参苓白术散对溃疡性结肠炎患者血浆MMP-2、MMP-9水平的影响

王雪梅

065700　河北省廊坊市第四人民医院康复科



参苓白术散对溃疡性结肠炎患者血浆MMP-2、MMP-9水平的影响

王雪梅

065700河北省廊坊市第四人民医院康复科

【摘要】目的观察参苓白术散对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)患者血浆基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)-2、MMP-9表达水平的影响，探讨参苓白术散治疗UC的可能机制。方法将80例UC患者随机分为对照组及试验组各40例，对照组予以口服美沙拉嗪治疗，试验组联合参苓白术散，1疗程8周。观察治疗前后症状并进行临床疗效评价，采用Mayo评分表对疾病活动度进行评价。检测外周静脉血浆MMP-2、MMP-9，计算乳果糖/甘露醇比值(LMR)。结果试验组总有效率(92.50%)明显优于对照组总有效率(77.50%)(χ2 =6.877，P=0.032)。治疗后两组的Mayo评分均小于治疗前(t=12.584，t=14.641，P均<0.001)，试验组治疗后的Mayo评分小于对照组(t=3.306，P=0.001)。血浆MMP-2、MMP-9水平较治疗前明显降低(P<0.001)；试验组低于对照组(t=3.039，P=0.003；t=4.669，P<0.001)。尿液LMR均小于治疗前(t=8.478，t=10.333，P均<0.001)，试验组治疗后的尿液LMR小于对照组(t=2.834，P=0.006)。结论参苓白术散联合美沙拉嗪治疗UC，可显著改善临床症状，降低Mayo得分；UC患者血浆MMP-2、MMP-9水平下调，肠黏膜通透性的改善，可能是参苓白术散治疗本病的机制之一。

【关键词】参苓白术散；溃疡性结肠炎；基质金属蛋白酶-2；基质金属蛋白酶-9

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是肠道慢性非特异性炎症性疾病，发病率呈逐年升高趋势，病情反复影响着患者的生活质量，然而其病因及发病机制尚未阐明[1]。而细胞外基质的重构已成为UC发病机制的研究热点。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)属于蛋白水解酶，可水解细胞外基质，破坏内皮细胞间的紧密连接，增加血管通透性，加重肠黏膜损伤[2]。有研究表明，血浆MMP-2、MMP-9与UC的肠黏膜通透性密切相关[3]。目前关于参苓白术散对UC患者血浆MMP-2、MMP-9水平的作用尚未见报道。本研究通过观察参苓白术散对UC患者的临床疗效，并检测血浆MMP-2、MMP-9水平的变化，探讨参苓白术散治疗UC的可能机制。

1对象和方法

1.1对象

收集2013年6月至2015年6月本院门诊及住院符合UC患者80例，所有患者均经肠镜检查确诊。UC诊断标准参照中华医学会消化病学分炎症性肠病学组2012年制定的《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》[4]。随机分为对照组40例，男22例，女18例；年龄23～57岁，平均年龄(38.62±9.97)岁；病程0.5～6.9年，平均(4.54±2.15)年；病情程度：轻度10例，中度24例，重度6例；病变范围：直肠9例，左半结肠22例，广泛结肠9例。试验组40例，男24例，女16例；年龄18～61岁，平均年龄(38.87±10.15)岁；病程0.3～7.8年，平均(4.61±2.75)年；病情程度：轻度8例，中度27例，重度5例；病变范围：直肠6例，左半结肠24例，广泛结肠10例。两组患者的性别、年龄、病程、病情分布等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，组间具有可比性。

1.2治疗方法

对照组予以美沙拉嗪(黑龙江天宏药业股份有限公司，生产批号：H20103359)，1.0 g/次，4次/天。试验组在美沙拉嗪治疗基础上，加用参苓白术散(山西华康药业股份有限公司，生产批号：Z14020346)，6.0 g/次，3次/天。两组均连续治疗8周，为1疗程。

1.3疗效的评定

1.3.1临床疗效评定疗效判断标准具体参照文献[5]：临床症状消失，结肠镜复查见黏膜大致正常或无活动性炎性反应记为“缓解”；临床症状基本消失，结肠镜复查见黏膜轻度炎性反应记为“有效”；临床症状、结肠镜复查均无改善记为“无效”。

1.3.2疾病活动度评估采用改良的Mayo评分进行活动度评估[6]：(1)排便次数：正常次数记为0分，比正常增加1～2次记为1分，增加3～4次评2分，增加5次或以上记为3分；(2)便血：无便血记为0分，不到一半时间便中混血记为1分，大部分时间便中混血记为2分，一直存在出血记为3分；(3)内镜发现：正常或无活动性病变记为0分，红斑、血管纹理减少、轻度易脆等轻度病变表现记为1分，有明显红斑、血管纹理缺乏、易脆、糜烂等中度病变记为2分，有自发性出血、溃疡形成等重度病变记为3分；(4)总体评价：正常记为0分，轻度病变记为1分，中度病变记为2分，重度病变记为3分。各分项评分之和为Mayo评分。

