口腔癌患者外周血免疫变化与临床结局关系研究

张 健 朱 赟 王诚丽

口腔癌患者外周血免疫变化与临床结局关系研究

张 健 朱 赟 王诚丽

目的了解口腔癌患者外周血免疫变化与临床结局之间的关系。方法收集郴州市某三甲医院40例口腔癌患者病例资料进行回顾性研究，分析治疗期间的外周免疫及肿瘤标志物变化及与临床结局的关系。结果在住院期间白细胞、中性粒细胞和单核细胞绝对数随治疗后逐步下降(从第1周到第11周的变化分别是(6.20±1.70)×109/L到(3.50±0.80)×109/L，(4.30±1.50)×109/L到(1.70±0.08)×109/L，(0.43±0.18)×109/L到11周(0.26±0.05)×109/L(均P＜0.05)。中性粒细胞的百分比也出现明显下降(从第1周到第11周的变化是65.2%±9.2%到11周的49.2%±4.9%)(P＜0.05)。但是淋巴细胞绝对数在下降到第5周后不再下降，并保持一定的水平。死亡的口腔癌患者淋巴细胞/中性粒细胞和淋巴细胞/单核细胞比值随病程延长的要明显低于治疗好转出院者(P＜0.05)。相关性分析发现淋巴细胞/中性粒细胞与癌胚抗原(CEA)之间存在负相关(r=-0.28，P＜0.05)。结论口腔癌患者外周血中淋巴细胞与中性粒细胞和单核细胞比值明显下降可能提示预后不良。

口腔癌;淋巴细胞;中性粒细胞;单核细胞;预后

【Author's address】 The First People's Hospital of Chenzhou，Chenzhou，423000，China

口腔癌为头颈部较常见的恶性肿瘤之一，尽管近年来临床诊断及治疗有所改进，但5年总体生存率仍然很低，早期诊断仍然是提高口腔癌生存率的重要手段之一。有报道核酸相关标志物(如杂合子缺失、等位基因不平衡等)［1］、蛋白标志物(张力蛋白、生存素等)可能可以作为口腔癌诊断的早期标志物之一［2-3］。但是其应用大都停留在实验室阶段，其特异性或敏感性都不高，无法在现阶段应用于临床。有研究提示机体的免疫状态可能与口腔癌的进展存在密切关系，特别是淋巴细胞状态与口腔癌的进展之间存在密切相关［3］。本研究通过收集当地某三甲医院2011-2015年40例口腔癌患者资料进行回顾性研究，收集治疗期间的外周血血象变化，并分析其与治疗结局的关系，试图找到简单有效临床早期的预后指标。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 样本收集

收集郴州市某三甲医院2011-2015年口腔癌患者40名，其中女8名，男32名。5例口腔癌患者死亡，35例患者经化疗、放疗及手术后好转出院。

1.2 检测方法及观察指标

血常规使用西门子advia2120I血球仪检测，癌胚抗原(CEA)使用湖州多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统检测。

1.3 统计方法

比例分布使用卡方检验，两者间比较使用独立样本t检验，相关使用Pearson相关。

2 结果

2.1 口腔癌患者的临床学特征分析

40名患者中男32名(占82.5%)，女8名(占17.5%)，男性患口腔癌的比例要明显高于女性。男性患者的平均年龄为(54.75±8.82)岁，女性患者的平均年龄为(57.88±17.38)岁，两者比较未见统计学差异。癌症类型中舌癌最多为22例(55.0%)，其次为牙龈癌9例(22.5%)和咽癌6例(15.0%)。在对这些患者的治疗过程中主要以化疗为主，其中也有联合放疗3例，主要治疗药物包括顺铂、平阳霉素、博莱霉素、长春新碱。40名治口腔癌中有5人治疗无效死亡，35名治疗者好转出院(见表1)。

2.2 口腔癌患者住院期间免疫细胞水平变化

对住院期间的患者的血常规中免疫细胞进行动态分析发现，白细胞的绝对值随住院时间的延长都出现明显的下降，从第1周的(6.20±1.70)×109/L降低到到第11周(3.50±0.80)×109/L，中性粒细胞及单核细胞绝对值也出现明显的下降，分别从第1周(4.3±1.5)×109/L降低到到11周(1.70±0.08)×109/L和第1周(0.43±0.18)×109/L降低到到11周(0.26±0.05)×109/L。淋巴细胞绝对值在早期也出现明显的下降，从第1周的(1.6±0.57)×109/L降低到第5周的(0.81±0.51)×109/L，但是第5周到第11周并无明显变化，维持在(0.80～0.90)×109/L之间变化。进一步对上述细胞群在白细胞中的百分比进行比较分析发现，中性粒细胞的百分比也呈下降趋势，从第1周65.2% ±9.2%降到第11周的49.2%±4.9%。淋巴细胞及单核细胞的百分比呈逐步上升的趋势，分别从第1周24.6%±8.8%升到第11周的28.0% ±7.5%和6.7%±2.4%升到第11周的8.3%±2.1%。而嗜酸性及嗜碱性细胞绝对值则无有序变化分别在(0.60～1.70)×109/L和(0.02～0.04)×109/L之间波动变化。上述结果提示口腔癌患者外周血象随住院时间的延长，其成分及比例会出现较大变化，淋巴细胞和中性粒细胞及单核细胞最为明显，它们之间的变化可能与口腔癌患者的临床结局存在一定的关系。

