双歧三联活菌对肝硬化患者肠粘膜屏障功能及细胞免疫功能的影响

郭 梅 李雪梅

双歧三联活菌对肝硬化患者肠粘膜屏障功能及细胞免疫功能的影响

郭 梅 李雪梅

目的观察双歧三联活菌辅助治疗对肝硬化患者肠粘膜屏障功能及细胞免疫功能的影响。方法60例肝硬化患者入院后均予以对症支持治疗，根据数字表法随机分为2组，对照组(n=30)仅采用对症支持治疗，观察组(n=30)在对照组治疗基础上加用双歧三联活菌胶囊治疗。比较两组治疗前后血浆内毒素、降钙素原(PCT)、二胺氧化酶(DAO)等肠粘膜屏障功能指标及CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等细胞免疫功能指标的变化。结果两组治疗后血浆内毒素及PCT、DAO等肠粘膜屏障功能指标的表达水平较治疗前均明显下降(P＜0.05)，且观察组较对照组降低更为显著(P＜0.05);两组治疗后CD4+等T淋巴细胞亚群水平及CD4+/CD8+均明显升高(P＜0.05)，且观察组较对照组升高更为显著(P＜0.05)，而两组治疗前后CD8+等T淋巴细胞亚群水平变化比较无显著差异性(P＞0.05)。结论双歧三联活菌可降低肝硬化患者血浆内毒素水平，恢复肠道黏膜屏障功能，增强细胞免疫功能，值得临床推广应用。

双歧三联活菌;肝硬化;肠粘膜屏障功能;细胞免疫

多数肝硬化患者发展至晚期阶段常易出现自发性细菌性腹膜炎，分析原因与肠黏膜通透性程度显著性升高，肠黏膜屏障保护系统受到严重损害，以及免疫防御系统能力明显下降之间存在着密切的相关性关系［1－2］。近些年较多研究证实［3－4］，双歧三联活菌等微生态制剂具有屏障保护、营养支持、改善肝肠脏器生理功能、增强机体免疫防御能力及抗肿瘤细胞等多种药理作用。因此本研究拟观察双歧三联活菌辅助治疗对肝硬化患者肠粘膜屏障功能及细胞免疫功能的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1．1 临床资料

60例肝硬化患者均为本院感染科和消化内科2014年6月－2016年1月期间住院治疗的患者，根据既往病史、影像学检查(肝脏CT或磁共振)及实验室检查均符合相关诊断［5］。上述患者根据数字表法随机分为2组，对照组(n=30):男24例，女6例，平均年龄为(52.1±8.2)岁，肝硬化病程为(9.7±3.1)年，Child－Pugh分级为B级20例，C级10例，病原类型为乙肝20例，丙肝7例，酒精性3 例;观察组(n=30):男25例，女5例，平均年龄为(51.2±8.5)岁，肝硬化病程为(9.4±3.6)年，Child－Pugh分级为B级18例，C级12例，病原类型为乙肝21例，丙肝5例，酒精性4例。两组在性别、年龄、肝硬化病程、Child－Pugh分级及病原类型等方面比较无显著差异性(P＞0.05)。所有患者及家属均知晓本研究内容并签署知情同意书，本研究方案已通过医院伦理委员会批准。

1．2 治疗方法

所有患者入院后均予以护肝降酶(异甘草酸镁150 mg+5%葡萄糖溶液250 mL，1次/日)、利尿(呋塞米20 mg，静推，1次/日)、通便(乳果糖口服液15 mL，口服，2次/日)、纠正机体水电解质酸碱平衡紊乱、静脉滴注补充20%人血白蛋白50 mL及维生素(脂溶性维生素，维生素C)等对症支持治疗，观察组在此治疗基础上加用双歧三联活菌胶囊，2次/日，2～4粒/次，口服，两组疗程均为4周。比较两组治疗前后血浆内毒素、肠粘膜屏障功能及细胞免疫功能指标的变化。

1．3 检测方法

1．3．1 肠黏膜屏障功能检测 采用化学发光法检测血清降钙素原(PCT)表达水平(试剂盒购自武汉佰奥达生物科技有限公司)，采用活性比色法检测血清二胺氧化酶(DAO)表达水平(试剂盒购自厦门慧嘉生物科技有限公司)，由专人按照试剂盒说明书进行检测。

1．3．2 血清内毒素表达水平检测 采用鲎试剂动态比浊法(试剂盒购自湛江海洋生物制品厂)对两组患者治疗前后血清内毒素表达水平进行检测，最低测定限为0．03 EU/mL。

1．3．3 细胞免疫功能检测 采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T淋巴细胞亚群指标对两组患者治疗前后细胞免疫功能变化予以评估。

1．4 统计学方法

本研究数据资料均采用SPSS 16．0统计学软件予以分析和处理，计量资料使用±s表示，两组比较采用t检验，计数资料使用率表示，两组比较采用卡方检验，以P＜0．05表示有统计学意义。

