奶牛副结核病的诊断与防制

2016-04-05曹敬波山东省莱西市畜牧兽医局266600

山东畜牧兽医 2016年3期

曹敬波（山东省莱西市畜牧兽医局 266600）

奶牛副结核病的诊断与防制

曹敬波（山东省莱西市畜牧兽医局 266600）

1 临床症状

本病的潜伏期长短不一，少则6个月，多则15年以上。所以奶牛感染副结核病后，在一定的时期内不出现临床症状，较多是在产犊后体质虚弱时出现临床症状，3～5岁的奶牛发病最多。早期症状是间断性腹泻，体温正常，与其他腹泻疾病在临床症状上不易区分，经对症治疗后可以短期控制症状，当遇到产犊、气候剧变、饲草饲料改变等应激反应情况时又会马上出现临床症状，经几次反复发作后，变为顽固性的腹泻，对药物治疗不再敏感。症状也逐渐加重，常见下颌及胸垂处水肿，起初粪便为不成形的软便，食欲、精神尚佳，经反复后，粪便逐渐变稀，带有气泡、黏液和血凝块，气味恶臭，眼球下陷，有一定的饮欲，食欲减退，不爱吃精料，重度消瘦至“皮包骨”，最后不食，不能站立。染疫群体死亡率每年可达10%。

2 病理变化

患病奶牛病理损害常见于肠道的空肠、回肠、结肠前段和肠系膜淋巴结，回肠段病理变化最为明显。剖检后可见浆膜下淋巴管和肠系膜淋巴管肿大，浆膜和肠系膜水肿，肠黏膜增厚明显，形成如脑回样的皱褶，黏膜颜色变为灰黄，上面附有浓稠黏液，肠腔内空虚，只有少量稀薄粪便。

3 诊断

根据症状和病理变化可进行初步诊断，但早期症状不十分明显，易与其他腹泻疾病相混淆，因此应结合临床症状进行实验室诊断，方能确诊。

3.1 细菌学诊断

3.1.1 活体取样用塑料长臂手套一支，戴于手臂上，如直肠检查方式，伸于直肠内，弯曲手指，将直肠内粪便排空后，用手指稍用力刮肠黏膜表面，退出后将长臂手套翻过来，刮取到的肠内容物存放于手套内，然后送检即可。死亡病例取回肠末端与附近肠系膜淋巴结或取回盲瓣附近的肠黏膜。

3.1.2 细菌直接涂片检查送检的粪便中如能发现黏液，可以用载玻片直接做成触片，然后抗酸染色，镜检，往往就能发现病菌。如果粪便中没有黏液，需要进行粪便集菌，取待检粪样15～20g，加约3倍量的0.5%氢氧化钠液，混匀，55℃水浴乳化30min，取上清液1000转/min离心5min去沉渣，再以3000转/min离心30min，去上清液，沉淀物涂片，火焰固定，抗酸染色后镜检。

3.1.3 抗酸染色（1）方法1：将制好的涂片火焰固定，滴满石炭酸复红液，在酒精灯上加热染色5min，以冒蒸汽不沸腾为度，稍冷，倾去染色液。水洗，3%盐酸酒精脱色至无色，水洗，滴加碱性美蓝液染色1min，水洗、干燥、镜检。（2）方法2：将制好的涂片火焰固定，滴满石炭酸复红液，在酒精灯上加热染色5min，以冒蒸汽不沸腾为度，稍冷，倾去染色液。水洗，滴加碱性美蓝液染色5min，水洗、干燥，镜检。用10×100倍油镜镜检，如有病菌，可发现副结核菌是长0.5～1.5μm，宽0.3～0.5μm的红色革兰氏阳性小杆菌，在视野中常以成堆或栅栏样丛状出现，但在病原菌少时，往往需要镜检许多视野才能发现。（3）注意：有时本病一次镜检不能发现病菌，所以如果一次镜检未能发现病菌时，不能排除此病，需间隔一段时间后再次镜检。

3.2 变态反应诊断

由于奶牛感染本病初期没有症状，对牛群检疫净化，需要进行变态反应试验。其意义在于可以发现绝大多数无临床症状的病畜，尽早对其淘汰处理，避免其排出的细菌感染其他健康牛。操作方法：（1）材料：剪毛剪、游标卡尺、注射器及针头、75%酒精棉球、记录本等。（2）药品：副结核菌素。将被检动物编号，在颈侧1/3处中部的皮肤剪毛，直径约10cm，用卡尺测量原皮厚，并作好记录，局部用酒精棉球消毒。将副结核菌素以灭菌注射用水稀释至0.5mg/ml，皮内注射0.1ml，如注至皮下或溢出，应于离原注射点8cm以外处补注一针。结果判定：注射后72h观察反应，检查注射部位有无热、肿、痛等炎症，并以卡尺测量注射部位的皮肤厚度。阴性反应：注射部位迟发型过敏反应时间或炎性反应不明显，皮厚差≤2.0mm。阳性反应：局部有炎性反应，皮厚差≥2mm判为阳性；局部炎性反应不明显，皮厚差2.1～3.9mm，可视情况在3个月后复检，于注射部位对侧的相应部位进行相同的操作，72h后皮厚差仍≥2mm，则判为阳性，应立即淘汰处理。如考虑有感染结核病的可能，可以在做副结核变态反应的颈部另一侧做结核菌素的变态反应试验，72h后判定结果，皮差较大的变态反应侧为病牛所患疫病，如副结核变态反应颈侧皮差较大则此病畜感染的是副结核病。