葛根解酒胶囊对小鼠急性酒精中毒的预防及治疗作用

严桥路　尹雪艳　徐立

(1.大理大学临床医学院，云南 大理　671000；

2.大理大学基础医学院，云南 大理　671000)



葛根解酒胶囊对小鼠急性酒精中毒的预防及治疗作用

严桥路1尹雪艳1徐立2△

(1.大理大学临床医学院，云南 大理671000；

2.大理大学基础医学院，云南 大理671000)

摘要目的：探讨葛根解酒胶囊对急性酒精中毒小鼠的预防及治疗作用。方法：“跳楼试验”：选昆明小鼠30只，随机分为三组，每组10只，对照组：给予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；药物治疗组：给予浓度为12 mg·ml(-1)的葛根解酒胶囊溶液0.2 ml·10g(-1)灌胃，1 h后各只给予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；非药物治疗组：给予生理盐水0.2 ml·10g(-1)灌胃，1 h后各只给予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；10 min后将小鼠放到单杆上，观察并记录小鼠在单杆上停留的时间。水迷宫试验：经过水迷宫训练的昆明小鼠30只，随机分为3组，对照组：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，20 min之后投入水迷宫；药物治疗组：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，10 min后浓度为12 mg·ml(-1)葛根解酒胶囊溶液0.2 ml·10g(-1)腹腔注射，再过10 min后把小鼠投入水迷宫；非药物治疗组：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，10 min后生理盐水0.2 ml·10g(-1)，腹腔注射，再过10 min后把小鼠投入水迷宫，记录小鼠投入水迷宫后能否找到并爬上平台的只数，并记录其平均游泳速度。结果：药物治疗组维持平衡时间(266.9 ± 52.4 s)明显长于非药物治疗组(173.5 ± 74.1 s)和对照(155.8 ± 54.8 s)(P < 0.01)；葛根解酒胶囊能够促进小鼠找到平台(P<0.05)，药物治疗组小鼠的游泳速度(17.2± 9.4 cm·s(-1))比非药物治疗组(8.02± 4.8 cm·s(-1))及对照组(7.01±4.1 cm·s(-1))快(P<0.05)。结论：葛根解酒胶囊对急性酒精中毒有一定预防及治疗作用。

关键词：葛根解酒胶囊；急性酒精；预防及治疗作用

目前，我国对葛根资源的应用主要体现在以下几个方面：除在影响酒精吸收代谢、抗氧化、保肝及保护中枢神经系统、心血管疾病方面，还作为中药入药，作为蔬菜食用，干燥葛根中提取的异黄酮类化合物制造的药物制剂，以及从鲜葛中提取淀粉。此外，葛根的开发产品还有葛根解酒酸奶、葛根口香糖、葛根果冻、葛根功能饮料等，但暂未形成规模。由此可看出，对于葛根资源的开发利用还处于初级阶段，没有形成系列产品，经济效益较低；另制药和淀粉生产过程相互分离，对葛叶、葛茎开发少等。这都造成了葛根资源在一定程度上的浪费[1-3]。

随着生活水平的日益提高，酒精滥用和酒精成瘾的人群日益增多，酒精滥用是一个公共健康问题已经引起社会广泛关注。因大量饮酒导致急性或者慢性肝损伤[4]，导致各种神经精神性脑病，如酒精中毒性脑病等。这些问题严重影响了人们的身体健康和生活水平。本研究目的是为了探讨葛根解酒胶囊对于急性酒精中毒小鼠的预防及治疗作用。为把葛根的解酒疗效更好的应用于临床提供基本数据和依据。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1药品与试剂

浓度为12 mg·ml-1的葛根解酒胶囊溶液(其成分为葛根提取物、蒸馏水，由大理大学院药物与化学学院提供)，实验用酒(茅粮小清香型白酒酒精度50%vol DB53/T092)。Morris水迷宫视频跟踪分析系统，(成都秦盟科技有限公司)。