2 结果

2．1 两组治疗前后血浆内毒素及肠粘膜屏障功能变化比较

两组治疗后血浆内毒素及PCT、DAO等肠粘膜屏障功能指标的表达水平较治疗前均明显下降(P＜0．05)，且观察组较对照组降低更为显著(P＜0.05)，见表1。

表1 两组治疗前后血浆内毒素及肠粘膜屏障功能变化比较 (n=30，±s)

表1 两组治疗前后血浆内毒素及肠粘膜屏障功能变化比较 (n=30，±s)

注:与治疗前比较，1)P＜0．05;两组治疗后比较，2)P＜0．05

组别 内毒素(EU/mL) PCT(ng/mL) DAO(KU/L)对照组治疗前 0．38±0．13 6．12±1．85 10．02±2．79治疗后 0．28±0．081) 4．61±1．441) 8．34±1．821)观察组治疗前 0．39±0．12 6．16±1．77 9．91±2．66治疗后 0．21±0．071)2) 3．01±1．141)2) 6．14±1．351)2)

2．2 两组治疗前后细胞免疫功能变化比较

两组治疗后CD4+等T淋巴细胞亚群水平及CD4+/CD8+均明显升高(P＜0．05)，且观察组较对照组升高更为显著(P＜0．05)，而两组治疗前后CD8+等T淋巴细胞亚群水平变化比较无显著差异性(P＞0．05)，见表2。

表2 两组治疗前后细胞免疫功能变化比较 (n=30，±s)

表2 两组治疗前后细胞免疫功能变化比较 (n=30，±s)

注:与治疗前比较，1)P＜0．05;两组治疗后比较，2)P＜0．05

对治疗前 29．52±4．31 23．53±3．82 1．27±0．21治疗后 33．9±4．221) 24．70±3．95 1．38±0．281)观察组治疗前 29．71±4．14 23．22±3．74 1．26±0．20治疗后 37．80±4．521)2)23．71±4．18 1．62±0．251)2)

3 讨论

双歧三联活菌制剂是一种临床常用的微生态制剂，含有长型双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌等活菌成分，可有效调节肝硬化患者肠道菌群平衡状态，减少肠道内毒素的合成和分泌，其作用机制主要为:①有效降低肠道内环境的PH值及通透性程度，提高肠道清除毒素的功能，抑制肠道对毒素的吸收［6－7］;②生物拮抗作用:长型双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌等活菌可与肠道其他厌氧菌完全覆盖肠道黏膜组织的表面，从而形成一种生物屏障保护系统，通过大量吸收营养物质而对致病菌产生拮抗作用［8］;③免疫防御保护功能:双歧三联活菌制剂可促进单核－巨噬细胞合成和分泌释放大量的炎症介质细胞因子，进而刺激肠道黏液素的大量产生，同时还可显著性增强肠道免疫防御功能，进而拮抗作用于致病菌［9］;④抑制肠道对毒素的吸收:迅速恢复肠黏膜屏障保护系统，从而明显降低肠道对内毒素的吸收［10］。林小萍等［11］研究认为恩替卡韦联合双歧三联活菌胶囊比单独应用恩替卡韦可更显著地改善乙肝肝硬化患者的腹胀症状。

PCT是无生理学活性功能的降钙素前肽，当肠黏膜屏障保护系统受到严重损害，可分泌释放大量内毒素，进而导致PCT合成分泌量迅速升高，血清PCT表达水平显著性升高，故血浆PCT表达水平可准确反映肠粘膜屏障功能损伤的严重程度［10］。DAO则是一种肠粘膜上皮细胞内酶，当肠粘膜上皮受到严重损害时，DAO大量分泌和释放入肠间隙和血液循环系统中，进而使得血清DAO表达水平迅速升高，故血浆DAO表达水平也可准确反映肠粘膜组织结构与生理功能状态的实验室指标［11］。因此本研究选择PCT、DAO作为判断肠粘膜屏障功能状态的实验室指标，本研究结果显示，观察组血浆内毒素及PCT、DAO等肠粘膜屏障功能指标较对照组降低更为显著(P＜0．05)，由此可知双歧三联活菌可明显减少内毒素产生和吸收，有效改善肠道黏膜屏障保护功能。

近些年较多研究还发现［12－13］，双歧三联活菌胶囊本身还能激活肠黏膜上的免疫细胞，增强其肠黏膜局部防御功能。本研究结果显示，观察组CD4+等T淋巴细胞亚群水平及CD4+/CD8+较对照组升高更为显著(P＜0．05)，提示双歧三联活菌可明显纠正肝硬化患者T淋巴细胞亚群紊乱现象，明显增加其细胞免疫功能。由此可知，双歧三联活菌可降低肝硬化患者血浆内毒素水平，恢复肠道黏膜屏障功能，增强细胞免疫功能，值得临床推广应用。

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R575．2

A

10．3969/j．issn．1671－332X．2016．09．009

郭 梅 李雪梅:武汉科技大学附属天佑医院 湖北武汉 430064

李雪梅