LJ滴丸质量标准研究

2016-04-11刘雨生

生物技术世界 2016年3期

关键词：冰醋酸液相色谱仪滴丸

刘雨生

（通辽职业学院内蒙古通辽 028000）

LJ滴丸质量标准研究

刘雨生

（通辽职业学院内蒙古通辽 028000）

以LXSB为研究对象对LJ滴丸进行质量控制。方法采用高效液相法。检测波长为260nm。结果表明在0.102-1.02ug范围内，进样量与色谱法峰面积值有良好的线性关系，A=3×106C -5353.3，r =0.9999。平均回收率99.55%。重复进样相对标准偏差RSD=0.86%。本法准确可靠，能满足质量控制的要求。

LJ滴丸 HPLC法质量标准

1 试验资料

1.1 仪器与设备

岛津LC-10AT 高效液相色谱仪,SPD-10A VP UV-VIS 检测器,Class VP 化学工作站（日本岛津公司）；

CP124S电子分析天平,BP211D电子分析天平（SARTORIUS,德国）；

岛津UV2450紫外分光光度计（日本岛津公司）；

ZBS-6G 型智能崩解试验（天津大学无线电厂）；

WD-A型药物稳定性检查仪（天津大学无线电厂）；

KQ-250DB数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；

101A-E电热鼓风干燥箱（上海实验仪器厂）；

SHB-Ⅲ型循环水式真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；

色谱柱：Diamonsil C18 柱（5μm,250×4.6mm,Dikma Technologies）。

1.2 试剂

乙腈（色谱纯,美国Dima公司）；水为重蒸水；三氯甲烷：北京化工厂；甲醇：北京化工厂；乙酸乙酯：北京化学试剂公司；硫酸：北京化工厂；无水乙醇：北京化工厂；冰乙酸：北京化工厂；以上试药均为分析纯。硅胶H（化学纯,青岛海洋化工有限公司）。

1.3 对照品

LXSB对照品：中国药品生物制品检定所提供。

剑叶L素C对照品（供鉴别用）：中国药品生物制品检定所提供。

LJ对照药材。

1.4 LJ滴丸

由本单位制剂室提供。

LJ阴性滴丸：由本单位制剂室提供。

2 实验与结果

2.1 专属性试验

色谱柱：Diamonsil C18 柱（5μm,250×4.6mm,Dikma Technologies）,流动相：冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（61：39）,检测波长：260nm,柱温：30℃,流速：1.0ml/min。

对照品溶液的配制：精密称取LXSB对照品10.20mg,置10ml量瓶中,加入冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（61：39）溶解至刻度,摇匀,作为母液。然后吸取5ml母液至10ml量瓶中,再加入冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（61：39）溶解至刻度,摇匀,用微孔滤膜滤过,取续滤液作为对照品溶液。

供试品溶液的配制：取本品适量,捣碎,取约1.5g,精密称定,置于25ml量瓶中,加冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（1：1）混合溶液20ml,超声20分钟溶解,放冷,再加冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（1：1）混合溶液至刻度,摇匀,取上清液用微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。

取LXSB对照品溶液,精密吸取对照品溶液10μl,注入液相色谱仪。

保留时间Rt=29.781min,理论塔板数N=16545.00

精密称取LJ滴丸细粉（批号070319）1.5109g,按含量测定项下方法制备供试品溶液,精密吸取供试品溶液10μl,注入液相色谱仪。

保留时间Rt=30.025min,理论塔板数N =17874.14

精密称取LJ滴丸阴性样品细粉1.5324g,置于锥形瓶中,以下操作同LJ滴丸。

阴性样品在与对照品和供试品相对应的位置上无吸收峰。上述试验表明该法的专属性良好。

2.2 耐用性试验

考察流动相比例、流速、柱温的轻微变动,对分离度等结果的影响。色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 柱（5μm,250×4.6mm, Dikma Technologies）,流动相：冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（61：39）,检测波长：260nm,柱温：30℃,流速：1.0ml/min。结论：在测定条件下,流动相、流速和柱温的轻微变动对试验结果影响不大,系统耐用性良好,其中流动相比例影响较大。

2.3 定量限考察

为保证含量测定的准确,须确定供试品中被测物能被定量测定的最低量。采用信噪比法,当信噪比为10∶1,则此时对照品的浓度即为定量限。测定结果为：定量限25.5ng/ml。

2.4 线性范围

取LXSB对照品溶液（0.102mg/ml）,分别精密吸取该对照品溶液1μl、2μl、4μl、6μl、8μl、10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面积,结果见表2-4。以峰面积值（A）对浓度（C）进行线性回归,得回归方程,A=3×106C -5353.3, r=0.9999。

结果表明,在0.102～1.02 μg范围内,进样浓度与峰面积值有良好的线性关系。

2. 5 精密度试验

精密量取LXSB对照品溶液（0.051mg/ml）10μl注入液相色谱仪,重复进样6次测定,记录色谱图,计算相对标准偏差。结果表明,本法的精密度良好。

2. 6 重现性试验

按含量测定项下方法,对同一批样品（批号070319）6份进行测定,求得相对标准偏差。结果表明,本法的重现性良好。

2. 7 稳定性试验

精密吸取同一供试品（批号070319）溶液,分别于0、2、4、6、8、12小时进样,依法测定,结果表明,供试品溶液在12小时内稳定。

2. 8 回收率试验

以回收率（%）来表示,回收率应在95.0%～105.0%之间。采用加样回收法试验,取己知LXSB含量的本品（批号：070319,含LXSB 1. 1145mg/g ）,共取6份,置25 ml的量瓶中,分别精密加入LXSB对照品溶液（0.51 mg/ml）2.5 ml,挥干溶剂后,分别加冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（1：1）混合溶液20ml溶解,超声20min,放冷,加冰醋酸溶液（1→90）-乙腈（1：1）混合溶液至刻度,摇匀,取上清液用微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。并按含量测定方法进行测定,计算回收率。试验结果表明,该法的准确度较好。