1.1.2动物

昆明小鼠，雄性，体重18-22 g，由大理大学实验动物中心提供。

1.2方法

1.2.1建立模型

选昆明小鼠30只，通过预实验结果，选取0.2 ml·10g-1，作为醉酒实验剂量，进行模型建立。根据相关葛根素药代谢动力学相关数据，小鼠静脉注射葛根素的LD50是738 mg·kg-1，静脉注射葛根素期药代动力学过程符合开放二室模式，t1/2α=10.3 min，t1/2β=74 min，平均滞留时间为74 min[5]，将葛根解酒胶囊溶液配成浓度为12 mg·ml-1的溶液，给药剂量定为0.2 ml·10g-1。

1.2.2小鼠“跳楼试验”

另选昆明小鼠30只，随机分为三组，每组10只：对照组：给予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，药物治疗组：给予浓度为12 mg·ml-1的葛根解酒胶囊溶液0.2 ml·10g-1灌胃，1 h后各只给予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，非药物治疗组：给予生理盐水0.2 ml·10g-1灌胃，1 h后各只给予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后将小鼠放到单杆上，观察并记录小鼠在单杆上停留的时间。

1.2.3小鼠Morris水迷宫实验(定位航行实验)

再另选昆明小鼠30只，进行水迷宫训练，记录小鼠投入水迷宫后找到并爬上平台(四肢均爬上平台且停留时间>5 s)的时间，此为定向实验逃避潜伏期。以此来评价空间学习和记忆巩固能力,每次观察时间为120 s如果在120 s内未能找到平台，则由实验者引导至平台，潜伏期记为120 s。每天训练四次，训练逃避潜伏期的平均数作为当天的成绩进行统计。连续训练5天，每天时间相同，分别从四个象限投入。第6天把小鼠随机分为3组：对照组：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，20 min之后投入水迷宫；药物治疗组：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后浓度为12 mg·ml-1葛根解酒胶囊溶液0.2 ml·10g-1腹腔注射，再过10 min后把小鼠投入水迷宫；非药物治疗组：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后生理盐水0.2 ml·10g-1，腹腔注射，再过10 min后把小鼠投入水迷宫，记录小鼠投入水迷宫后能否找到并爬上平台(四肢均爬上平台且停留时间>5s)的只数，并记录其平均游泳速度。

1.3统计学处理

2结果

2.1“跳楼试验”

葛根解酒胶囊对非药物治疗组、对照组、药物治疗组小鼠平衡调节的影响，出现平衡失调现象的平均时间见表1，结果提示，葛根解酒胶囊能够增加酒精中毒小鼠停留在单杠上的平衡时间(P<0.01)。

表1　“跳楼实验”葛根解酒胶囊对小鼠平衡时间的影响(X±SD，n=10)

注：与非药物治疗组比较，*P < 0.01。

2.2Morris水迷宫实验(定位航行实验)

葛根解酒胶囊对非药物治疗组、对照组、药物治疗组小鼠空间定向的影响结果见表2。从表2可看出，药物治疗组小鼠的游泳速度比非药物治疗组和对照组快(P<0.05)，非药物治疗组与对照组的比较没有统计学意义。实验结果提示，葛根解酒胶囊能够增加酒精中毒小鼠的游泳速度。从小鼠找到平台的只数的百分比来看，葛根解酒胶囊能增加小鼠找到平台的数量(P<0.05)。

表2　小鼠找到平台只数及游泳速度(n=10)

注：与非药物治疗组比较，*P < 0.05。

3讨论

葛根异名甘葛、粉葛，为豆科植物葛(野葛)Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根，习称“柴葛”。葛根含有多种有效成分，主要为黄酮类化合物达12%：大豆甙元、大豆甙及葛根素等[6]。葛根作为中国传统医学中最具代表性的解酒药物之一，具有解酒防醉、改善心脑血管循环、降低心肌耗氧量，降低血糖、血脂，防止高血压及动脉硬化，抗肝脏毒，抗炎，祛痰，解热，提高机体免疫力，抗菌，抗肿瘤作用抗病毒等多种药理作用[7-10]。可见，葛根用途广泛，对各个系统疾病都要一定的治疗、改善作用，其临床实用价值研究意义深远。

