健康大学生肛门直肠酵母菌的分离和菌种分布

陈兆芳，杨寿昌，陈春福，邱国院，蒋玲荣，武有聪*（.大理大学基础医学院，云南大理　67000；2.大理卫生学校，云南大理　67000）



健康大学生肛门直肠酵母菌的分离和菌种分布

陈兆芳1，2，杨寿昌1，陈春福1，邱国院1，蒋玲荣1，武有聪1*
（1.大理大学基础医学院，云南大理671000；2.大理卫生学校，云南大理671000）

［摘要］目的：探索酵母菌在健康大学生肛门直肠的携带情况及菌种分布。方法：随机抽取大理大学健康大学生217名，采集肛门直肠拭子接种于SDA培养基，根据菌落特点、形态染色和生化反应综合鉴定。结果：健康大学生肛门直肠有效标本217份，分离到酵母菌72份，总体携带率为33.2%；其中男生标本98份，分离出酵母菌19株，携带率为19.4%，女生标本119份，分离出酵母菌53株，携带率为44.5%（χ2=15.332，P=0.00）。72株酵母菌中有白假丝酵母菌35株（占48.6%），光滑假丝酵母菌21株（占29.2%），热带假丝酵母菌13株（18.0%），克柔假丝酵母菌2株（占2.8%），其他酵母菌1株（占1.4%）。结论：健康大学生肛门直肠携带多种酵母菌，且以白假丝酵母菌为主。女生肛门直肠酵母菌携带率显著高于男生。

［关键词］酵母菌；肛门直肠；健康大学生

［DOI］10. 3969/j. issn. 1672-2345. 2016. 02. 020

酵母菌（俗称念珠菌）广泛分布于人体皮肤粘膜、口腔、肠道、外阴阴道和肛门直肠等，为临床上常见的条件致病性真菌。由各种原因导致的机体抵抗力下降、寄生部位发生改变或菌群失调而引起的真菌感染率越来越高〔1-2〕。酵母菌是构成人体微生态环境的重要常住寄生菌。随着年龄、激素水平和微环境因素的改变酵母菌的携带率和毒力因子的表达也会随之改变〔3-4〕。据报道〔5-8〕，酵母菌在健康人群皮肤、口腔、肠道和外阴阴道的携带率分别为43.5%、8.8%、35.1%和29%，但尚未见健康人群肛门直肠酵母菌携带率的报道，也不清楚男性与女性肛门直肠酵母菌携带率之间的差异。本项目以我校健康大学生为对象，研究肛门直肠酵母菌的携带情况及其与性别的关系，对于临床泌尿生殖道念珠菌病的防治具有一定意义。

1　材料与方法

1.1沙氏液体培养基的制备蛋白胨（Oxoid）5 g，葡萄糖10 g，蒸馏水500 mL，加热溶解，调pH至6.0， 115℃灭菌15 min，分装备用。

1.2改良SDA（Sabouraud dextrose agar）培养基的制备蛋白胨（Oxoid）10 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，加入蒸馏水1 000 mL，灭菌后适当冷却，加入青霉素（100 mg/mL）和氯霉素（50 mg/mL），分装备用。

1.3标本采集随机抽取大理大学在读健康大学生217名（男生98名，女生119名），年龄18～21岁，排除以下情况：长期服用抗生素、抗真菌药物及免疫抑制剂者，免疫缺陷者，HIV阳性者，肛周有感染者、有痔者和消化系统症状者。用无菌棉签蘸取生理盐水，在肛周来回擦拭2～3圈，将棉签伸入肛门内，转动棉签，之后将棉签投入沙氏液体培养基内，带回实验室分离培养。

1.4酵母菌鉴定标本在改良SDA培养基上37℃培养1～2周，每天观察，对可疑酵母菌进行如下鉴定：①菌落观察；②革兰染色；③芽管形成试验。在96孔细胞培养板内加入0.2 mL健康人血清，取少量酵母菌菌落，充分混匀，37℃孵育2～3 h，制成压滴片观察；④厚膜孢子形成试验：可疑菌接种于玉米琼脂培养基，加盖无菌玻片，28℃培养3 d后观察；⑤科玛嘉培养基鉴定：可疑菌接种于科玛嘉显色培养基（CHROM agar，购自郑州博赛科技有限责任公司），37℃培养24 h，根据菌落颜色确定菌种。见表1。

表1　酵母菌在科玛嘉显色培养基上的菌落颜色

2　结果

2.1健康大学生肛门直肠酵母菌携带率为调查健康大学生肛门直肠酵母菌的携带情况，分析男生与女生之间酵母菌携带率的差异，共采集标本217份，分离出72株酵母菌，总携带率为33.2%（72/217）。其中，男生标本98份，分离出19株酵母菌，携带率为19.4%；女生标本119份，分离出酵母菌53株，携带率为44.5%，女生肛门直肠酵母菌携带率显著高于男生。见表2。

