羊链球菌的分离鉴定及药敏试验*

王新民，晁旭东，韩猛立*，蒲新竹，赵万军，张 宾

（1.新疆生产建设兵团第十师一八一团，新疆 阿勒泰836001；2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所）

羊链球菌的分离鉴定及药敏试验*

王新民1，晁旭东1，韩猛立2*，蒲新竹1，赵万军1，张 宾2

（1.新疆生产建设兵团第十师一八一团，新疆 阿勒泰836001；2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所）

对开春以来一八一团部分养殖合作社出现的以咳嗽、流鼻涕等为主要症状的羔羊进行诊断，经过病原学、致病性、药敏试验等确定为链球菌感染，采用敏感药物进行针对性治疗后，有效控制了该病的发生和蔓延，效果明显。

羔羊腹泻；病原分离；链球菌

兵团第十师北屯市结合兵团农业现代化发展的布局与思路，及时调整农牧业发展方向，突出了“稳定强化农业，重点发展牧业，调整改革渔业”的发展思路，大力发展农场农区畜牧业，优化产业结构和资源配置，使大农业向种植业、畜牧业、渔业三业并举的格局发展。大力实施小畜换大畜工程，从而有效地带动了团场良种羊饲养的发展。

一八一团拥有山区草场面积4.47万hm2，主要分布：垦区内0.47万hm2，阿勒泰山区的齐背岭、干海子、别克多克夏草场2.17万hm2，沙吾尔山冬草场

0.40万hm2，牧场北戈壁0.99万hm2，夹山子春秋草场0.94万hm2。优良丰富的草地资源为一八一团大力发展畜牧业提供了得天独厚的自然资源和重要的物质基础。2014年一八一团提出畜牧业发展的总体思路和布局，通过积极推进人畜分离，大力发展家庭牧场和培育养殖大户，形成养殖大户-养殖小区-养殖基地相连的产业发展格局。通过能人牵头，大户带动，职工以入股、托养、寄养等多种方式参与，以点带面，示范带动，加快畜牧业向规模化、集约化方向发展。截至2015年底，一八一团从事畜牧养殖的共有436户，全团现有各类牲畜存栏7.7万头（只）。其中，羊存栏6.50万只，牛存栏0.45万头，生猪存栏0.75万头。

近年来羊肉市场呈现波动式发展，由前几年的持续高位到2015年的低谷，给从事养羊的养殖户带来了巨大的经济损失和心里压力。但是市场上优质羊肉价格依然处于高位且畅销，许多养殖户看到了机遇，随即对自己的羊群进行杂交改良，通过降低养殖数量，提高养殖品质，来确保养殖效益，间接的减轻了草场压力，有利于环境保护和草场资源的循环利用。

2016年3～6月，阿勒泰地区持续低温，且雨水较多，草原没有恢复，难以放牧，使得原本每年4月份开始的转场难以进行，羊群大多集中在连队周围的开阔地或戈壁滩上，部分养殖户的羊群出现疫病，且发病率和死亡率均较高，给养殖户造成了很大的经济损失。

经团兽医站与在一八一团开展科技服务的专家联合诊断，确诊为羊链球菌病，现将情况报告如下。

1 基本情况

一八一团某养殖大户共计饲羊600余只，其中小尾寒羊100余只，当地阿勒泰羊300余只，肉用细毛羊50余只，阿寒杂交羊150余只混群放牧，白天主要在连队周围放牧，夜晚赶回圈舍，2016年4月下旬羊群突然发病，并逐渐增多，到笔者受邀前往诊治时，已发病118只，约占全群的20.00%左右，死亡23只，死亡率为19.00%。

2 临床症状

随机选择10只发病羊测量体温，温度介于40.8～41.7℃之间；部分羊只表现出精神不佳、步态不稳、食欲不振、反刍停止，喜卧，不愿运动；偶见后驱瘫痪羊只；观察可见部分羊眼睛潮红、出血；有流脓性和清鼻液，口角处可见混有泡沫的唾液；选择病情较为严重的羊只触摸可见咽喉部肿胀、颌下淋巴结水肿，呼吸缓急；圈内可见不成型粪便，偶见褐色血粪。病程长短不一，一般3～5 d，部分羊只临死前出现抽搐、磨牙等神经症状。