有关葛根解酒作用的药理研究主要是：抑制酒精自主摄入、增加乙醇耐受 、降低血液乙醇浓度、影响酒精代谢，葛根通过对抗乙醇代谢中起主要作用的乙醇脱氢酶活性减低的作用，有利于乙醇在体内的分解代谢，从而可以解酒毒。对中枢神经系统的保护作用对中枢神经系统兴奋与抑制过程的影响也是解酒的重要途径之一[11]。

本实验用酒精度为50%vol茅粮小清香型白酒复制小鼠急性酒精中毒的模型，白酒灌胃致小鼠急性酒精中毒时，明显地抑制中枢神经系统，全部醉倒。有研究证明酒精中毒可造成肝脏损伤[12]。急性酒精中毒是由于血液中的过高浓度的乙醇短时间内大量进入脑内，通过边缘系统、小脑、网状结构到延髓，抑制中枢神经系统，出现昏睡、平衡失调等相应的临床症状，同时还可能损害心肌、影响代谢、肝功能等[13]。有研究表明葛根素对饮酒后小鼠体内氧化反应有明显的拮抗作用[14]，葛根素可减少嗜酒大鼠的酒精摄入量，改善酒精中毒神经系统症状作用[ 15]。Morris水迷宫法是目前广泛用于研究动物学习、记忆、空间定向和认知能力的理想方法[16]。“跳楼实验”是研究酒精中毒对小鼠平衡失调的影响。实验结果发现，葛根解酒胶囊对急性酒精中的小鼠平衡失调有一定的改善作用，Morris水迷宫定位航行实验测试结果提示葛根解酒胶囊对急性酒精中毒小鼠空间定向能力有一定改善作用。综上所述，葛根解酒胶囊对急性酒精中毒致小鼠平衡失调、空间定向能力有一定改善作用。急性酒精中毒、酒精依赖是当今社会问题之一，特别是因酒精中毒引起的慢性器官功能损伤缺乏有效的治疗方法。中医药是我国医学的一项长处, 研究这些中草药的有效成分用于治疗各系统疾病是很有希望的。葛根有效成分提取技术日益成熟。用于治疗酒精中毒具有明显的优越性及广阔的发展前途。本实验由于样本量过少，在进行水迷宫实验中找到平台小鼠数量无法进行统计学分析，只能通过百分比进行粗略比较，为大量本研究提供一定的依据。

参考文献

1张蓉蓉,吴大正. 野葛解酒机制的研究进展[J]. 上海中医药大学学报, 2007, 21(2): 80-83.

2潘亮亮,钟凌云. 葛根饮片及提取物质量评价研究进展[J]. 中华中医药杂志, 2013, 28(2): 471-473.

3Wei Song, Yanjiao Li, Xue, Qiao Yi, et al. Chemistry of the chinese herbal medicine puerariae radix(Ge-Gen): a review[J]. Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences, 2014, 23(6): 347-360.

4Zhao M, Du YQ, Yuan L, et al. Protective effect of puerarin on acute alcoholic liver injury[J]. Am J Chin Med, 2010, 38(2): 241-249.

5杨秀伟,郝美荣. 中药成分代谢分析[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2003, 577-584.

6丁安伟,黄耀洲. 名贵中药谱[M]. 江苏: 江苏科学技术出版, 1998, 21-25.

7朱振元,薛婧,刘晓翠,等. 葛根素及葛根异黄酮对小鼠急性醉酒预防和解酒效果的研究[J]. 食品科学营养卫生, 2014, 35(15): 247-250.

8杨培树,张娜. 葛根素的药理研究[J]. 天津药学, 2012, 24(5): 75-76.

9伟唯,江培. 葛根素药理作用研究进展[J]. 黑龙江医药, 2014, 27(1): 51-54.

10程博琳,苗明三. 葛根现代研究及应用特点分析[J]. 中医学报, 2014, 29(7): 1014-1015.

11王恒禹,刘玥,沈孝坤,等. 葛根的解酒作用及应用[J]. 中国医疗前沿, 2012, 7(20): 7-9.

12Hines IN, Wheeler MD. Recent advances in alcoholic liver disease III. Role of the innate immune response in alcoholic hepatitis[J]. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol, 2004, 287(2): 310-314.

