不同菌型幽门螺杆菌感染消化性溃疡患者IL-10、TNF-α的表达情况观察

程晓娜 胡阳黔

·论著·

不同菌型幽门螺杆菌感染消化性溃疡患者IL-10、TNF-α的表达情况观察

程晓娜 胡阳黔

目的 观察不同菌型幽门螺杆菌(H.pylori)感染消化性溃疡患者白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况。方法 选择2012年3月至2014年11月接受治疗的100例H.pylori感染消化性溃疡患者作为研究病例，分别测定患者血清中IL-10、TNF-α水平。记录患者血清中IL-10、TNF-α水平含量，并比较H.pylori感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡血清中IL-10、TNF-α水平含量。结果 IL-10的表达水平Ⅰ型H.pylori感染检测值显著高于H.pylori阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)；Ⅰ型H.pylori感染组检测值仅稍高于Ⅱ型H.pylori感染组，差异无统计学意义(P>0.05)。TNF-α的表达水平Ⅰ型H.pylori感染检测值均显著高于H.pylori阴性组及Ⅱ型H.pylori感染组，差异均有统计学意义(P<0.05)。IL-10的表达水平在Ⅰ型H.pylori感染及Ⅱ型H.pylori感染十二指肠球部溃疡均与胃溃疡基本相符，差异均无统计学意义(P>0.05)；TNF-α的表达水平在Ⅰ型H.pylori感染十二指肠球部溃疡显著高于胃溃疡，差异有统计学意义(P<0.05)；TNF-α的表达水平在Ⅱ型H.pylori感染十二指肠球部溃疡仅稍高于胃溃疡，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 不同菌型H.pylori感染消化性溃疡患者血清中的IL-10、TNF-α水平差异较大，可以为临床上消化性溃疡的诊断提供有利价值。

幽门螺杆菌感染;消化性溃疡；白介素-10；肿瘤坏死因子-α

消化性溃疡是临床上较为常见的疾病之一，多发生于中年群体中。其主要致病菌为幽门螺杆菌(H.pylori)，占所有致病菌的80%以上。临床上治疗消化性溃疡的关键在于根除H.pylori[1]。近年来，其发病率呈上升趋势，严重影响患者的生活质量。因此尽早地检查并预防治疗是临床上的关键问题。有研究表明，不同菌型H.pylori感染消化性溃疡患者血清中的白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平含量显著升高，可以作为消化性溃疡的重要诊断指标[2]。我院就不同菌型H.pylori感染消化性溃疡患者IL-10、TNF-α的表达情况进行了本次试验，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年3月至2014年11月于我院接受治疗的100例H.pylori感染消化性溃疡患者作为研究病例。所有患者均经胃镜检查被确诊为消化性溃疡。其中男52例，女48例；年龄41～69岁，平均年龄(53.6±4.7)岁；溃疡直径0.4～1.8 cm，平均溃疡直径(1.1±0.4)cm。经胃黏膜活检快速尿素酶试验检测为H.pylori阳性86例(H.pylori Ⅰ型62例，H.pylori Ⅱ型25例)，其中十二指肠球部溃疡57例，胃溃疡29例，H.pylori阴性14例。阳性与阴性患者的性别比、年龄、溃疡直径等一般资料差异均无统计学意义(P>0.05)。整个试验均在患者及其家属的同意签署下完成。

1.2 方法

1.2.1 H.pylori基因抗体检测具体方案措施为：于H.pylori阳性患者中抽取空腹静脉血4 ml，并将其置入存有抗凝剂的试管中，采用高速离心机进行离心分离血清，转速为3 000 r/min，15 min。采用免疫印迹法(BenchPro4100蛋白质印迹处理系统，普瑞麦迪(北京)实验室技术有限公司)测定血清中基因抗体。