2.3 口腔癌患者淋巴细胞/单核细胞/中性粒细胞比值与癌症标志之间的关系

表1 口腔癌患者的一般临床学特征

我们将口腔癌患者分为2组:死亡组及对照组(治疗好转出院)进行进一步分析，比较两组间淋巴细胞与单核细胞比值和淋巴细胞与中性粒细胞比值差异及随时间变化趋势。通过比较发现死亡组口腔癌患者的淋巴细胞与单核细胞比值和淋巴细胞与中性粒细胞比值随时间均发生明显的下降，而对照组口腔癌患者两者比值未出现明显降低。并且死亡组淋巴细胞与单核细胞比值在第3、4、5周要明显低于对照组(P=0.002，P=0.03和P=0.02)，淋巴细胞与单核细胞比值在第4周和第5周要明显低于对照组(P=0.002和P＜0.001)。相反，对照组淋巴细胞与单核细胞比值处于较为稳定的水平，而淋巴细胞与中性粒细胞比值在第6周后反而出现明显的上升(见图2)。上述结果提示淋巴细胞与中性粒细胞比值与淋巴细胞与单核细胞比值在口腔癌患者的不同结局之间存在明显的差异，也提示其变化可能与预后存在相关。

图1 口腔癌患者住院期间免疫细胞水平变化

图2 口腔癌患者住院期间死亡组与对照组淋巴细胞/中性粒细胞和淋巴细胞/单核细胞比值变化及比较

CEA作为常用肿瘤标志物，在预测口腔癌的预后具有一定的临床意义，为了证实口腔癌患者淋巴细胞/中性粒细胞比值及淋巴细胞/单核细胞比值与预后关系，我们将部分做了CEA结果的患者与同时期做血常规中淋巴细胞和单核细胞及中性粒细胞比值做相关性分析。通过相关分析发现淋巴细胞/中性粒细胞比值与CEA之间存在一定负相关性(r=-0.28，P=0.046)，提示淋巴细胞/中性粒细胞比值越低其CEA越高，预后越差(见图3)。

图3 口腔癌患者淋巴细胞/中性粒细胞比值与癌胚抗原(CEA)之间的相关性分析

3 讨论

早期预测口腔癌的结局有助于临床医生提前做好诊疗措施，并且有助于降低病患痛苦。现有多种口腔癌标志物可能可以预测口腔癌患者的结局，但是难以运用于临床。本研究意在通过常规的检查结果寻找口腔癌在疾病发展中的出现的异常生化指标来快速预警临床结局提供治疗参考。

免疫炎症细胞在机体抗口腔癌免疫中起重要作用，在临床治疗过程中我们通常会密切关注口腔癌患者的血常规变化，如果白细胞减少提示患者免疫能力下降，在用药的过程中就会谨慎地使用放疗及化疗药物。本研究中大部分患者进行了口腔癌切除术及根除术治疗，而所有的患者都进行了化疗。通过分析我们可以发现白细胞的绝对值(主要以中性粒细胞及单核细胞绝对值为主)在入院后都出现明显的下降(见图1)。这可能与化疗及放疗的进行密切相关，大多数研究也证实这一点。同是我们也发现，淋巴细胞绝对值在下降到一定的水平后，并未继续下降，维持在一定的水平。淋巴细胞亚群是很特殊的一群细胞，研究提示中T淋巴细胞除可以直接杀伤肿瘤细胞外［4］，还可以分泌不同类型的细胞因子如INF-γ、IL-2、IL-4杀伤肿瘤细胞［5］。而B细胞可以分泌肿瘤相关抗体杀死癌细胞［6］。因此淋巴细胞亚群可能是维系肿瘤防御的较为重要的一道防线，对于口腔癌的结局有着重要的影响。