3 剖检变化

选择临近死亡的病死羊5只进行现场剖解，其中有3只出现尸僵不全。可见主要脏器呈现广泛性出血，淋巴结水肿出血；肺脏有脓性分泌物渗出、出血和肝变区，心胞积液；腹腔积液，胆囊充盈，肝脏肿大，边缘可见出血点，脾脏钝圆有出血点；真胃粘膜易剥离，有溃疡，内容物有成团状的塑料薄膜。

另随即采集同群羊抗凝全血20份，带回实验室检测。

4 实验室诊断

4.1 病料采集

无菌采集心包液、肺脏、肝脏、脾脏、淋巴、胸腔积液等病变器官和组织[1-3]，带回实验室。

4.2 染色镜检

将无菌采集的病料抹片后经革兰氏染色，镜检可见视野里呈现蓝紫色、圆形或卵圆形、成双或短链状排列，偶见杆菌出现；肝、脾病料中可见病原菌有荚膜。

采集的20份血液中有14份可见附红细胞体存在，8份血液检出焦虫。

4.3 分离培养

将病料分别在普通琼脂平板、5%绵羊血琼脂平板、营养肉汤和脑心浸液培养基37℃培养18～32 h，挑取单个菌落做纯培养，同时进行革兰氏染色，观察其形态和培养特性[4-5]。

结果显示，该菌在普通培养基上生长不良或不生长，需要添加血清、血液、葡萄糖等营养物质；在血平板上可见小于1.0 mm、灰白色、β溶血、表面光滑、边缘整齐的菌落。经革兰氏染色镜检可见视野里呈现革兰氏阳性球菌，多数成对存在，少数呈短链状排列。液体培养中染色呈现革兰氏阳性链状排列的球菌。

4.4 生化鉴定

对分离的菌株纯培养后保存，后委托新疆农垦科学院畜牧兽医研究所经全自动微生物鉴定系统（VITEK2 Compact）鉴定为链球菌。

5 药敏试验

药敏纸片购自杭州滨河微生物试剂有限公司，按照说明书进行操作。结果显示，链球菌对氟苯尼考、头孢噻肟、左氟沙星、环丙沙星敏感，其余20余种药物为中敏或耐药。

6 治疗

（1）对发病羊只及时隔离治疗。应用敏感药物氟苯尼考治疗，每日2次，连用5 d；（2）针对血液中检出附红细胞体和焦虫这一病情，建议应用长效针剂土霉素注射预防该病[6]；（3）同时在饮水中添加复合多维以增强动物机体抵抗力；（4）建议应用羊链球菌氢氧化铝甲醛灭活苗，2～3倍剂量皮下注射[7]，来年注意提前采取预防措施。通过采取以上措施，4 d后再无新病例出现，1周后羊群恢复正常。

7 小结与讨论

本病发生没有明显的季节性，且一八一团所在的阿勒泰地区属于羊链球菌病的高发地区，同时2016年开春以来气温低、雨水多，青绿饲料缺乏，导致动物抵抗力下降而发病。建议今后要做好羊舍的消毒和管理，添加维生素或牛羊用舔舐砖，做好免疫接种工作，也是控制本病的有效手段。有条件的地区，可以结合本地分离株，筛选出疫苗候选菌株，制作自家灭活疫苗预防本病，会达到良好的控制效果。

[1]陆承平.兽医微生物学（第四版）[M].北京：中国农业出版社，2007.

[2]陈溥言.兽医传染病学（第五版）[M].北京：中国农业出版社，2006.

[3]姚火春.兽医微生物学实验指导（第二版）[M].北京：中国农业出版社，2007.

[4]李健强，李六金.兽医微生物学实验指导[M].陕西：陕西科学技术出版社，1999.

[5]李素健，赵万军，韩猛立，等.小尾寒羊链球菌病的诊断与治疗[J].新疆农垦科技，2015，38（5）：26-27.

[6]赵万军，蒲新竹，韩猛立，等.一八一团育肥羊常见多发病调查与防治[J].新疆农垦科技，2015，38（6）：36-36.

[7]赵万军，胡鹏，蒲新竹，等.绵羊链球菌病的诊断与防治[J].甘肃畜牧兽医，2015，45（6）：50，52.

2016—07—28

新疆农垦科学院院引导计划（72YYD201409）、兵团现代农业科技攻关与成果转化计划（2016AC018）。

*通讯作者：韩猛立（1980-），男，助理研究员，从事动物传染病的诊断与防治研究。E-mail：hanmenglimm@163.com。