表2　健康大学生肛门直肠酵母菌携带率

2.2健康大学生肛门直肠酵母菌的菌种分布在72株酵母菌中白假丝酵母菌最多（35株，占48.6%），其次是光滑假丝酵母菌（21株，占29.2%）和热带假丝酵母菌（13株，占18.0%），克柔假丝酵母菌和其他酵母菌分别为2株（2.8%）和1株（1.4%）。见表3。

表3　72株健康大学生肛门直肠酵母菌菌种分布

3　讨论

酵母菌是常见的条件致病性真菌，广泛分布于健康人体的皮肤、口腔、肠道和外阴阴道等。随着年龄的增加和药物（如广谱抗生素、免疫抑制剂）的长期使用，酵母菌引起的感染也越来越多〔1〕。目前尚不清楚健康人群肛门直肠酵母菌的携带率和菌种分布，男性与女性肛门直肠酵母菌携带率的差异。本文以健康大学生为研究对象，分析该组人群肛门直肠酵母菌的微生物学特征和携带情况，对酵母菌病的防治和肛门直肠局部微生态学研究具有重要意义。

本次调查中发现健康大学生肛门直肠的酵母菌携带率为33.2%，与文献报道的健康人群消化道酵母菌携带率33.3%接近〔9〕。其中，女性健康大学生肛门直肠酵母携带率为44.5%，显著高于男性大学生的携带率（19.4%），这可能与女性易患泌尿生殖道念珠菌病有关〔10-11〕。白假丝酵母菌是念珠菌属中最常见的、致病性较强的菌株〔12-13〕。白丽等〔5，14〕研究了健康人群口腔和女性生殖道的酵母菌携带情况，发现酵母菌在上述两个部位的携带率分别为8.8%和19.5%，其中白假丝酵母菌的构成比分别为43%和50%。本研究中分离出72株酵母菌，以白色假丝酵母菌为主（占48.6%）；在非白假丝酵母菌中，最多的是光滑假丝酵母菌（占29.2%），与上述文献报道结果一致。此外，本研究中发现部分健康人群肛门直肠同时携带两种不同的酵母菌，有5份标本分离出两种不同酵母菌，均为白假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌的混合共存，混合携带率为2.3%（5/217），明显低于周菊芬等〔15〕报道的健康人群口腔酵母菌混合携带率（11.3%），这可能与菌种分离的部位、宿主遗传背景和标本量不同有关。

（感谢白丽教授对本文的指导！）

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（责任编辑董杰）

Isolation and Species Distribution of the Anorectal Yeast in Healthy College Students

Chen Zhaofang1,2, Yang Shouchang1, Chen Chunfu1, Qiu Guoyuan1, Jiang Lingrong1, Wu Youcong1*
（1. Pre-clinical College, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China; 2. Dali Medical School, Dali, Yunnan 671000, China）

〔Abstract〕Objective: To explore the carrier status and species distribution of yeast in anus and rectum of healthy college students. Methods: 217 cotton swabs collected randomly from the anus and rectum of healthy college students were inoculated on the modified Sabouraud Dextrose Agar（SDA）, Candida species were identified based on the colony characteristics, Gram stain, and biochemical reactions. Results: 72 Candida species were isolated from 217 specimens, the overall carrier rate of yeast in the anus and rectum of healthy college student was 33.2%（72/217）; of them, 19 strains were isolated from 98 male specimens, the carrier rate was 19.4%, and 53 strains were isolated from 119 female specimens, the carrier rate was 44.5%（χ2=15.332, P=0.00）. Among 72 Candida species, there were 35 strains of C. albicans（48.6%）, 21 strains of C. glabrata（29.2%）, 13 strains of C. tropicalis（18.1%）, 2 strains of C. krusei（2.8%）, 1 strain of other Candida species（1.3%）. Conclusion: There were various conditioned pathogenic yeasts in the anus and rectum of healthy college students, and C. albicans was the major one. The carrier rate of female students was significantly higher than that of the male students.

〔Key words〕yeast; anus and rectum; healthy college students

［中图分类号］R379.4

［文献标志码］A

［文章编号］1672-2345（2016）02-0068-03

［基金项目］云南省应用基础研究计划项目（2014FB156）

［收稿日期］2015-08-26

［作者简介］陈兆芳，讲师，主要从事医学微生物学及病理学教学研究.

*通信作者：武有聪，副教授，博士．