猪（O）型口蹄疫政府统购苗和市场高效商品苗免疫效果比较分析

高权利，刘　阳，张智鹏，李艳明，兰天驰，张　靖，熊伟曼，赵　力（陕西省汉中市动物疾病预防控制中心，陕西汉中723000）



猪（O）型口蹄疫政府统购苗和市场高效商品苗免疫效果比较分析

高权利，刘阳，张智鹏，李艳明，兰天驰，张靖，熊伟曼，赵力
（陕西省汉中市动物疾病预防控制中心，陕西汉中723000）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病，易感动物达70多种，主要侵害偶蹄类动物，少见于人。猪口蹄疫是国家强制免疫的重大动物疫病之一，疫苗由国家统一免费供应。但在实际应用中，一些疫苗经销商为了推销所经销的疫苗，在没有开展实验室检验对比的情况下，冒然下结论，认为政府免费发放的疫苗，效果差，并将这些观点在养殖场中散播，一些养殖户信以为真，不用免费发放的政府苗，转而寻求和购买市场销售的疫苗，导致政府统购苗的大量浪费，增加了养殖成本，降低了养殖效益。为此，本试验选择（O）型口蹄疫政府统购苗和当地规模化猪场使用较多的自购商品苗进行对比试验，分析两者的免疫效果，从而客观公正的评价（O）型口蹄疫政府统购疫苗的免疫效果，为广大养殖户选择口蹄疫疫苗提供科学依据。

1　材料与方法

1.1试验时间与地点本试验于2014年4-7月在陕西省汉中市勉县良种场和勉县黑河猪场同时进行。

1.2试验材料

1.2.1试验疫苗猪口蹄疫O型灭活苗（O/MYA98/ XJ/2010株+O/GX/09-7株），为陕西省口蹄疫强制免疫政府统购苗，生产批号：1402004，规格：100 mL/瓶；猪口蹄疫O型灭活苗（O/MYA98/BY/2010株），由中农威特生物科技股份有限公司生产，为自购市场高效商品苗，生产批号：H140209J，规格：100 mL/瓶。

1.2.2试剂口蹄疫O型间接血凝抗体检测试剂盒，购自中国农业科学院兰州兽医研究所，批号：2014052304。

1.3仪器单道、8道微量移液器，均购自德国Brand公司；高速离心机、微量振荡器、96孔U型聚乙烯反应板。

1.4试验设计

1.4.1预试验为降低母源抗体过高对免疫抗体的影响，以及母源抗体过低导致猪群处于易感染状态，在试验前，项目组对勉县良种场和黑河猪场两个场进行了母源抗体检测。选择母源抗体处于24～25的仔猪进行试验。分别对30、40、50日龄和60日龄的仔猪进行了检测，40日龄的平均抗体效价为24.0，抗体阳性率为60%，符合试验条件。

1.4.2试验动物与分组在勉县良种场和勉县黑河猪场各选择4窝体质健康、体重接近的仔猪，随机分成4组，每组10头，具体分组见表1。

1.4.3免疫注射仔猪40日龄进行首免，首免30 d后进行二免，免疫剂量参照表1。

1.4.4采样次数与时间试验设计各场采血4次，首次采血在首免当天；第2次采血在首免后30 d，第3次和第4次采血分别在二免后30 d和60 d。

1.4.5结果判定正向间接血凝试验（IHA）按试剂盒说明书进行操作。检测结果按农业部[农医发（2012）2号]文件要求判定，判定标准：其有效抗体效价≥1∶32（第5孔）为免疫合格。

1.4.6饲养管理试验猪场试验用猪各组单独饲养，与其他同龄猪群同舍饲养，按照日常饲养管理操作规程饲养。

2　结果与分析

试验结果统计两场各组口蹄疫免疫抗体检测合格率结果统计见表2。

3　结果分析

3.1勉县良种场免疫抗体合格率分析见图1。

3.1.1同种疫苗不同剂量对比由图1可以看出，无论是政府苗还是自购苗，加大免疫剂量的试验二组免疫抗体合格率明显优于试验一组，尤其是政府苗一组和二组差异较大。加大免疫剂量的政府苗二组首免后3次检测，免疫抗体合格率均高于政府苗一组，且在二免后30 d合格率超过70%（农业部免疫抗体合格标准），并且可以长时间的保持较高抗体合格率，免疫效果明显优于一组，即政府苗剂量加大优势明显；自购苗首免后30 d，两组抗体合格率一致，都为50%，二免后30 d和60 d，两组免疫抗体合格率都在80%以上，且两组数据差距不明显，即自购疫苗剂量加大优势不明显。

3.1.2同种疫苗免疫次数对比由图1可以看出，无论是政府苗还是自购苗，2次免疫后，免疫抗体合格率明显高于1次免疫，且能保持在较高水平。4个组在首免后30 d，免疫抗体合格率均未达到70%，均不能对试验猪群形成有效的保护。二免后30 d除政府苗一组外，其余各组免疫抗体合格率均超过了70%，二免后60 d各组免疫抗体合格率都超过了70%，即无论是政府苗还是自购苗都需要2次加强免疫，才能保证猪只长时间保持较高的抗体合格率。

3.1.3不同种疫苗对比由图1可以看出，首免后3次检测，政府苗一组免疫抗体合格率明显低于自购苗一组。说明在标准剂量免疫情况下，自购苗的免疫效果要好于政府苗；首免后30天政府苗二组免疫抗体合格率为60%，自购苗二组为50%，都没有达到标准，两者相差不大。二免后30 d和60 d时，免疫抗体合格率都在90%以上。说明在加大剂量免疫情况下，二者免疫效果没有明显差异。

