Notch1、VEGF在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

2016-06-01马东华时志民郑彦强

现代中西医结合杂志 2016年14期

关键词：妇幼保健内膜通路

马东华，时志民，郑彦强

(1. 河北省大名县妇幼保健院，河北大名 056900；2. 河北工程大学，河北邯郸 056000，3. 河北省邯郸市妇幼保健院，河北邯郸 056002)

Notch1、VEGF在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

马东华1，时志民2，郑彦强3

(1. 河北省大名县妇幼保健院，河北大名 056900；2. 河北工程大学，河北邯郸 056000，3. 河北省邯郸市妇幼保健院，河北邯郸 056002)

[摘要]目的探讨转染转移相关基因1 (Notch1)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜癌组织中的表达情况及临床意义。方法收集子宫内膜癌组织标本68例为实验组，并选取正常子宫内膜组织标本32例为对照组，采用EliVisionTM免疫组织化学法检测各组Notch1和VEGF的表达情况。结果实验组中Notch1和VEGF蛋白阳性表达率均明显高于对照组(P<0.05)。Notch1和VEGF的表达与肿瘤淋巴结转移、cTNM、分化程度有关(P<0.05)；Notch1和VEGF表达呈负相关(P<0.05)。结论Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织的表达情况与子宫内膜癌的发生、发展、转移及预后密切相关，临床检测二者表达情况可为评估子宫内膜癌严重程度提供参考。

[关键词]子宫内膜癌组织；Notch1蛋白；VEGF蛋白；EliVisionTM免疫组化；生存率

子宫内膜癌为女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率居女性恶性肿瘤的第2位，且近年来有上升趋势，早期诊断该病成为目前亟待解决的问题。多种细胞信号系统参与肿瘤的发生、发展过程，在通路中某一环节的异常可致细胞生长失控,最终导致肿瘤形成。Notch1在细胞发育、增殖、分化和凋亡的过程中发挥着重要作用，而VEGF在组织血管生成过程中起到重要作用，本研究采用免疫组织化学SP法检测了Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中的表达情况，旨在探讨二者表达情况与子宫内膜癌的关系。

1研究资料

1.1一般资料选取2010年1月—2014年12月大名县妇幼保健院收治并存档的68例子宫内膜癌患者癌组织蜡块为实验组，患者年龄56～71岁，中位年龄62.9岁，按照WHO标准[1]对全部病例的切片进行复查。另选取正常子宫内膜组织标本32例作为对照组，患者年龄55～70岁，中位年龄62.5岁。

1.2研究方法S-P试剂盒、二硝基联苯胺(DAB)显色液及兔抗人Notch1单克隆抗体和兔抗人VEGF多克隆抗体均购自武汉博士德生物技术有限公司。采用EliVisionTM法,先进行抗原修复，抗体为兔抗人Notch1和兔抗人VEGF(1∶100)，取已知切片作为阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照，DAB显色，苏木素复染，镜下观察。Notch1阳性表达定位于细胞核，VEGF阳性表达主要定位于细胞浆和细胞膜，以在细胞核或胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性信号。每张切片均随机观察5个高倍视野(×400)，阳性细胞数<5%为(-)，5%～25%为(+)，26%～50%为()，>50%为()。+～为阳性表达。

1.3统计学方法采用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用2检验,相关性分析用 Spearman 等级相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中的表达情况Notch1阳性表达定位于细胞核，VEGF阳性表达主要定位于细胞浆和细胞膜，见图1和图2。

图1　Notch1在子宫内膜癌中的表达情况(SP,×100)

图2　VEGF在子宫内膜癌中的表达情况(SP,×100)

2.22组Notch1和VEGF蛋白阳性表达情况对照组中Notch1蛋白阳性表达29例(88%)，VEGF蛋白阳性表达10例(31)；实验组中Notch1阳性表达30例(44%)，VEGF蛋白阳性表达57例(75%)。2组中Notch1和VEGF阳性表达率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。

2.3Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中的表达与病理指标的关系Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中的表达与分化程度、淋巴结转移、病理分期有关 (P均<0.05)；且Notch1与肌层浸润程度有关(P<0.05)。见表1。

表1　Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中的

2.4子宫内膜癌组织中Notch1与VEGF表达的相关性Notch1、VEGF在子宫内膜癌中的表达呈明显正相关(r=-0.513，P<0.05)。见表2。

表2　子宫内膜癌组织中Notch1与VEGF

3讨论

目前子宫内膜癌发病机制仍不清楚，可能与雌激素、子宫内膜增生过长、体质、绝经后延、遗传等有关，早期症状不典型，难以早期诊断。研究发现Notch信号通路参与肿瘤的发生，该通路家族成员众多，在哺乳动物中包括Notch1、Notch1、Notch3和Notch4 4个受体[2-3]，其中Notch1是Notch信号通路中研究最为广泛的受体[4]，其参与肿瘤的发生，并且在不同的恶性肿瘤组织中表达水平不同，表现为致癌或抑癌作用，如在乳腺癌、结肠癌和血液系统肿瘤[5-7]等组织中呈现高表达，为致癌作用；但是在皮肤鳞状细胞癌、胃癌[8-9]中呈现低表达，起到抑癌、拮抗作用。本研究对Notch1在子宫内膜癌中表达情况进行分析发现，Notch1在子宫内膜癌组织中阳性表达率明显低于正常子宫内膜组织，在子宫内膜癌组织中表现为抑癌作用，应该是Notch1抑制组织内的细胞通路，重点是抑制PI3K/Akt通路和Wnt通路从而抑制癌细胞的增生；并且Notch1在子宫内膜癌组织中的表达情况与病理分期、有无淋巴结转移有关，说明在病理分期较晚、发生淋巴结转移的组织中Notch1呈现低表达，其水平的下降抑制相关通路(Wnt通路等)的作用呈现能力不足，起不到抑制肿瘤发展的作用，水平高低侧面反映出子宫内膜癌的预后和恶性程度情况；但 Notch1表达情况与组织类型没有相关性，考虑到也许是标本量的不足，需要在以后工作中多收集病例资料和随访工作，科学地反映其真实水平。

VEGF在临床上已经被广泛关注，其可促进组织血管生成，尤其在肿瘤的血管生成过程中，新生血管为肿瘤生长提供必要的营养物质维持其代谢[10]，另外血管也是肿瘤生长、发生浸润、转移的基础，是重要的转移途径。有大量证据证明VEGF在肿瘤组织中高表达[11-12]，作用机制公认是降解血管内皮细胞基质、破坏血管屏障作用，增加渗透作用，促进大量的癌细胞转移进入血液循环而转移到远处。本研究结果显示，在子宫内膜癌组织中VEGF的阳性表达率明显高于正常子宫内膜组织，并且与肿瘤分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移、病理分期有关，提示VEGF可促进子宫内膜癌发生、转移，其高表达直接证明预后差，值得临床医生关注。

Spearman相关性分析显示，Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织中呈现负相关，提示Notch1表达的增高可能负反馈作用于VEGF，抑制并且阻断VEGF促血管生长作用，使肿瘤血管形成受阻，从而起到抑癌作用。VEGF在临床上检测较多，故检测Notch1目前只是在实验室层面上检测，Notch1在有条件的医院可以推广，为进一步研究子宫内膜癌提供帮助。

总之，Notch1和VEGF在子宫内膜癌组织的表达情况与子宫内膜癌的发生、发展、转移及预后密切相关，临床检测二者表达情况可为评估子宫内膜癌严重程度提供参考。

[参考文献]

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