某院嗜血杆菌临床分布与药敏特征

华德兴 彭 青 曾香连 罗 君 蔡聪艺

某院嗜血杆菌临床分布与药敏特征

华德兴 彭 青 曾香连 罗 君 蔡聪艺

目的 探讨我院嗜血杆菌临床分布特点与药敏情况，为临床诊断与治疗提供依据。方法选取我院2014－2015年全院细菌培养患者为对象，分析嗜血杆菌属培养阳性的患者年龄、性别，标本类型、临床科室分布和季节性特点，且对菌株药敏情况进行统计分析。结果流感嗜血杆菌除2月、4月份未能检出，其他月份均有分布;副流感嗜血杆菌全年均可检出，以3～5月分布最多;在105株嗜血杆菌属中，以副流感嗜血杆菌最多，其次为流感嗜血杆菌、b型流感嗜血杆菌，副溶血嗜血杆菌，未检测到其他嗜血杆菌;临床科室以内科为主，呼吸内科最多;年龄分布以老年患者最多，但也同时存在于儿童患者中(包括婴儿);除复方新诺明耐药率较高外，其他抗生素均保持较高敏感性。结论我院分离的嗜血杆菌属流行具有一定季节性，科室分布以内科为主，抗生素敏感性仍较好。

嗜血杆菌;临床分布;药敏试验

【Author's address】Yuebei People’s Hospital，Affiliated to Shantou Medical College，Shaoguan 512026，China

嗜血杆菌属隶属于巴斯德菌科。该属细菌共有17个种，其中与临床有关的有9个种:流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌［1－2］。生长过程中均需含有生长因子Ⅹ和Ⅴ的血液琼脂而得名［1－2］。本研究拟回顾2014－2015年粤北人民医院全部的细菌培养临床资料，分析嗜血杆菌临床分布特点及其对抗生素的敏感情况。

1 材料与方法

1．1 一般资料

选取2014年1月－2015年12月全院的痰培养、分泌物培养及血培养等的患者为研究对象，分析嗜血杆菌阳性患者的年龄、性别，标本类型、临床科室分布和月份季节性特点。

1．2 试剂及仪器

所需细菌培养基均购自郑州安图有限公司。VITEK－2全自动微生物分析仪及药敏卡和头孢硝噻酚纸片购自法国梅里埃公司。质控菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923、流感嗜血杆菌ATCC10211购自广东省临床检验中心。

1．3 检测方法

按照《全国临床检验操作规程》操作流程将标本接种于血琼脂平板、专用巧克力平板上，然后将其放置于CO2含量为5%的环境中进行培养，培养时间为18～24 h，以菌落的形态，革兰染色作为根据实施首次筛选，应用Ⅴ因子、Ⅹ因子、Ⅴ+Ⅹ因子试验和嗜血杆生化鉴定卡鉴定。VITEK－2全自动微生物分析仪进行药敏试验。

1．4 β－内酰胺酶试验

采用头孢硝噻酚法，在头孢硝噻酚法纸片上加一滴无菌生理盐水，纸片湿润以后将菌落涂布于纸片上，10 min内变红表示为β－内酰胺酶试验阳性菌株。

1．5 统计学方法

应用WHONET 5.6对细菌和药敏结果进行统计分析，药敏标准按照CLSI2014。数据比对分析采用SPSS 13.0进行卡方检验，P＜0.05判读差异有统计学意义。

2 结果

2．1 细菌分离

2014－2015年共送检22 122例痰培养，分离嗜血杆菌105株，阳性率0.47%，其中62株副流感嗜血杆菌、38株流感嗜血杆菌、4株b型流感嗜血杆菌，1株副溶血嗜血杆菌，未分离到溶血嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌。分泌物、静脉血、脑脊液、胸腹水、尿等培养物未分离嗜血杆菌。

2．2 临床分布和季节性特点

科室分布呼吸内科49株(47.1%)，其他内科科室33株(31.4%)，重症医学科7株(6.7%)，外科8株(7.7%)，儿科8株(7.7%)。性别为男性患者检出 59株(56.7%)，女性患者检出 45株(43.3%)。年龄分布为0～1岁4株(含25天婴儿1株)，2～6岁3株，7～17岁2株，18～40岁5株，41～50岁7株，51～60岁25株，61～92岁58株。菌株月份分布为:b型流感嗜血杆菌6月、8月各1株，7月2株;流感嗜血杆菌除2月和4月没有检出，其他月份均有分布;副流感嗜血杆菌全年均有检出，以3－5月分布最多，副溶血嗜血杆菌在3月检出。如果1－3月为春季，4－6月为夏季，7－9月为秋季，10－12月为冬季，则嗜血杆菌以春夏分布最多，特别是春季。见图1。

