结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核诊断中的应用价值*

罗　槑,徐园红,吴桂辉,杨　铭,岳　冀

(成都市公共卫生临床医疗中心，四川成都 610066)



·论著·

结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核诊断中的应用价值*

罗槑,徐园红,吴桂辉,杨铭,岳冀△

(成都市公共卫生临床医疗中心，四川成都 610066)

摘要:目的评估结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核的诊断价值。方法纳入包括菌阴性肺结核病患者145例、非结核肺部疾病患者45例共190例。所有研究对象进行结核感染T细胞检测，计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等指标。结果结核感染T细胞检测对菌阴性肺结核诊断的灵敏度为85.5%，特异度为84.4%，阳性预测值为94.7%，阴性预测值为64.4%。不同年龄段间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核感染T细胞检测有较高的阳性预测值，适用于菌阴性肺结核病的临床辅助诊断。

关键词:结核感染T细胞检测；菌阴性肺结核；灵敏度；特异度

结核病是引起全球关注的重大共公卫生问题，结核病在我国也被列为重大传染病之一。虽然目前已有很多技术运用于结核病诊断，但各方法都有一定的局限性如抗酸染色镜检灵敏度太低、分枝杆菌培养时间长、PCR容易产生假阳等。最常见的结核菌素皮试试验(TST)由于其与包括卡介苗在内的其他分枝杆菌有交叉反应，特异性较差[1]。因此，以上这些方法仍不能满足临床早期诊断的需要，尤其是菌阴性结核病的诊断。由于缺乏有效的病原学诊断依据和手段，结核杆菌涂片阴性和培养阴性的结核病诊断常常依靠临床症状、影像学表现及对诊断性抗结核治疗的反应来进行判断，可能会造成诊断不明确，导致疾病的发展和传播[2]。因此，亟需快速、准确的早期诊断方法为临床提供早期诊断依据。本研究运用了结核感染T细胞试验来评价该方法对菌阴性肺结核诊断的应用价值。

1资料与方法

1.1一般资料选取2014年1月至2014年8月就诊于成都市公共卫生临床医疗中心被诊断为菌阴性肺结核的患者共145例。患者的诊断根据临床表现、影像学实验室等检查，按《结核病诊断标准和分类》进行。所有患者均接受了痰涂片查抗酸杆菌、痰结核分枝杆菌培养、胸片等结核相关检查。同时，纳入了同期本院的非结核肺部疾病患者45例作为对照。

1.2结核感染T细胞检测检测试剂盒为结核感染T细胞检测试剂盒(体外释放酶联免疫法)，购自万泰生物技术有限公司。采集纳入研究者全血并用肝素抗凝，于2 h内分别分装1 mL至“N”“T”“P”3个培养管中。37 ℃培养(22±2)h之后，离心取血浆进行ELISA检测，得出3个培养管中γ干扰素的水平。根据说明书将结果表示为阳性、阴性和不确定3种。分别计算结核感染T细胞检测对菌阴性肺结核诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比、诊断准确度。

1.3统计学处理采用SPSS19.0统计学软件进行统计学处理。计数资料以频数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1患者基本资料共纳入患者190例，基本信息见表1。其中菌阴性肺结核组共145例，初治结核126例(86.9%)，复治结核19例(13.1%)；非结核肺部疾病组45例，其中肺炎21例、肺癌16例、支气管扩张4例，慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺吸虫病各2例。

表1　　纳入研究的患者基本信息

2.2结核感染T细胞检测结果在菌阴性肺结核组中，结核感染T细胞阳性有142例(85.8%)，非结核肺部疾病组阳性有7例(15.6%)，两组阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.3结核感染T细胞检测对菌阴性肺结核的诊断价值结核感染T细胞在不同年龄段的阳性率分别为：<18岁87.5%，18～60岁86.8%，>60岁73.5%，阳性率随年龄增加而下降。结核感染性T细胞对诊断菌阴性肺结核的灵敏度为85.5%，特异度为84.4%，阳性预测值为94.7%，阴性预测值为64.4%，阳性似然比为5.5，阴性似然比为0.17，诊断准确度为85.3%。上述诊断效能指标在不同年龄段人群间进行比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表2　　结核感染T细胞检测结果[n(%)]

表3　　结核感染T细胞检测对不同年龄组菌阴性肺结核的诊断价值

-:该项无数据。

3讨论

菌阴性结核病因为缺乏理想的诊断和鉴别诊断手段，一直是结核病诊断的难点。虽然菌阴性结核较活动性肺结核传染性小，但对于密切接触者来讲依然有较大的感染风险。

结核感染T细胞检测是以检测结核分枝杆菌特异性T细胞反应为基础的γ干扰素释放试验为原理，作为一种新的检测方法已在欧洲、美国等地区广泛应用[3]。结核感染T细胞检测是基于在体外培养条件下结核特异性抗原结核早期分泌抗原靶分子(ESAT)和培养滤液蛋白10(CFP-10)刺激感染者的全血标本的感染性T淋巴细胞，检测释放的γ干扰素。这些抗原不存在于卡介苗及其他致病性非结核分枝杆菌的中，因此具有很高的特异性[4]。由于其较高的灵敏度和特异度，越来越多地成为结核病辅助诊断的常规手段。