1.4检测指标及方法

1.4.1血浆MMP-2、MMP-9表达的检测两组研究对象均于门诊或住院当天清晨在空腹状态下抽取外周静脉血3 mL，EDTA抗凝，室温静置30分钟，3500 rpm，离心10分钟后取上层血浆，置于-80℃冰箱保存待测。严格按照ELISA试剂盒说明书进行操作，酶标仪450 nm波长处测定吸光度，最后通过标准曲线得出研究对象血浆MMP-2及MMP-9的表达水平。

1.4.2尿乳果糖/甘露醇比值(lactulose/mannitol ratio，LMR)测定两组研究对象于测定前1天晚22时起禁食，第2天晨起应于排空膀胱后口服100 mL的L和M混合溶液，30分钟内禁水、2小时内禁食，收集6小时内全部的尿液，中间10 mL加入2%硫柳汞防腐，保存在-80℃冰箱。检测前室温溶化、混匀、高速离心10分钟，上清液加入试剂开始检测。采用HPLC示差法检测尿液中乳果糖(lactulose，L)和甘露醇(mannitol，M)浓度，并计算LMR。

1.5统计学处理

2结果

2.1两组患者治疗前后的临床疗效比较

对照组缓解15例、有效16例、无效9例，总有效率为77.50%；试验组缓解26例、有效11例、无效3例，总有效率为92.50%。两组经卡方检验，差异具有显著统计学意义(χ2=6.877，P<0.05)，可认为参苓白术散治疗UC具有明显的临床疗效。见表1。

表1　两组患者治疗后临床疗效比较(%)

2.2两组患者治疗前后Mayo评分比较

治疗前两组的活动度Mayo评分无统计学意义差异(t=0.143，P=0.887)，治疗后两组的Mayo评分均小于治疗前，差异有统计学意义(t=12.584，t=14.641，P均<0.001)，试验组治疗后的Mayo评分小于对照组，差异有统计学意义(t=3.306，P=0.001)，可认为参苓白术散可显著降低UC活动度。见表2。

表2　两组患者治疗前后的Mayo评分比较±s,分)

2.3两组患者治疗前后血浆MMP-2、MMP-9水平变化

治疗前两组患者血浆MMP-2、MMP-9水平比较，差异无统计学意义(t=-0.443，P=0.659；t=0.085，P=0.933)；治疗后血浆MMP-2、MMP-9水平较治疗前明显降低，差异有统计学意义(P<0.001)；试验组低于对照组，差异有统计学意义(t=3.039，P=0.003；t=4.669，P<0.001)，故认为参苓白术散显著降低UC患者血浆MMP-2、MMP-9水平。见表3。

表3　两组患者治疗前后血浆MMP-2、MMP-9、

注： 与本组治疗前比较，aP<0.001

两组治疗前的尿液LMR无统计学意义差异(t=-0.457，P=0.649)，治疗后LMR均明显减少，差异有统计学意义(t=8.478，t=10.333，P均<0.001)，试验组治疗后的尿液LMR小于对照组，差异有统计学意义(t=2.834，P=0.006)，可认为参苓白术散可显著改善黏膜通透性。见表3。

3讨论

临床上，UC以腹泻、黏液脓血便、腹痛、里急后重为表现特征，属中医“泄泻”“痢疾”“肠澼”范畴，本病主要与感受外邪、饮食不调、劳倦内伤、情志失调等因素相关，导致脾胃虚弱，腑气不运，水谷不化，本虚标实，治宜标本兼治，宜健脾渗湿，益气和中[7]。参苓白术散出自《太平惠民和剂局方》，方中党参、白术、茯苓、甘草健脾益气和中；白术健脾燥湿；炒山药、白扁豆、薏苡仁、莲子可补脾渗湿止泻；陈皮行气止痛，醒脾燥湿和胃；砂仁、陈皮调气行滞。诸药合用温而不燥，补而不腻，起到健脾渗湿、温脾燥湿、益气调中作用。本研究证实UC患者使用参苓白术散联合美沙拉嗪治疗，对临床疗效及评估活动度的Mayo评分均有明显的改善作用，较单用美沙拉嗪效果明显(P<0.05)，且UC患者的腹痛、腹泻、发热及脓血病的缓解时间均显著降低，这与徐纪文[8]、辛群等[9]研究结果一致，且患者Sutherland DAI评分也较单用美沙拉嗪改善明显。

