HPLC法测定注射用埃索美拉唑钠的含量

杨　林，戴　芸

（1.黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院）药学部，湖北黄石435000；2.肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北黄石435000）



HPLC法测定注射用埃索美拉唑钠的含量

杨林1，2，戴芸1，2

（1.黄石市中心医院（湖北理工学院附属医院）药学部，湖北黄石435000；2.肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室，湖北黄石435000）

摘要：目的：建立反相高效液相色谱法测定注射用埃索美拉唑钠含量的方法。方法：采用Diamonsil C18色谱柱（4.6mm×150mm，5μm），流动相为20mMK2HPO4缓冲液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V），流速为1mL·min-1，检测波长为302nm。结果：埃索美拉唑钠的线性范围为50～200μg·mL-1，r=0.9997，平均回收率99.2%，RSD=0.6%（n=9）。结论：该方法快速、简便、准确，适用于注射用埃索美拉唑钠的含量测定。

关键词：HPLC；埃索美拉唑钠；注射；含量测定

质子泵抑制剂（proton pump inhibitor，PPI）在临床上主要应用于治疗酸相关性疾病，主要包括溃疡病、胃食管反流病（GERD）和胃泌素瘤的治疗[1]。第一个PPI——奥美拉唑（omeprazole，OPZ）于1988年上市[2,3]。OPZ是两种光学异构体的消旋混合物（S-奥美拉唑和R-奥美拉唑），其中S-奥美拉唑被称为埃索美拉唑（esomeprazole），是第一个发展为异构体的PPI，主要用于治疗GERD、幽门螺杆菌（HP）阳性的消化性溃疡及与胃酸有关的消化系统紊乱性疾病，其血药浓度和生物利用度比奥美拉唑或R-奥美拉唑，且抑酸作用更强[4，5]。本文建立了测定注射用埃索美拉唑钠含量的高效液相色谱法，方法专属性好，灵敏度高，快速准确。

1　实验部分

1.1仪器、药品与试剂

日立L- 7000型高效液相色谱系统，配有L- 7110型泵、L- 7200型自动进样器、L- 7420型UV检测器；XW- 80A旋涡混合器（上海青浦沪西仪器厂）；BS110S型电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）；KQ 500DE型数控超声波清洁器（昆山市超声仪器有限公司）。

埃索美拉唑对照品（重庆莱美药业股份有限公司）；注射用埃索美拉唑钠（阿斯利康制药有限公司，批准文号：国药准字H20093314，规格：40mg（以C17H19N3O3S计））；甲醇（G.R.美国Fisher Scientific公司）；KH2PO4（A.R.国药集团化学试剂有限公司）；水为纯净水；其它试剂均为国产分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱为Diamonsil C18色谱柱（150mm×4.6 mm，5μm），柱温为室温，流动相为20mMKH2PO4缓冲液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V），流速为1mL· min-1，检测波长为302nm，进样量为20μL。

在上述色谱条件下，埃索美拉唑钠的保留时间为5.29min。埃索美拉唑对照品和埃索美拉唑供试品色谱图见图1。

图1　埃索美拉唑色谱图Fig.1 Chromatograms of esomeprazole

结果表明，在该色谱条件下，空白基质中的杂质不干扰埃索美拉唑的测定。

2.2溶液制备

2.2.1对照品溶液的制备精密称取埃索美拉唑钠对照品约10mg（以埃索美拉唑计），置25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备精密称取本品适量（相当于埃索美拉唑100mg）置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为供试液。

2.3线性关系

精密量取“2.2.1”项下对照品溶液1.25、2、2.5、3.75、5mL分别置于10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，依“2.1”项下方法测定，以埃索美拉唑浓度（X）为横坐标，埃索美拉唑峰面积（Y）为纵坐标，做线性回归，得相应的回归方程Y=6.842X- 0.584，r =0.9997，显示埃索美拉唑血药浓度在50～200μg· mL-1的范围内呈现良好的线性关系。

2.4精密度试验

精密量取“2.2.1”项下的对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样20μL，连续进样6次，记录色谱图。计算得RSD为0.7%（n=6），结果显示本法精密度良好。

2.5稳定性试验

取“2.2.1”项下的对照品溶液于24h内，按“2.1”项下的色谱条件进样20μL，每隔3h测定一次，记录色谱图。计算得连续进样6次，记录色谱图。计算得RSD为0.5%，结果显示该对照品溶液在24h内稳定。

2.6加样回收率试验

精密称取3份已知含量的同一批号的样品适量（相当于埃索美拉唑10mg），分别置50mL容量瓶中，分别加入埃索美拉唑钠对照品10、20、30mg，加5mL甲醇溶解后加水制成3个不同浓度的溶液，依法各测定3次，计算回收率分别为98.6%、98.3%和99.6%；平均回收率为98.8%，RSD=0.6%，结果显示本法准确度好。

