兔李斯特氏菌病的检疫

寇 玉

（辽宁省鞍山市岫岩县动物卫生监督管理局洋河镇动物卫生监督所，辽宁鞍山 114300）

兔李斯特氏菌病的检疫

寇 玉

（辽宁省鞍山市岫岩县动物卫生监督管理局洋河镇动物卫生监督所，辽宁鞍山 114300）

李斯特氏菌病或称李氏杆菌病，是一种散发性传染病，以全身血液中毒-败血症和子宫炎及流产为特征。本病的病原为单核细胞增多性李氏杆菌（或单核细菌增多性李斯特氏菌、产单核细胞李氏杆菌）。

兔；李斯特氏菌病；检疫

1 疾病概况

本菌微嗜氧，在含5～10%二氧化碳的低氧环境内生长较好。在22℃与37℃中生长同样良好，4℃也能缓慢生长，故可冷增菌。普通培养基均可生长，如加入少许葡萄糖、血液、血清或肝浸液则生长更好。家兔、豚鼠、小鼠对本菌都很敏感，注射、滴眼都可引起感染。病兔出现特殊神经症状，孕兔流产、血液中单核细胞增多，剖检一般没有特殊肉眼变化。当病兔出现特殊神经症状，孕兔流产、血液中单核细胞增多时，可作为诊断的参考。确诊必须作细菌学诊断。

2 流行病学

本病的易感动物很广泛，常为散发性，偶尔呈地方性流行，不广泛传播，发病率较低，但死亡率很高。本菌由患病动物的粪、尿、乳汁、精液排出，也可由眼、鼻、生殖道分泌物分离到本菌。啮齿动物特别是鼠类是本菌的贮存宿主。传染途径很可能是消化道、呼吸道、眼结膜或皮肤伤口。食入污染本菌的饲料和饮水可引发本病。患病动物和带菌动物是本病的传染源。

3 活体检疫

出现明显症状者较少，多不出现症状而急性死亡。幼兔多呈急性败血症。有的表现精神委顿，独蹲一隅，不愿走动。有的则出现痉挛，口流白沫；神志不清。神经症状呈间歇发作，发作时无目的地向前冲撞，或转圈运动。持续时间和间歇时间不一。最后倒地，头后仰，抽搐，以至衰竭死亡。妊娠兔患病时，在妊娠后期出现化脓性子宫内膜炎、腹膜炎，引起流产。

4 病理学检疫

全身淤血，皮下结缔组织呈胶陈样，皮下淋巴结肿大。腹水量增加，浑浊。肝脏实质有界限不清的坏死灶，血液和组织中单核细胞增多。表现败血症的病兔，剖检时见有败血症变化。流产母兔可见到子宫内膜充血，以至广泛坏死。有神经症状的病兔，脑膜和脑可能见到充血、炎症或水肿变化，脑干变软，有细小脓灶，血管周围有单核细胞浸润。

5 病原学检疫

（1）病料采集。采集血、肝、脾、肾、脑脊髓液、脑的病变组织，对出现流产及子宫炎症状的患兔，应采集子宫内分泌物。作触片或涂片，革兰氏染色镜检。

（2）显微镜镜检。单核细胞增多性李氏杆菌为一种细长的小球杆菌，一般长约1～3μm，宽约0.5μm，无芽孢，无荚膜。有鞭毛，能运动，但在22℃培养的细菌，出现倒伞型生长。在涂片中，或单个散在，或排成“V”形，或相互并列呈栅状，有时呈短链（液体培养）或丝状（固体培养）。幼龄培养菌革兰氏染色阳性，老龄培养菌常呈革兰氏阴性。

（3）细菌分离培养。新鲜无污染病料接种血液或血清培养基，2%葡萄糖和2～3%甘油肝浸液培养基；回盲部内容物先用CRT增菌液增菌（或先用LB1增菌液30℃增菌24h后，再用LB2增菌）后，再接种固体培养基分离细菌；污染病料接种于亚碲酸钾血液培养基，然后挑取可疑菌落接种血液培养基。经过37℃培养数天后，观察细菌的生长性状。

在含5～10%二氧化碳的低氧环境中生长良好。在MMA琼脂平皿上形成菌落在45°光源照射下，呈现蓝绿色，圆形稍凸起，边缘整齐的小菌落。单核细胞增多性李氏杆菌在血液琼脂上培养18～24h，能长出光滑型直径约0.8mm的灰白色菌落，菌落周围有狭窄的β溶血环，扁平湿润，稍有隆起，边缘整齐。粗糙型的则稍大而平坦，在培养基上形成长丝，可断成杆状，边缘如齿状，中间如脐状，脆而不易乳化，中央为颗粒状。亚碲酸钾血液培养基生长的单核细胞增多性李氏杆菌为呈β型溶血的细小黑色菌落，边缘发绿。在液体培养基内，光滑型的均匀混浊，粗糙型的则为颗粒状生长。在含有0.5～1%的葡萄糖琼脂培养基上培养几天后菌落可达1～3mm。明胶穿刺培养，沿穿刺线长出分散的菌落，形成一棵“倒载的松树”，明胶不液化。

单核细胞增多性李氏杆菌能发酵麦芽糖、鼠李糖、水杨苷，产酸不产气；也能发酵蔗糖，但较慢；不发酵阿拉伯糖、木糖、卫矛醇。不形成硫化氢和吲哚，不产生过氧化氢酶。三糖铁琼脂培养基30±1℃培养18～24h，斜面产酸，底层产酸，硫化氢阴性。

（4）动物接种试验。在家兔、小鼠或幼豚鼠腹腔、静脉内注射，都可引起败血症死亡。最简易的方法是将病料悬液滴入试验动物眼内，一天后发生结膜炎，之后发生败血症死亡，妊娠2周的动物常发生流产。①家兔接种：取0.5ml菌悬液（约3×108/ml）耳静脉注射幼兔，在3～5d内，幼兔血液内的单核细胞可上升到40%以上。②小鼠接种：选择16～20g小鼠1只，腹腔注射0.2ml肉汤培养物，饲喂5天，将其杀死，可发现肝脏、脾脏有坏死灶，如进行分离培养可回收到本菌。③结膜囊点眼试验：取幼兔或豚鼠1只，用待检细菌的24h肉汤培养物1滴，滴入动物一侧结膜囊内，另一侧为对照，观察5d。一般在接种24～36h内，出现化脓性结膜炎。

［1］ 王岩梅，隋春丽，黄翠丽.李氏杆菌病的致病性及诊疗［J］.中国畜禽种业，2014，（2）：15.

［2］ 黄翠丽，王玲.李氏杆菌病研究进展［J］.山东畜牧兽医，2006，（4）：30.

寇玉（1987—），男，籍贯：辽宁省鞍山市岫岩满族自治县岫岩镇，助理兽医师，本科，主要从事动物检疫防疫工作。