图1 嗜血杆菌月份分布图

2．3 抗菌药物药敏情况

104株嗜血杆菌(不包括副溶血嗜血杆菌)对头孢曲松、头孢克洛、头孢呋辛、左旋氧氟沙星、阿奇霉素保持较高的敏感性;氨苄西林、复方新诺明保持中度敏感，加β－内酰胺酶抑制剂(氨苄西林/舒巴坦)敏感性有所增加;在所测试抗生素中未发现严重耐药现象。b型流感嗜血杆菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、头孢曲松、左旋氧氟沙星、头孢克洛100%敏感，对阿奇霉素保持中度敏感，对复方新诺明有较高程度的耐药。1株副溶血嗜血杆菌对所测试抗生素(氨苄西林、氨曲南、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢吡肟、左旋氧氟沙星、美洛培南、复方新诺明)均保持敏感。见表1。

表1 流感/副流感嗜血杆菌对常用抗生素敏感率

2．4 β－内酰胺酶试验

105株嗜血杆菌中，有21株产β－内酰胺酶，阳性率20%，其中流感嗜血杆菌9株(23.7%)，副流感嗜血杆菌12株(19.4%)，副溶血嗜血杆菌未检测到β－内酰胺酶。

2．5 抗菌药物敏感率比对情况

38株流感嗜血杆菌与62株副流感嗜血杆菌对所测抗生素敏感率经卡方检验P＞0.05，说明两组菌的敏感率差别无统计学意义。见表2。

表2 流感嗜血杆菌与副流感嗜血杆菌对抗生素敏感率比对表

我院104株嗜血杆菌与2013－2014全国细菌耐药监测菌株［3］敏感率比对表明:流感嗜血杆菌差别有统计学意义的是氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、头孢呋辛、头孢曲松;副流感嗜血杆菌差别有统计学意义的是氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、左旋氧氟沙星。见表3。

表3 嗜血杆菌与文献报道敏感率比对统计表 (%)

3 讨论

嗜血杆菌属存在于正常人上呼吸道，定值率达人群的50%，主要通过呼吸道感染，引起原发性和继发性感染，原发性感染多由b型夹膜强毒株引起化脓性感染［1－2］。流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌原发性和继发性感染，包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎、中耳炎、心内膜炎及尿道炎等。溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌均为口腔条件致病菌，引起咽炎，化脓性口腔炎及心内膜炎等［1－2］。杜克嗜血杆菌是性传播疾病软下疳病原体，引起外阴脓疱，溃疡、淋巴结肿大等［2］。刘一平［4］在尿道、前列腺、宫颈和阴道分离到53株副流感嗜血杆菌，实际上副嗜沫嗜血杆菌也可在阴道分泌物分离。

本研究回顾性地分析粤北人民医院2014－2015年的全部细菌培养资料，仅发现痰培养分离到嗜血杆菌，包括流感流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌和副溶血嗜血杆菌，未检测到溶血嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌，分离率为0.47%，说明嗜血杆菌在临床分离率不高。同时由于嗜血杆菌生长环境要求较高，也间接地影响嗜血杆菌检出率［2］。副流感嗜血杆菌在检出的嗜血杆菌中占59.6%，说明我院副流感嗜血杆菌比较流行。b型流感嗜血杆菌，又称乙型流感嗜血杆菌，为嗜血杆菌中含夹膜的强毒株，在婴幼儿易引起严重疾病，特别是化脓性脑膜炎，但种植Hib疫苗的儿童，乙型流感嗜血杆菌感染明显可以减少甚至消失［5－7］。本研究中检测出4株乙型流感嗜血杆菌，但所幸对大部分抗生素100%敏感，仅复方新诺明有不同程度的耐药。

临床科室分布以内科为主，呼吸内科47.1%，其他内科30.8%，重症医学科6.7%，儿科7.7%，外科仅为7.7%。由此可见，分离的嗜血杆菌在我院多流行于内科性疾病，以呼吸道疾病最多。本研究还表明我院男性患者发病率高于女性患者，有可能为男性呼吸道疾病高发于女性的原因［8］。

年龄分布资料表明，我院的老年患者嗜血杆菌感染率最高，占79.8%。这可能与老年患者住院时间长、免疫力低下、接触嗜血杆菌时间长等有密切的关系［8］。同时，流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌是引起小孩脑膜炎的病原菌，也引起其他败血症、中耳炎、窦炎、慢性支气管炎［9－10］。本研究显示1岁内的儿童共检测到4株，特别是含有一位未满月的婴儿，应加强警惕。

按月份统计，我院b型流感嗜血杆菌流行于6－8月份;流感嗜血杆菌除2、4月外其他月均检测到，以5－7月最多;副流感嗜血杆菌全年均检测到，集中在3－5月，尤以3月最多。以上资料表明，我院嗜血杆菌具有一定的季节性，以春季最多。而孙潺的报道为冬季流行高峰期［8］。

