隐形眼镜清洗器去除蛋白效果的评价
2016-05-13孙碧霞
文/孙碧霞
隐形眼镜清洗器去除蛋白效果的评价
文/孙碧霞
利用蛋白电泳原理设计的隐形眼镜清洗器,能将隐形眼镜表面及透氧孔中的蛋白质及杂质吸附出来。本研究利用人工泪液浸泡镜片,采用Bradford方法测定了该隐形眼镜清洗器对附着在隐形眼镜上的蛋白质的洗脱效果,结果显示,该隐形眼镜清洗器能够将隐形眼镜中的蛋白质去除干净。
隐形眼镜清洗器;蛋白质洗脱率;Bradford 法
1 前言
隐形眼镜,医学上又叫“角膜接触镜”,具有美观、方便的特点,深受消费者尤其是年轻消费者的喜爱。但是,沉积在隐形眼镜内外表面上及其基质内的蛋白质和其他杂质等被认为是引起一系列并发症的重要原因[1]。
目前市面上出现了一款新的隐形眼镜清洗器,其利用蛋白电泳的原理,将隐形眼镜表面及透氧孔中的蛋白质、杂质等吸附出来,恢复到出厂时干净全新的状态,从而大大缓解隐形眼镜佩戴者眼睛干涩、充血等不适症状,降低佩戴者感染几率。
本文阐述了利用人工泪液浸泡隐形眼镜,然后分别用市面所售的隐形眼镜护理液以及该新型隐形眼镜清洗器对隐形眼镜进行去蛋白护理,经Bradford方法测定隐形眼镜清洗器对吸附在镜片表面蛋白质的清除率。
2 材料和方法
2.1 材料
①人工泪液配制:溶菌酶(Sigma)、BAS、Na2HPO4、2H2O、CaCl2。2H2O和NaCl按照常规方法配制,调节pH至7.0左右。
②隐形眼镜护理液和隐形眼镜均为市面所售商品。
③仪器:小型培养皿、镊子、培养箱、酶标仪等。
④试剂:Quick start Bradford Protein Assay Kit(伯乐,货号:5000201)
2.2 方法
2.2.1 实验设计
对照组:
隐形眼镜护理液处理,标记为CK1。
处理组:
隐形眼镜分别在模拟泪液蛋白和隐形眼镜护理液中浸泡24h、48h、72h,取出后用双蒸水冲洗3次。
经仪器清洗30s后,标记为M-24h、M-48h、M-72h。
经护理液浸泡过夜后,标记为N-24h、N-48h、N-72h。
2.2.2 蛋白测定
将2.2.1中获得的蛋白溶液分别利用Bio-Rad公司的Bradford试剂进行定量测定。
3 结果
3.1 标准曲线的制备
首先利用Bradford方法对人工模拟泪液进行蛋白定量,标准曲线如下图。
3.2 测定结果
分别将经过隐形眼镜清洗器清洗过后的液体以及经过护理液浸泡过后的液体进行蛋白定量,结果如表1。
表1
从表1中可以看出各个处理组对应的蛋白浓度分别为表2。
表2
表2中的对应蛋白浓度,指的是经仪器清洗或者是护理液浸泡之后,洗脱下来的蛋白,也就是表1中测出的浓度减去CK1的浓度。因为单独测量护理液的时候,发现本身有吸光值,因此,要计算洗脱下来的蛋白需要减去护理液的本底值。
4 结果和讨论
经仪器处理后,洗脱下来的蛋白浓度明显高于不经仪器清洗的实验组,说明隐形眼镜上的附着蛋白得到了清理,但是遗憾的是,由于目前我们缺少检测隐形眼镜杂质残留的仪器,实验结果无法证实是否对隐形眼镜上的其它杂质进行了完全清除,这还需要后续的实验来证明。
[1] 刘毅.隐形眼镜镜片上的沉淀物及其相关因素[J].国外医学:眼科学分册,1998, 22(6):333~338
作者单位:苏州三个臭皮匠生物科技有限公司