本次研究结果显示结核感染T细胞对菌阴性肺结核总灵敏度为85.5%，Wlodarczyk等[5]报道的灵敏度为55.6%，卢峰岳等[6]报道为86.6%。总特异度为84.4%同Wlodarczyk等[5]报道的87.0%相近。灵敏度随年龄增长有下降的趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)。Kobashi等[7]报道日本青年和老年结核病患者的灵敏度无明显差异。该方法的特异度在小于18岁和大于60岁的年龄段中均为100.0%，阳性集中在18～60岁的年龄段，可能与我国属于结核高发国家之一，患者是未知的感染暴露人群，有待进一步追踪调查。

本次报道的菌阴性肺结核组有3例HIV阳性，HIV感染合并结核时，由于病情表现的复杂性，因此诊断更有难度。在这3例患者中，2例检测结果为阳性，分别是年龄31和34岁的成年男性；另1例检测结果阴性的为4岁男性儿童，由于同时有免疫系统损害和细胞免疫未成熟的表现，1型T细胞介导的细胞免疫反应低下，所以出现假阴性，因此免疫低下人群的对结核感染T细胞检测反应还需要通过增加样本量来加强研究。

早期诊断和早期治疗是结核防控最重要的策略之一。结核感染T细胞检测对菌阴性肺结核有较高的灵敏度、特异度和阳性预测值，标本容易获取，实验室结果快速、稳定。该方法适合于临床辅助诊断和鉴别诊断。

参考文献

[1]Rangaka MX,Wilkinson KA,Glynn JR,et al.Predictive value of interferon-γ release assays for incident active tuberculosis:a systematic review and meta-analysis[J].Lancet Infect Dis,2012,12(1):45-55.

[2]Dorman SE.New diagnostic tests for tuberculosis:bench,bedside,and beyond[J].Clin Infect Dis,2010,50(Suppl 3):S173-177.

[3]Mazurek GH,Jereb J,Lobue P,et al.Guidelines for using the QuantiFERON-TB Gold test for detecting Mycobacterium tuberculosis infection,United States[J].MMWR Recomm Rep,2005,54(RR/15):49-55.

[4]OnurH,HatipogluS,AricaV,etal.Comparison ofquantiferontestwithtuberculinskintestforthedetectionoftuberculosisinfectioninchildren[J].Inflammation,2012,35(4):1518-1524.

[5]Wlodarczyk M,Rudnicka W,Janiszewska-Drobinska B,et al.Interferon-gamma assay in combination with tuberculin skin test are insufficient for the diagnosis of culture-negative pulmonary tuberculosis[J].PLoS One,2014,9(9):e107208.

[6]卢峰岳，黄艳君，刘春平，等．γ-干扰素释放试验诊断活动性结核病的临床评价[J]．实用医学杂志，2013，29(23)：3827-3829．

[7]Kobashi Y,Mouri K,Yagi S,et al.Clinical utility of the QuantiFERON TB-2G test for elderly patients with active tuberculosis[J].Chest,2008,133(5):1196-1202.

Performance of T cell infected with Mycobacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis*

LuoMei，XuYuanhong，WuGuihui，YangMing，YueJi△

(ChengduPublicHealthClinicalCenter,Chengdu，Sichuan610066,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the application value of T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis.MethodsIn total,145 patients with smear and culture negative pulmonary tuberculosis and 45 patients with non-tuberculosis lung disease were enrolled in the study.All patients received T cell infected with Mybacterium tuberculosis test and sensitivity,specificity,positive predicted value,negative predicted value of testing for the diagnosis of smear and culture-negative TB patients were calculated.ResultsThe sensitivity of specificity T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis was 85.5%,the specificity was 84.4%,positive predicted value was 94.7%,negative predicted value was 64.4%.No statistical significance in age-dependent groups(P>0.05).ConclusionT cell infected with Mybacterium tuberculosis assay has high positive predicted value in diagnosis of smear and culture negative pulmonary tuberculosis and is suitable for clinical auxiliary diagnosis.

Key words:T cell infected with Mybacterium tuberculosis assay;smear and culture negative pulmonary tuberculosis;sensitivity；sensitivity；specificity

(收稿日期：2015-12-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.008

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)08-1035-03

基金项目：成都市科技局资助项目(2014-HM01-00371-SF)；四川省医学会青年创新课题资助项目(Q14021)。

作者简介：罗槑，女，主治医师，主要从事传染流行病学的相关研究。△通讯作者，E-mail:yj133881@126.com。