1.2.2 血清中IL-10、TNF-α含量水平的测定：分别抽取所有患者的静脉血4 ml，将其置于试管中，试管中保证无任何添加剂，最后将其置于-20℃的环境中进行冷冻。实验时将其血清取出，然后再置于37℃温浴箱中进行孵化，同时将5℃的IL-10试剂盒及TNF-α试剂盒分别取出来，等到其温度升到28℃为止，进行配制标准品液，接着加洗涤液，建立标准曲线并加样，将反应板利用透明胶密封保存，然后洗板4～7次，将50 μl第一抗体工作液置于37℃反应板上60 min，再次洗板后，将100 μl酶标抗体工作液置于37℃反应板上60 min，接着再洗板，再将100 μl底物液置于37℃温浴箱中反应10 min，同时在反应板上再次加50 μl终止液，最后将反应板置于酶标仪(SP-Max 2300A光吸收型全波长酶标仪，上海闪谱生物科技有限公司)里，分别测定其吸光值。

2 结果

2.1 患者血清中IL-10水平比较 IL-10的表达水平在H.pylori Ⅰ型感染组检测值显著高于H.pylori阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)；H.pylori Ⅰ型感染组检测值仅稍高于H.pylori Ⅱ型感染组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 患者血清中IL-10水平比较

类别IL-10H.pyloriⅠ型(n=62)31.6±11.8*H.pyloriⅡ型(n=24)20.3±13.8 H.pylori阴性(n=14)19.2±6.2

注：与H.pylori阴性比较，*P<0.05

2.2 患者血清中TNF-α水平比较 TNF-α的表达水平在H.pylori Ⅰ型感染组检测值显著高于H.pylori阴性组及Ⅱ型H.pylori感染组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 3组患者血清中TNF-α水平比较

类别TNF-αH.pyloriⅠ型(n=62)43.6±11.7*H.pyloriⅡ型(n=24)29.5±8.4*#H.pylori阴性(n=14)11.6±4.5

注：与H.pylori阴性比较，*P<0.05；与H.pylori Ⅰ型比较，#P<0.05

2.3 H.pylori感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡血清中IL-10水平比较 IL-10的表达水平在H.pylori Ⅰ型感染及H.pylori Ⅱ型感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡基本相符，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 H.pylori感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡

血清中IL-10水平比较

类别H.pyloriⅠ型H.pyloriⅡ型十二指肠球部溃疡(n=57)32.4±19.619.3±8.6胃溃疡(n=29)30.6±15.921.4±8.5 t值0.42771.0747 P值0.66990.2856

2.4 H.pylori感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡血清中TNF-α水平比较 TNF-α的表达水平在H.pylori Ⅰ型感染十二指肠球部溃疡显著高于胃溃疡，差异有统计学意义(P<0.05)；TNF-α的表达水平在H.pylori Ⅱ型感染十二指肠球部溃疡仅稍高于胃溃疡，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 H.pylori感染十二指肠球部溃疡与胃溃疡

血清中TNF-α水平比较

类别H.pyloriⅠ型H.pyloriⅡ型十二指肠球部溃疡(n=57)48.2±10.628.9±11.6胃溃疡(n=29)31.7±7.428.3±3.6 t值7.49470.2713 P值0.00000.7868

3 讨论

消化性溃疡是临床上的常见病和易发病，临床上常表现为腹部疼痛、烧心、嗳气、呕吐及恶心等症状。近年来，其发病率呈上升趋势，严重制约着患者的身心健康，其形成主要有H.pylori感染、胃黏膜保护作用减弱、胃酸分泌过多等因素[3]。其中H.pylori感染的机制为：H.pylori可以通过增加胃酸的分泌，使得十二指肠发生生化反应，从而导致胃黏膜产生炎性代谢物，最终改变了胃黏膜的屏障，引发了消化性溃疡[4]。因此，采取何种指标可以准确有效的诊断消化性溃疡是临床上的关键性问题[5]。

