一种由污染引起的葡萄叶斑病的调查



一种由污染引起的葡萄叶斑病的调查

摘要：对山东省济宁市农业科学研究院寄来的一份葡萄异常叶片样品进行了症状描述、保湿镜检、病原菌分离鉴定及回接，结果表明：该葡萄异常叶片并非由病原菌侵染引起。于是对该葡萄园的地理周边环境进行了调查，发现位于该园上风口有一家砖厂，明确该现象是由砖厂生产过程中所产生的污染引起。

关键词：葡萄；叶斑病；调查

葡萄是我国果业生产的重要品种。农业部统计资料显示，截至2010年底，我国葡萄栽培总面积达55.2万hm2，居世界第4位[1]，病害严重影响葡萄的产量与品质。本研究室在收到病样后，通过症状描述、病原菌分离鉴定及果园地理位置调查，以期准确对病样进行诊断，从而为葡萄生产提供科学指导。

1　材料与方法

1.1材料。2015年8月21日，本研究室收到山东省济宁市农业科学研究院寄来的一份葡萄病叶样品。

1.2方法

1.2.1症状描述及保湿镜检。该样品叶片褪绿、叶脉明显，上有褐色枯斑，病斑不规则、较小，严重时连片、出现穿孔。病斑上无明显侵染点，无霉层。病斑上滴无菌水保湿12 h后镜检。

1.2.2病原菌分离及鉴定。将病叶病斑交界处剪成2 mm见方的小块，用75%酒精消毒30 s，0.1%升汞消毒30 s，无菌水漂洗3遍后置于PDA培养基上，26℃、黑暗条件培养3 d，挑取菌落边缘新鲜菌丝，转入PDA平板上继续培养，纯化后保存备用[2]。刮取纯化菌株的菌丝用液氮研成粉末，用艾德莱真菌基因组提取试剂盒提取基因组DNA，用真菌通用引物ITS1&ITS4进行PCR扩增后，交由北京诺赛基因组研究中心测序，测序结果在NCBI网站上进行BLAST比对。

1.2.3病原菌回接。将已知鉴定结果的菌株在PDA培养基上26℃黑暗培养5 d后，制成孢子悬浮液，喷到葡萄叶片上，隔3 d再喷1遍，第2次接种后7 d观察发病情况，喷清水作为对照。

1.2.4果园地理位置调查。对寄样人进行电话询问果园的地理位置及周围种植作物。

2　结果与分析

2.1镜检结果与分离鉴定结果。保湿12 h进行镜检未见到病原孢子；分离得到的真菌有2种，一种是棘孢曲霉，另一种是互隔交镰孢霉。

2.2回接结果。所有处理的回接叶片上均未发现生长异常现象，透光看叶片上也无褪绿小点。

2.3果园地理位置。经调查发现位于该葡萄园上风口处有一家砖厂，砖厂工作正常运行。

3　结论与讨论

通过本研究回接结果的分析及文献查证，结果表明：孢曲霉是葡萄生产上的生防菌[3]，未见互隔交镰孢霉能引起葡萄病害的相关证据，综合症状描述与保湿镜检，我团队认为该现象并非由真菌侵染引起。

由于该园上风口处有一家砖厂，在砖厂生产过程中会产生粉尘及二氧化硫、氮氧化物、烟尘等空气污染，在有风天气，污染物会飘到该园葡萄叶片上，其对葡萄产生的危害主要有：阻塞植物气孔，降低蒸腾作用；遮蔽光照，降低光合作用；对植物叶片上的蜡质层产生磨损，抑制植物的生理代谢；粉尘中的可溶性盐与水作用，由气孔侵入到叶片内部，使植物叶片形成坏死斑点[4]。因此，我们认为此次葡萄叶斑病是由周围环境污染造成的。环境污染，尤其是空气污染，不仅危害人类的身体健康，对多种作物的正常生长也会产生巨大威胁，就此我们对该果园及受到相似环境污染为害的作物提出几点指导意见：①加强肥水管理，增强作物长势；②在大风天气叶片喷水，冲淋污染物；③喷施叶片保护剂，注意防病防虫；④在今后果园或其他作物种植过程中尽量避免选择有污染源的地域。

参考文献

[1]王海波，王孝娣，郝志强，等.我国葡萄栽培科研进展[J] .中国果树，2013 (1)：62～64.

[2]方中达.植病研究法(第三版) [M] .北京：中国农业出版社，1998.

[3]张稼涵.西北地区葡萄园溶磷真菌的筛选、鉴定和促生效应研究[D] .杨凌：西北农林科技大学，2010.

[4]欧金玉，田燕.治理砖厂污染为何这么难[N] .湖南日报，2014 - 7 - 9.

071000河北省农林科学院植物保护研究所张海剑

050061河北省农林科学院石家庄果树研究所索相敏