.河北省邢台县中心医院检验科　054000；2.河北省沙河市人民医院检验科　054100)

·经验交流·

12～14岁青少年血清碱性磷酸酶生物参考区间验证

陈丽敏1,郭明卫2△

(1.河北省邢台县中心医院检验科054000；2.河北省沙河市人民医院检验科054100)

摘要:目的探讨适合于12～14岁青少年血清碱性磷酸酶生物参考区间。方法参照美国临床实验室标准化协会标准与指南中的C28-A2推荐方法，收集男、女12～14岁体检人员各40份标本，在经过性能评价验证可靠的检测系统上检测。结果40例12～14岁男性青少年碱性磷酸酶(ALP)水平为91.0～484.0 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例数据落在参考区间外；40例12～14岁女性青少年ALP水平为75.0～364.0 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例数据落在参考区间外。试验数据有3例以上的检测结果落在现用的生物参考区间外。结论该生物参考区间不适合用于12～14岁青少年，应重新建立该年龄段的ALP生物参考区间，12～14岁男、女性青少年ALP参考区间分别为237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

关键词:青少年；碱性磷酸酶；生物参考区间

生物参考区间是解释分析检验结果的依据和程度[1]。12～14岁青少年正是生长发育旺盛期，碱性磷酸酶(ALP)是否能沿用试剂说明书上的生物参考区间有待验证。根据ISO15189：2003《医学实验室-质量和能力的专用要求》，实验室必须建立自己的生物参考区间并定期评审，以确保依据生物参考区间的有效性。本研究结合ISO15189条款要求和已有的推荐方法，验证并探讨该人群的生物参考区间，以保证生物参考区间的可靠选用[2]。

1资料与方法

1.1一般资料男、女青少年各40名，年龄12～14岁，男性平均(13.5±3.2)岁，女性平均(13.1±2.6)岁。参照卫生和计划生育委员会网站2012年12月25日公布的《临床常用生化检验项目参考区间第1部分》(WS/T 404.1-2012)行业标准，排除消化系统疾病、急慢性感染、肾脏疾病、代谢和营养疾病、风湿性疾病、甲状腺疾病和血液系统疾病、体质量指数(BMI)≥28 kg/m2等个体。

1.2标本采集空腹8～14 h后于清晨抽取体检人群静脉血3 mL于促凝真空采血管中(湖南安信医用高分子材料有限公司生产)，颠倒混匀3次，室温凝固后3 000 r/min离心10 min，选择无溶血、黄疸和乳糜样血清样本进行检测，2 h内完成测试。

1.3仪器与试剂上海科华生物股份有限公司生产的KHB1200生化分析仪及其配套试剂盒，ALP测定方法为AMP缓冲液法，操作过程严格按照实验室SOP文件的有关规定进行，检验过程中两种水平质控均在控。

1.4ALP试剂盒参考区间试剂盒说明书写明37 ℃时男性为53～140 U/L；女性为42～128 U/L。

1.5方法

1.5.1ALP生物参考区间的验证参照美国CLSI标准与指南中的C28-A2推荐方法，收集男、女12～14岁体检人员各40份标本，在经过性能评价验证可靠的检测系统上检测，结果38名(95%)均落在现用的参考区间内，判定现用生物参考区间有效。若试验数据有3名或3名以上的检测结果落在参考现用的生物参考区间外，先检查检测系统性能、检测程序是否正确，然后再考虑该项目是否符合人群生物特性。

1.5.2ALP生物参考区间的建立另收集120名12～14岁的健康参考个体进行ALP测定，检测结果先做离群点判断。数据中的疑似离群点判断标准：将疑似离群点和其相邻点的差值(D)和全距(R)相除，D/R应小于或等于1/3,>1/3考虑为离群点。若有2个或以上疑似离群点，将最小的疑似离群点按判断标准处理，若大于1/3则所有点都删去，若小于或等于1/3则保留所有数据，若有离群点被删除后应立即将其他数据补上。