研究表明，IL-10、TNF-α水平显著升高可以作为诊断不同菌型H.pylori感染消化性溃疡的重要诊断指标，效果良好[6]。IL-10作为一种重要的免疫调节细胞因子，其分泌合成主要是来自于TH2淋巴细胞，通过旁分泌方式或自分泌方式进行发挥作用，从而降低免疫细胞的活性，可以抑制TH1淋巴细胞因子的活性，并阻止其合成路径，发挥抗炎作用；同时还可以通过抑制T细胞来保持机体处于免疫反应状态[7-9]。一般情况下，TH1与TH2细胞亚群分泌的因子负反馈可以制约着TH1与TH2细胞的平衡。而H.pylori感染者可以促进TH1免疫应答抑制和TH2免疫应答的增强，从而导致血清中IL-10的水平含量增加[10]。

本试验数据显示，Ⅰ型H.pylori感染者血清中IL-10的水平含量高达(31.6±11.8)pg/ml，显著高于H.pylori 阴性患者(19.2±6.2)pg/ml。说明IL-10的水平含量升高可以作为不同菌型H.pylori感染消化性溃疡的重要诊断指标。长期持续的H.pylori感染者可以加重TH1的免疫应答，使得TNF-α水平含量增加[11-13]。TNF-α作为一种重要的促炎因子，可以引起炎性细胞移动，同时使得胃黏膜局部微血管处于内凝血状态，从而造成胃黏膜的损伤[14]。本研究显示，H.pylori 感染者血清中TNF-α水平含量高达(43.6±11.7)pg/ml，显著高于H.pylori阴性患者(11.6±4.5)pg/ml，说明TNF-α水平含量升高也可以作为不同菌型H.pylori感染消化性溃疡的重要诊断指标，与相关文献[15,16]一致。此外，本研究提示，十二指肠球部溃疡患者血清中IL-10水平含量与胃溃疡患者的基本相符，说明血清中IL-10水平含量与溃疡部位无关，与相关文献[17]一致。但Ⅰ型H.pylori感染十二指肠球部溃疡患者血清中TNF-α水平含量高达(48.2±10.6)pg/ml，显著高于Ⅰ型H.pylori感染胃溃疡患者(31.7±7.4)pg/ml，说明血清中TNF-α水平含量与Ⅰ型H.pylori感染密切相关。

综上所述，IL-10、TNF-α水平显著升高可以作为诊断不同菌型H.pylori感染消化性溃疡的重要诊断指标，可以为临床提供有效证据，值得临床长期推广应用。

1 徐培县,冯晓玲.新四联疗法与传统三联疗法治疗幽门螺杆菌感染疗效分析.中国医药,2011,8:293-294.

2 王东升,吴丽波,胡中桥,等.幽门螺杆菌感染消化性溃疡治疗的疗效分析.中华医院感染学杂志,2014,24:921-923.

3 汪官富,徐颖鹤,苏杭,等.双岐杆菌四联活菌片联合三联疗法治疗幽门螺杆菌阴性消化性溃疡的疗效.中华医院感染学杂志,2013,23:2074-2076.

4 王静,邝宇香,张海燕,等.清热祛湿法联合培菲康对溃疡性结肠炎大鼠疗效及IL-10、 TNF-α表达的影响.广州中医药大学学报,2014,31:756-761,845.

5 鲁昌辉,朱庆伟,葛广德,等.中西医结合治疗幽门螺杆菌相关性消化性溃疡临床疗效观察.时珍国医国药,2013,24:724-725.

6 喻子良,古丽孜热·毛拉,周静.中西医结合治疗幽门螺杆菌相关性消化性溃疡80例临床疗效观察.中国医药指南,2011,9:416-417.

7 王莹,王秀英,王敏琴,等.幽门螺杆菌感染及非甾体抗炎药致消化性溃疡并出血的相关性研究.中华医院感染学杂志,2011,21:3411-3412.

8 Fortinsky KJ, Bardou M, Barkun AN.Role of medical therapy for nonvariceal upper gastrointestinal bleeding.Gastrointest Endosc Clin N Am,2015,25:463-78.