13徐麦玲. 实用内科学[M]. 北京: 人民卫生出版社, 2013, 820-821.

14宋浩亮,陈士林,黄梦雨,等. 葛根素对酒醉小鼠行为学及抗氧化作用的研究[J]. 现代中药研究与实践, 2003, 17(3): 36-38.

15Overstreet DH, Keung WM, Rezvani AH, et al. Herbal remedies for alcoholism: promises and possible pitfalls[J]. Alcohol Clin Exp Res, 2003, 27(2): 177-185.

16王帮华,陈红光,赵骥,等. 利脉胶囊对小鼠学习记忆的影响[J]. 咸宁学院学报(医学版), 2008, 22(4): 279-281.

Prevention and treatment effects of puerariae anti-inebriation capsule on acute alcohol intoxication mice

Yan Qiao-lu1, Yin Xue-yan1, Xu Li2△

(1.Clinical College, Dali University, Yunnan Dali 671000;2.Pre-Clinical College, Dali University, Yunnan Dali 671000)

AbstractObjective：To study the prevention and treatment effects of puerariae anti-inebriation capsule on mice with acute alcohol intoxication. Methods: Jump experiment: Thirty Kunming mice were randomly divided into three groups(n=10). Control group: each mouse was given 50% alcohol by intragastric administration(dosage, 0.2 ml·10g-1). Drug-treatment group: each mouse was fed with the solution of puerariae anti-inebriation capsule (concentration, 12 mg·ml-1, dosage, 0.2 ml·10g-1), then with 50% alcohol (dosage, 0.2ml·10g-1) after one hour by the way of intragastric administration. Non-drug treatment group: all mice were given normal saline (dosage, 0.2ml·10g-1), one hour later, fed with 50% alcohol (dosage, 0.2ml·10g-1) through the way as before. When finishing conductions of each group respectively, mice were put on a single pole after ten minutes, to observe the length of time the mice stay on the pole. Morris water maze experiment: Another thirty Kunming mice which have been trained with Morris water maze experiment were randomly divided into three groups (n=10). Control group: 50% alcohol (dosage, 0.2 ml·10g-1) was given to each mouse in this group by intragastric administration. Then the mice were launched to Morris water maze after twenty minutes. Drug-treatment group: first, all mice which were divided into this group were received 50% alcohol (dosage, 0.2 ml·10g-1) by intragastric administration. Second, they were treated with the solution of puerariae anti-inebriation capsule (concentration, 12 mg·ml-1, dosage, 0.2 ml·10g-1) by intraperitoneal injection ten minutes later. Third, they were launched to Morris water maze after another ten minutes. Non-drug treatment group: In this group, the mice were treated as the same way as drug-treatment group excepting the second step. At the second step, the mice of non-drug treatment group were only given normal saline (dosage, 0.2 ml·10g-1) by intraperitoneal injection ten minutes after the first step. In this experiment, we need to observe whether the mice could find and climb the platform or not, and the number of mice which successfully climb the platform, as well as the average speed of swimming. Results: In jump experiment, the time of staying balance of drug-treatment group (average time, 266.9±52.4 s) was obviously longer than non-drug treatment group (average time, 173.5±74.1 s) and control group (average time, 155.8±54.8 s) (P<0.01). In Morris water maze experiment, the number of mice which could find and climb the platform were significantly increased in drug-treatment group, as compared to control group. The average speed of swimming of drug-treatment (average speed, 17.2±9.4 cm·s-1) was faster than non-drug treatment group (average speed, 8.02±4.8 cm·s-1) and control group (average speed, 7.01±4.8 cm·s-1) (P<0.05). Conclusion: Puerariae anti-inebriation capsule has the prevention and treatment effect on acute alcohol intoxication to a certain degree.

Key Words:Puerariae anti-inebriation; Acute alcoholism; Prevention therapeutic action

(收稿日期：2015-11-19)

作者简介：严桥路，男，住院医师，研究生，Email：490549939@qq.com。△通讯作者：徐立，男，副教授，主要从事葛根对酒精中毒的防治研究，Email：dalixuli@163.com。