3.2勉县黑河猪场免疫抗体合格率分析见图2。

图1　良种场各试验组口蹄疫免疫抗体合格率比较

图2　黑河猪场各试验组口蹄疫免疫抗体合格率比较

3.2.1同种疫苗不同剂量对比由图2可以看出，无论是政府苗还是自购苗，加大免疫剂量的试验二组免疫抗体合格率明显优于试验一组，这与勉县良种场的试验结论相一致。加大免疫剂量的政府苗二组首免后3次检测，免疫抗体合格率除二免后60天外均高于政府苗一组，且在二免后30 d合格率均超过70%，并且可以长时间的保持较高抗体合格率，免疫效果明显优于政府苗一组，即政府苗剂量加大优势明显；自购苗首免后30 d，加大剂量的二组抗体合格率迅速上升到100%，并且保持高位，直到二免后60 d才下降为80%。而标准计量的自购苗一组首免后30 d，免疫抗体合格率迅速下降到50%，下降幅度达30%，这可能是因为一组试验猪群母源抗体过高，对疫苗免疫应答产生了负面影响，二免后30 d，抗体合格率又迅速上升到100%，二免后60 d下降到70%。排除母源抗体的干扰，自购苗两组在二免后30、60 d，都能保持较高的免疫抗体水平，猪群免疫抗体合格率均能达到农业部标准，说明自购疫苗加大剂量免疫优势不明显。

3.2.2同种疫苗免疫次数对比由图2可以看出，无论是政府苗还是自购苗，二次免疫后，抗体合格率明显高于一次免疫，且能保持在较高水平。4个组在首免后30 d，除政府苗二组和自购苗二组免疫抗体合格率达到70%外，其余两组均未达到70%。二免后30 d、60 d各组免疫抗体合格率均超过了70%，即无论是政府苗还是自购苗都需要二次加强免疫，才能保证猪只长时间保持较高的抗体水平。

3.2.3不同种疫苗对比由图2可以看出，政府苗一组和自购苗一组对比：首免后30 d时，两组都没达到70%标准。二免后，政府苗抗体上升较慢，到60 d时，达到高峰，而自购苗二免后抗体上升较快，二免后30 d就达到高峰，到60 d时，已下降至70%。政府苗二组和自购苗二组对比：首免后30 d，两组都达到农业部标准，自购苗抗体升高很快，达到100%，二免后30 d和60 d，两组抗体合格率均超过了70%，且相差不大。

3.3两场试验结果对比通过对两场试验结果的分析，两场试验结果基本一致，即无论是政府苗还是自购苗，都需要进行二次免疫，才能有效发挥疫苗免疫的作用；政府苗加大剂量免疫效果明显高于标准剂量，自购苗加大剂量与标准剂量免疫效果差异不大；政府苗加大剂量进行二次免疫，其免疫效果和自购苗二次免疫效果差异不大，都能对猪群形成有效的保护。

4　讨论

4.1试验结果表明，口蹄疫政府统购苗和市场高效苗都需要进行二次免疫，二次免疫后，猪群可以保持较高的抗体水平，这与魏孔福等[1]的试验结果基本一致。首次免疫后，由于机体免疫应答潜伏期较长，再加上母源抗体的影响，疫苗不能有效刺激机体迅速产生较高的抗体。首免后30 d二免，机体再次免疫应答潜伏期显著缩短，同时记忆B细胞快速大量增殖，产生大量的抗体。

4.2政府苗加大剂量免疫效果明显优于标准剂量，标准剂量免疫不能迅速对猪群形成有效保护，需要加大剂量免疫；自购苗加大剂量免疫效果和标准剂量差异不大，不需要加大剂量免疫。分析原因，可能是由于两种疫苗中病毒含量不同，自购高效商品苗的病毒含量高于政府统购苗，标准剂量免疫就能有效刺激机体产生免疫应答。

4.3首免后30 d，有的试验组免疫抗体合格率不升反将，分析原因主要是受该组母源抗体水平的影响。据报道，母源抗体可以从细胞免疫和体液免疫2个方面对疫苗免疫产生干扰[2]，其作用机理主要是加强抗原物质的清除，对弱毒疫苗起中和作用、母源抗体对特异性抗原位点的“封闭”而阻止抗原位点与机体免疫相关细胞上的抗原受体结合等，从而导致免疫系统不能对抗原物质产生反应。尽管本试验在试验开展前，做了预试验，目的是确定首免日龄，尽量排除母源抗体的干扰作用。但是在实际试验中，黑河猪场自购苗一组母源抗体水平较高，母源抗体合格率达到80%，首免30 d后免疫抗体合格率迅速下降到50%。因此，在猪O型口蹄疫免疫中，应重视母源抗体对疫苗免疫的干扰作用，选择合适的时机进行疫苗免疫。

4.4试验也观察到，各试验小组中都出现接种同一疫苗，免疫操作和剂量相同，抗体检测方法和试剂相同，免疫前母源抗体水平一致，同群饲养的情况下，不同猪只产生的抗体水平有高有低，差异较大，说明个体差异对疫苗免疫效果也有较大影响。

参考文献：

[1]魏孔福，祁淑芸，林密，等.O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测[J] .中国兽医科学，2007，37（9）：787-790.

[2]高世杰，窦永喜，程爱华，等.母源抗体对猪口蹄疫疫苗免疫应答的影响[J].中国兽医学报，2011，31（1）：45-48.

中图分类号：S852.65+1

文献标志码：B

文章编号：0529-6005（2016）05-0047-03

收稿日期：2015-10-15

作者简介：高权利（1962-），男，高级畜牧师，本科，主要从事动物疫病防疫工作，E-mail：814222659@qq.com