浅谈提高病理常规HE制片质量的体会

●张金龙

浅谈提高病理常规HE制片质量的体会

●张金龙

对于病理诊断病理标本的检查应包括大体和显微镜下观察两个方面，而正确的诊断往往取决于准确的显微镜下观察。因此，制片质量的好与差，直接影响诊断结果的准确性，质量差的切片甚至会带来错误的结果。

HE切片；固定；包埋盒；脱水

一张高质量的HE切片与标本的固定、取材、脱水、透明、包埋、切片、烤片、脱蜡、染色、封片等有密切的关系。我从事病理技术工作六年来，从标本的接受、试剂的独立配置和完成优质HE切片都认真、用心去做，制作的切片也多次受到上级单位老师表扬。从日常工作出现的问题及问题解决中，我总结了一点体会。

1 组织固定

固定是制作优质病理切片的前提，标本需及时和固定足够。固定不佳会造成HE染色的细胞核染色发灰；细胞核与细胞浆界限不清。如果标本过大，需切开固定。我病理科常规固定液为10%的福尔马林；液体为标本总体积的10倍量，固定液更换要及时，并确保甲醛的有效浓度；如果标本固定不良，可采用取材后的二次固定。

2 组织取材

组织的取材厚薄、大小对组织的脱水及以后的处理都有很大的影响，取材要做到大小适宜，厚薄均匀；一般标本取材应在1.5cmX1.5cmX0.2cm之间。[1]

3 组织脱水、透明

我科室采用武汉俊杰双吊篮脱水机，工作缸试剂及时间分配为：第1缸10%的甲醛 2小时； 第二缸80%的乙醇 3小时； 第三缸95%的乙醇（1） 2小时；第四缸95%的乙醇（2） 1小时；第五缸 无水乙醇 1小时；第六缸 无水乙醇 1小时；第七缸二甲苯（1） 15分钟；第八缸 二甲苯（2） 15分钟；第九缸石蜡（1） 1小时；第十缸石蜡(2) 1小时；第十一缸石蜡（3） 1小时。[1]

4 组织包埋

在组织的包埋过程中，应注以下几点。

4.1 一个标本有多个小点组织要把他们靠近并包埋在同一平台上；

4.2 注意组织结构并采取不同的包埋方式；

4.3 石蜡的选择：在长期石蜡过程中出现蜡块易冻裂或切片黏在一起无法展开等现象，针对这些问题，我做了一些尝试，最后采用了：熔点为58-60度的石蜡2-2.5份和熔点为56-58度的石蜡1份混合起来使用，就可以有效的减少由石蜡原因而出现以上的问题。

4.4 包埋盒的选择：包埋盒最好选择矩形孔的，矩形孔的包埋盒可以有效增加盒内外石蜡的接触面积，增强包埋盒内外石蜡的粘合力，从而降低蜡块被冻裂和切片时的破碎的几率，而使得切片无法进行。

5 切片、捞片、烤片

切片机转动要匀速，不易过快或过慢，以免造成切片的皱缩或厚薄不均匀；切片刀要锋利，切片厚度为4-6；捞片要选择厚薄均匀，组织完整的切片；捞片水温不易过高，一般在40-42度之间即可；烤片为80-90度烤片机内15分钟即可，温度不易过高。

6 脱蜡、染色、脱水及透明

脱蜡至水与脱水至透明过程中，试剂及时更换，保证试剂的有效和彻底，并严格按照程序进行。染色时注意观察，直至切片的最佳颜色。

7 封片、贴标签

封片时中性树胶用量要适中，盖玻片要有点角度斜着盖下去防止气泡产生；标签要干净，无污染并贴正。

总之，在从事病理工作的过程中，一切要细心、对出现的问题一定要用心思考，找出原因并解决，才能安心。

（作者单位：安徽省合肥市第八人民医院病理科 ）

[1]临床病理学技术/梁英杰等编著[M]北京：人民卫生出版社,2011.12.