鸡心包积液-肝炎综合征研究初报
2016-06-22袁万哲李玉保王建昌张姗陈萍崔元经美李佳暖左奕刘聚祥孙继国
□袁万哲 李玉保 王建昌 张姗 陈萍 崔元 经美 李佳暖 左奕 刘聚祥 孙继国
(1河北农业大学动物医学院,2河北省兽医生物技术工程技术研究中心,3聊城大学农学院,4河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心)
鸡心包积液-肝炎综合征研究初报
□袁万哲1,2李玉保3王建昌4张姗1陈萍1崔元1经美1李佳暖1左奕1刘聚祥1,2孙继国1,2
(1河北农业大学动物医学院,2河北省兽医生物技术工程技术研究中心,3聊城大学农学院,4河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心)
2015年6月以来,我国河南、山东、河北、辽宁、安徽、吉林等部分地区,鸡群发生了不明原因的以心包积液、肝脏肿大为特征的疾病,根据病变,暂将该病称为鸡心包积液-肝炎综合征。该病主要发生于20~30日龄的肉鸡,包括817、肉杂等,发病后4~8天为死亡高峰,病程8~15天,死亡率达20~30%。同时蛋鸡20~70日龄以及200~300日龄也有发生,但死亡率低于肉鸡。目前,该病的发病区域不断扩大,给我国养鸡业造成了巨大的经济损失。
该病发生后,河北省蛋鸡产业技术体系岗位专家刘聚祥教授迅速组织以袁万哲博士为首的团队成员开展相关研究。根据流行病学调查结果,初步确定该病为一种病毒性传染病。将发病鸡肝脏经研磨、冻融并过滤除菌,通过尿囊腔接种于9日龄SPF鸡胚,盲传5代后,收集尿囊液,提取DNA后进行PCR检测。结果显示,该病毒可在鸡胚中可以增殖,接种鸡胚120小时后有部分死亡,感染鸡胚肝脏可见肿大、出血等病变。通过提取尿囊液核酸进行PCR检测,成功利用一对禽腺病毒特异性引物扩增得到目的大小的条带,连接pMD18-T载体后转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,挑阳性克隆测序。结果显示,该目的片段大小为743bp,GenBank登录号为KT932640。BLASTN结果显示,该毒株与禽腺病毒4型亲缘关系较近。
收集第5代尿囊液,采用腹腔注射方式接种20只1日龄SPF鸡,并设定对照组,隔离饲养,攻毒后第3天开始,攻毒组开始死亡,死亡鸡剖检变化与自然发病鸡一致,从发病死亡鸡体内也能分离到禽腺病毒。
综上所述,通过病原分离鉴定及动物回归实验,确定了鸡心包积液-肝炎综合征病原为禽腺病毒4型。该病于1987年最早发现于巴基斯坦卡拉奇市附件的安卡拉地区,故也称为安卡拉病,我国之前尚未见该病发生与流行的报道。目前,部分鸡场采用组织水苗预防具有一定效果。