2结果

40名12～14岁男性青少年ALP水平为91～484 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例数据落在参考区间外；40例12～14岁女性青少年ALP水平为75～364 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例数据落在参考区间外。试验数据有3名以上的检测结果落在现用的生物参考区间外，提示该生物参考区间不适合用于12～14岁青少年，需要重新建立该年龄段的ALP生物参考区间。另外收集60例12～14岁男性青少年ALP水平为91～534 U/L，平均(265.3±86.2)U/L；60例12～14岁女性青少年ALP水平为75～486 U/L，平均(193.0±100.8)U/L。离群点检查结果：男性离群点有2个，女性离群点有1个。分别绘制12～14岁男、女性青少年的ALP分布图，见图1、2，由图1、2可见，12～14岁男、女性青少年ALP均呈正态分布，12～14岁男、女性青少年ALP参考区间分别为237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

图1　　12～14岁男性青少年ALP分布图

图2　　12～14岁女性青少年ALP分布图

3讨论

ALP是催化有机单磷酸酯水解的非特异性酶类，几乎存在于人体各组织中，以骨骼和肾脏浓度最高。健康人血清中ALP主要来自骨骼，由成骨细胞产生，常用于肝胆疾病特别是胆道阻塞时的诊断和鉴别诊断。

本研究发现，上海科华生物股份有限公司生产的ALP试剂盒标注的生物参考区间不适合用于12～14岁的青少年，重新确立该组人群的生物参考区间男性为237.7～292.8 U/L，女性为160.7～225.2 U/L，低于程歆诗等[3]报道的该年龄段正常参考值，可能与该人群所处地域、生活方式、BMI、试剂中缓冲液的组成有关。

本研究结果显示，调查人群ALP参考区间高于上海科华生物股份有限公司ALP试剂说明书所述参考区间。目前，不同文献对健康人群ALP的参考范围报道不一。胡琴[4]报道ALP的参考范围为男11～50 U/L、女7～32 U/L，张秀明等[5]报道ALP的参考范围为：成人为40～132 U/L，这可能与所用检测试剂方法和所调查的人群年龄和性别等有关。韩志钧等[6]用Thomsa报告的应用国际临床化学联合会(IFCC)方法时的男、女儿童各年龄段的参考范围，就上述儿童ALP的参考范围，有的只按性别分类，没有分开年龄段，有的只有成人而没有儿童ALP的参考范围，有的只是引用了国外报道的儿童ALP正常参考范围。所以各个实验室应用自己的试剂和仪器进行各年龄段的ALP正常参考范围进行验证和评价十分必要。

众所周知，生物参考区间是判断健康与否的标准，实验室必须保证给临床提供一个正确的生物参考区间，否则会导致误诊。但限于一般实验室现行条件，自行制订生物参考区间存在客观难度，因而对实验室的生物参考区间进行验证是必要的，也是可行的[7]。当生物参考区间出现偏离时，应当重新确立，确保生物参考区间的准确性。

参考文献

[1]陈桂山．临床化检验项目参考区间适用性验证[J]．中华检验医学杂志，2008，31(2)：170．

[2]陈桂山，杨有业，梁锦胜，等．临床医学实验室生物参考区间的建立[J]．检验医学，2008，23(4)：421-424．

[3]程歆诗,程倩,邱玲,等.内蒙古自治区健康青少年血清总钙、磷、碱性磷酸酶的参考范围[J].现代检验医学杂志，2014,29(1):12-16.

[4]胡琴．医学检验辞典[M]．北京：化学工业出版社，2008：122．

[5]张秀明,温冬梅,邱袁勇,等.临床生物化学检验质量管理与标准操作规程[M].北京：人民军医出版社，2010:210-211.

[6]韩志钧,黄志锋,卢业成,等.临床化学常用项目自动化分析法[M].3版.沈阳：辽宁科学技术出版社,2005:732.

[7]郭明卫，陈丽敏．临产孕妇血凝四项生物参考区间验证[J]．实验与检验医学，2014，32(1)：98．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.059

文献标识码：B

文章编号：1673-4130(2016)11-1577-02