氨苄西林曾是治疗嗜血杆菌首选药［6］，由于耐药酶的产生，敏感度有所下降，但加酶抑制剂后仍然保持较好的活性。本研究β－内酰胺酶产生率为20%，低于文献报道阳性率［8，10－11］，流感嗜血杆菌与副流感嗜血杆菌β－内酰胺酶产生率基本相同。此外发现，尽管加了酶抑制但仍还有少数菌株耐药，这可能这些菌株青霉素结合蛋白发生了变异有关，但是否如此还需进一步探讨［5］。

本研究药敏结果与2013－2014年全国细菌耐药监测网比较发现，我院流感嗜血杆菌对氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、头孢呋辛、头孢曲松敏感率高于全国的流感嗜血杆菌，氨苄西林、左旋氧氟沙星、阿奇霉素基本一致;我院副流感嗜血杆菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、左旋氧氟沙星敏感率高于全国的副流感嗜血杆菌，复方新诺明、头孢曲松、阿奇霉素基本一致［3］。

从总的药敏结果来看，除复方新诺明敏感率较低(51.0%)外，其他均保持较高敏感率，由以氨苄西林/舒巴坦、头孢呋辛、头孢曲松、左旋氧氟沙星、阿奇霉素最好。

综上，我院分离的嗜血杆菌临床菌株的流行具有季节性，以内科分离率最高，除了复方新诺明外，其他抗菌药物均保持较好的敏感性。

［1］ RAWLINGS B A，HIGGINS T S，HAN J K．Bacterial pathogens in the nasopharynx，nasal cavity，and osteomeatal complex during wellness and viral infection［J］．Am J Rhinol Allergy，2013，27 (1):39－42．

［2］ 张卓然，倪语星．临床微生物学和微生物检验［M］．3版．北京:人民卫生出版社，2003:177－178．

［3］ 李 耘，吕 媛，薛 峰，等．中国细菌耐药监测研究2013至2014年肠杆菌科及嗜血杆菌监测报告［J］．中华检验医学杂志，2016，39(2):103－119．［4］ 刘一平．泌尿生殖道嗜血杆菌的感染及临床意义分析［J］．世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊)，2015，15(36):88．

［5］ 王爱华．流感嗜血杆菌感染与耐药［J］．中华实用儿科临床杂志，2016，31(4):256－258．

［6］ 王明清，管娇琼，朱文勇，等．B型流感嗜血杆菌疫苗的研究进展［J］．医学研究杂志，2015，44(6):155－157，137．

［7］ 谢桂香，梁艳金，谢美兴，等．股外侧肌肉注射法在疫苗接种中的应用观察［J］．现代医院，2010，10(11):87－88．

［8］ 孙 潺．成人呼吸道感染流感嗜血杆菌临床特点与耐药性研究［J］．中国卫生标准管理，2015，25(24):144－145．

［9］ 孟亚辉．42例确诊小儿社区获得性流感嗜血杆菌肺炎病临床分析［J］．中国农村卫生，2015，66(12):16．

［10］周 莉，周建春．800例手足口病患儿呼吸道副流感嗜血杆菌分型及药敏分析［J］．实用预防医学，2015，22(4):499－501．

［11］江秀爱，赵自云，姜 蓓，等．呼吸道嗜血杆菌属的生物学分型及耐药性分析［J］．国际检验医学杂志，2015，36(19):2840－2841，2843．

Clinical Characteristics and Antibiotic Susceptibility of Haemophilus Isolated from a Hospital

HUA Dexing，PENG Qing，ZENG Xanglian，et al

Objective To investigate the clinical characteristic and antibiotic susceptibility results of haemophilus isolated from Yuebei People’s Hospital．MethodsHaemophiuls strains were collected from the infected patients in the hospital from 2014－2015．The patients’age，gender，clinical departments and seasons of collection were analyzed．The antibiotics susceptibility profiles were also determined．ResultsHaemophilus influenza strains were detected in most months but not in February and April．Haemophilus parainfluenzae were detected in every month，but more in March and April．The most detected strains were haemophilus parainfluenzae，followed by haemophilus influenzae，haemophilus influenzae(type b) and haemophilus parahaemolyticus among the 105 strains of haemophilus，and the other haemophilus species were not detected．Most strained were isolated from the departments of internal medicine，especially from the department of respiratory medicine．Among the senior patients，the haemophiuls infection rate was the highest，but the infection was also found in children (including infants)．Except co－trimoxazole，the strains showed sensitivity to the tested antibitics．ConclusionHaemophilus in our hospital vary with the seasons and it is mainly epidemic in the departments of Internal Medicine．The strains are sensitive to antibiotics．

Haemophilus;Clinical Distribution;Antimicrobial Susceptibility Test

R446．5;R969

:Adoi:10．3969/j．issn．1671－332X．2016．09．021

国家自然科学基金(编号:81202569);广东省普通高校青年创新人才项目

华德兴 曾香连 罗 君:汕头大学医学院附属粤北人民医院 广东韶关 512026

彭 青:南方医科大学珠江医院/南方医科大学再生医学研究所广东广州 510282

蔡聪艺:汕头大学医学院第二附属医院 广东汕头 515041

蔡聪艺