9 童三香.幽门螺杆菌感染与老年消化性溃疡的相关危险因素调查分析.中华医院感染学杂志,2013,23:2392-2394.

10 刘洪琪,李宪忠,高峰,等.幽门螺杆菌感染与非甾体抗炎药致消化性溃疡并出血的相关性研究.中华医院感染学杂志,2014,24:4283-4284,4287.

11 郭志强.消化性溃疡患者幽门螺杆菌感染与IL-8、IL-10、TNF-α的关系.中国实用医药,2013,8:70-71.

12 谭克文,徐海燕,宋仁,等.消化性溃疡并H．pylori感染初治失败患者血浆Omentin-1水平改变及中西医结合干预治疗.河北医药,2014,36:3241-3244.

13 何卫,吕文家.老年消化性溃疡的危险因素与预防策略.中国老年学杂志,2013,33:418-419.

14 吴春城,杜志毅,谢会忠.非甾体抗炎药和幽门螺杆菌感染与消化性溃疡发病的关系.中国医药,2011,6:1363-1365.

15 任海涛,徐樨巍,李爱华,等.幽门螺杆菌感染患儿血细胞毒素相关性基因A、空泡毒素蛋白、尿毒酶、热休克蛋白60和硝基还原酶的分布及其诊断价值.实用儿科临床杂志,2012,27:1009-1011.

16 张鹤鸣,李菊兰,袁涛,等.老年消化性溃疡96例临床特点.中国老年学杂志,2013,33:1048-4050.

17 吕志发,谢勇.微生态制剂辅助治疗幽门螺杆菌感染的研究进展.中国全科医学,2013,16:2067-2070.

The investigation of expression levels of IL-10, TNF-α of different types of bacteria Helicobacter pylori infection in patients with peptic ulcer

CHENGXiaona,HUYangqian.

DongfengGeneralHospitalAffiliatedtoHubeiMedicineCollege,Hubei,Shiyan442000,China

Objective To investigate the expression levels of IL-10, TNF-α of different types of bacteria Helicobacter pylori (H.pylori)infection in patients with peptic ulcer.Methods The expression levels of IL-10,TNF-α in serum of 100 patients with H.pylori infection peptic ulcer who were treated in our hospital from March 2012 to November 2014,were detected and compared among different types of H.pylori infection groups.Moreover the expression levels of IL-10,TNF-α were compared between H.pylori infection duodenal bulb ulcer group and H.pylori infection gastric ulcer group.Results The expression levels of IL-10 in typeⅠH.pylori infection group were significantly higher than those in H.pylori negative group (P<0.05).However the expression levels of IL-10 in type ⅡH.pylori infection group were slightly higher than those in typeⅠH.pylori infection group,there were no significant differences between two groups (P>0.05). The expression levels of TNF-α in typeⅠH.pylori infection group were significantly higher than those in H.pylori negative group and type Ⅱ H.pylori infection group (P<0.05). There were no significant differences in the expression levels of IL-10 between typeⅠas well as type Ⅱ H.pylori infection duodenal ulcer group and gastric ulcer group (P>0.05). The expression levels of TNF-α in typeⅠH.pylori infection duodenal bulb ulcer group were significantly higher than those in gastric ulcer group (P<0.05),however, there were no significant differences in the expression levels of TNF-α between type Ⅱ H.pylori infection duodenal ulcer group and gastric ulcer group (P>0.05).Conclusion There are significant differences in the expression levels of IL-10,TNF-α among patients with different types of H.pylori infection peptic ulcer,thus,which are valuable in the diagnosis of peptic ulcer in clinic.

Helicobacter pylori infection;peptic ulcer;IL-10;TNF-α

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.08.005

项目来源：湖北省自然科学基金资助项目(编号：2011CDB00704)

442000 湖北省十堰市，湖北医药学院附属东风总医院

胡阳黔，442000 湖北省十堰市，湖北医药学院附属东风总医院；

E-mail：chengxiaona1977@163.com

R 573.1

A

1002-7386(2016)08-1140-03

2015-08-06)