我们通过进一步分析口腔癌死亡或好转出院与患者白细胞亚群之间的差异来揭示淋巴细胞亚群对口腔癌预后的重要性。通过分析发现死亡组口腔癌患者的淋巴细胞与单核细胞比值和淋巴细胞与中性粒细胞比值在刚入院的时候与对照组未有显著性差异，但是随着治疗的延长，死亡组口腔癌患者淋巴细胞与单核细胞比值和淋巴细胞与中性粒细胞比值急剧下降，在第4周已经明显低于对照组(见图2)。相比淋巴细胞与单核细胞比值，淋巴细胞与中性粒细胞比值下降更为明显。有研究提示淋巴细胞与中性粒细胞比值对于口腔癌的预后极为重要［7］，这与我们分析的结果一致。为了验证淋巴细胞与单核细胞比值及中性粒细胞比值是否具有预测意义，我们将部分做了CEA结果的患者与同时期做血常规中淋巴细胞和单核细胞及中性粒细胞比值做相关性分析，发现CEA与淋巴细胞/中性粒细胞比值存在负相关(r=-0.28，P＜0.05)。上述结果均提示淋巴细胞/中性粒细胞及淋巴细胞/单核细胞比值水平对于口腔癌的预后具有一定的参考意义。

本研究通过动态分析口腔癌患者住院期间的外周免疫细胞变化来揭示其与预后之间的关系。我们研究也证实了动态监测淋巴细胞/中性粒细胞比值变化对于预测口腔癌患者的预后有重要参考意义。本研究缺陷是没有采集到足够的样本进行淋巴细胞亚群的研究，因此淋巴细胞亚群在口腔癌疾病进展中重要地位有待进一步研究。

［1］Li L J，Wang L J，Li Y，et al.A Combination Therapy of rAd-p53 with Chemotherapy for Advanced Oral Carcinoma by Selective Intraarterial Infusion［C］.第三次全国口腔颌面-头颈肿瘤综合治疗研讨会暨中华口腔医学会外科专委会口腔颌面-头颈肿瘤内科协作组成立大会论文集，2007:2-7.

［2］殷 操，谢思明，陈 希，等.DJ-1、张力蛋白同源10q丢失的磷酸酶基因和黏着斑激酶在口腔癌及癌前病变中的表达［C］.中华口腔医学会第14次全国口腔医学学术会议论文集，2012:227-232.

［3］丁艳平，李曙霞，吴洪儒，等.生存素、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在口腔癌前病变及口腔癌中的表达［J］.中华口腔医学杂志，2010，45(2):85-88.

［4］张立娜.口腔癌患者手术前后外周血中CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞的检测及其临床意义［D］.石家庄:河北医科大学，2011.

［5］李天客.IL-21、IL-2对口腔癌患者外周血T淋巴细胞内细胞因子表达的影响及临床意义［D］.石家庄:河北医科大学，2010.

［6］汤晓飞，赵艳华，张 敏，等.Nrf2和NF-κB在口腔癌和癌前病变细胞中的表达及意义［J］.北京口腔医学，2009，17(3):135-137.

［7］CHO H，HUR H W，KIM S W.Pre-treatment neutrophil to lymphocyte ratio is elevated in epithelial ovarian cancer and predicts survival after treatment［J］.Cancer Immunology Immunotherapy，2009，58(1):15-23.

The Relationship between Peripheral Immune Changes of Oral Cancer Patients and Clinical Outcome

ZHANG Jian，ZHU Yun，WANG Chengli

ObjectiveTo explore the relationship between the change of leukocyte and outcome of oral cancer.Methods40 patients who underwent surgery following cisplatine based chemoradiotherapy were enrolled in this study.The associations between the leukocyte subsets and the outcome of oral cancer were analysis.ResultsTotal leukocyte，neutrophil and monocyte counts decline gradually during the during11 weeks therapy(from(6.20±1.70)×109/L to(3.50±0.80)×109/L，(4.30±1.50)×109/L to(1.70±0.08)×109/L and(0.43±0.18)×109/L to(0.26±0.05)×109/L，respectively)(P＜0.05).The percentage of neutrophil declined significantly(from65.2% ±9.2%to49.2% ±4.9%)(P＜0.05).But the lymphocyte subset were gradually steady at the fifth weeks.Further analysis showed neutrophil and monocyte to lymphocyte ratios in death group of oral cancer patients were significantly lower than the control group(P＜0.05).The neutrophil to lymphocyte ratio was negatively correlation with CEA(r=-0.28，P＜0.05).ConclusionNeutrophil and monocyte to lymphocyte ratios declined obviously in oral patient may prompt poor outcome.

Oral cancer;Lymphocyte;Neutrophil;Monocyte;Outcome

R739.8;R730.43

:Adoi:10.3969/j.issn.1671-332X.2016.08.029

湖南省卫生厅科研计划项目(编号:B2014-177);郴州市第一人民医院重点课题(编号:N2014-002)

张 健王诚丽:郴州市第一人民医院 湖南郴州 423000

朱 赟:南华大学附属郴州医院 湖南郴州 423000

王诚丽