UC病理主要表现为炎症细胞浸润和溃疡形成及细胞外基质成分的破坏。MMPs来源于肠黏膜基质细胞和炎症细胞，是降解细胞外基质的蛋白水解酶，在溃疡的发生和结缔组织的重构中发挥至关重要作用[10]。MMP-2、MMP-9属于明胶酶，主要降解明胶和Ⅳ型胶原。Ⅳ型胶原构成基底膜的主要成分，起着抑制炎症扩散的作用，Ⅳ型胶的破坏导致肠黏膜屏障的破坏、细胞外基质的降解、器官或组织溃疡的发生。研究发现重度活动期UC患者血浆MMP-2、MMP-9水平明显高于中度患者，同时活动期UC患者血浆MMP-2、MMP-9水平与疾病严重程度、病变范围呈相关性。本研究发现，参苓白术散联合美沙拉嗪可明显降低UC患者血浆MMP-2、MMP-9的表达，抑制促炎因子的表达，改善细胞外基质的结构重构。既往研究表明，参苓白术散可显著降低UC患者血清肿瘤坏死因子α，升高白细胞介素4(interleukin-4，IL-4)，同时也可降低辅助性T细胞17分泌的IL-17、IL-23，而这些因子均与肠壁炎症及肠黏膜的损伤密切相关[11]。

肠黏膜屏障的破坏在UC发病中起重要作用，当屏障功能受损伤，导致黏膜通透性增高，促进肠道细菌、内毒素进入血循环，诱导炎症介质释放，进一步使肠黏膜损伤，通透性增高，因此提高肠黏膜屏障功能也是治疗UC的重要手段。顾鉴秋等[12]研究发现，肠炎清口服液可改善小鼠UC肠道黏膜通透性，从而起到治疗效果。

综上，参苓白术散联合美沙拉嗪可明显改善UC患者的临床症状，提高Mayo评分，降低血浆MMP-2、MMP-9的表达，改善肠道黏膜通透性，具体机制还有待进一步深入研究。

参考文献

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[9]辛群，孙擎，葛现才，等.参苓白术散与美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者血清IL-17、IL-23及TNF-α水平的影响[J].现代生物医学进展，2015，15(9)：1663-1665，1670.

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(本文编辑： 董历华)

·论著·

Effects ofShenlingBaizhuPowder on serum MMP-2、 MMP-9 in patients with ulcerative colitis

WANGXue-mei.

DepartmentofRehabilitationtheFourthPeople’sHospitalofLangfang,Langfang065700,China

【Abstract】ObjectiveTo explore the treatment mechanism of Shenling Baizhu Powder on patients with ulcerative colitis(UC)by observing the plasma matrix metalloproteinases(MMPs) level before and after the treatment. Methods80 patients with UC were randomly divided into control group and experimental group, 40 patients in each group. Patients in the control group were given mesalazine and experimental group were given Shenling Baizhu Powder combined with mesalazine for 8 weeks. Before and after treatment, improvement of clinical symptoms was observed, and the disease activity was scored by Mayo. The blood samples of patients were collected and the plasma MMP-2、 MMP-9 were measured and the ratio of lactulose/mannitol was calculated. ResultThe total effective rate in the experimental group was 92.50%, superior to 77.50% in control group (χ2 =6.877，P=0.032). Mayo score after treatment in both groups was lower than that before treatment(t=12.584, t=14.641, P<0.001). Mayo score in the experimental group was lower than that in the control group (t=3.306，P=0.001) after treatment. The plasma levels of MMP-2、 MMP-9 were obviously decreased after treatment(P<0.001). The level was lower in the experimental group compared with the control group(t=3.039，P=0.003；t=4.669，P<0.001). The lactulose/mannitol ratio of both groups was decreased after treatment(t=8.478，t=10.333，P<0.001), and that in the experimental group was significantly lower than in the control group after treatment (t=2.834，P=0.006). ConclusionShenling Baizhu Powder combined with mesalazine shows significant efficacy in improving the clinical symptoms and decreasing Mayo scores in patients with UC; Shenling Baizhu Powder can decrease the plasma levels of MMP-2,MMP-9, improve the permeability of intestinal mucosa, which may be one of the effective mechanisms in treating this disease.

【Key words】Shenling Baizhu Powder；Ulcerative colitis；Matrix metalloproteinase-2；Matrix metalloproteinase-9

(收稿日期：2015-11-25)

Corresponding author:WANG Xue-mei, E-mail： fengxfxsof@sina.com

【中图分类号】R285.6

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1674-1749.2016.04.004

作者简介：王雪梅(1977- )，女，本科，主治中医师。研究方向：中医内科。E-mail：fengxfxsof@sina.com