2.7样品含量测定

精密量取“2.2.2”项下供试液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取埃索美拉唑钠对照品适量同法测定。按外标法以峰面积计算其含量，结果见表1。

表1　注射用埃索美拉唑钠含量测定结果Tab.1 Content of esomeprazole sodium for injection

3　讨论

埃索美拉唑钠是新型的PPI，中文全称5-甲氧基- 2-（（S）-（（4-甲氧基- 3,5-二甲基- 2-吡啶基）甲基）亚硫酰基）- 1H-苯并咪唑，较以往的PPI能更有效地缓解GERD症状，提供更有效的长期维持治疗。本研究采用HPLC法建立注射用埃索美拉唑钠的含量测定方法，选择302nm作为测定吸收波长。研究发现，柱温对化合的分离和峰形没有显著影响，故选择柱温为室温。

参考近几年发表的文献资料[6-8]，对多种不同的流动相[如磷酸盐缓冲液（取KH2PO40.687g和KH2PO40.102g，加水适量使溶解并稀释至1000mL，H3PO4调节pH值至7.6）-乙腈（75∶25，V/V）；20mMNH4AC缓冲液（pH 7.6）：乙腈（72∶28，V/V）等]进行预试。经过摸索，结果显示20mMKH2PO4缓冲液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V）为流动相时峰形较好，保留时间合适，主峰、杂质峰能达到基线分离。

参考文献

［1］张晖敏，缪应雷.埃索美拉唑的临床应用新进展［J］.世界华人消化杂志，2009，17（20）：2064- 2069.

［2］Medhi B, Prakash A, Joshi R, et al. Effect ofesomeprazole on pharmacokinetics ofphenytoin in rabbits［J］. Indian J Physiol Pharmacol, 2012, 56（4）: 382- 387.

［3］Talpes S, Knoerzer D, Huber R, et al. Esomeprazole MUPS 40 mg tablets and esomeprazole MUPS 40 mg tablets encapsulated in hard gelatine are bioequivalent［J］. Int J Clin Pharmacol Ther, 2005, 43 （1）: 51- 56.

［4］王静，侯晓华.埃索美拉哇的临床应用进展［J］.胃肠病学，2003，8 （2）：125- 128.

［5］Jain DK, Jain N, Charde R, et al. The RP- HPLC method for simultaneous estimation of esomeprazole and naproxen in binary combination［J］. Pharm Methods, 2011, 2(3）: 167- 172.

［6］郑景哲，牟玲丽.RP- HPLC法测定埃索美拉唑镁的含量及有关物质［J］.湖南师范大学学报（医学版），2014，11（1）：90- 92，96.

［7］林缨缨，廖华卫.HPLC法测定埃索美拉唑镁肠溶微丸胶囊中主药的含量［J］.中国药师，2013，16（12）：1849- 1851.

［8］董琦鑫，朱家俊，郁韵秋，等.HPLC法测定原料药中埃索美拉唑的含量［J］.复旦学报（医学版），2014，41（1）：118- 120.

化工安全

Determination of esomeprazole sodium for injection by HPLC

YANG Lin1，2，DAI Yun1，2
（1.Department of Pharmacy, Huangshi Central Hospita（lAffiliated Hospital of Hubei Polytechnic University）, Huangshi 435000, China；2.Hubei Key Laboratory of Kidney Disease Pathogenesis and Intervention, Huangshi 435000, China）

Abstract：Objective: To establish a method for the determination of esomeprazole sodium for injection by HPLC. Method: The analysis was performed on a Diamonsil C18 column（4.6mm×150mm，5μm）with the mobile phase of 20mM potassium dihydrogen phosphate buffer solution（pH6.86）-methanol（35∶65, V/V）at a flow rate of 1 mL·min-1. The wavelength used for detection was 302 nm. Result: The calibration curve of esomeprazole was linear in the range of 50～200μg·mL-1（r=0.9997）. The mean recoveries were 99.2%（RSD=0.6%，n=9）. Conclusion: The method was proved to be rapid, simple and accurate and have been successfully applied for determination of esomeprazole sodium for injection.

Key words：HPLC；esomeprazole sodium；injection；content determination

通讯作者：戴芸（1974-），女，大专学历，主管药师。

作者简介：杨林（1971-），男，湖北省黄石市人，主管药师，1990年毕业于黄石卫校药剂专业，研究方向：临床药学。

收稿日期：2015- 08- 31

中图分类号：R917

文献标识码：A

DOI：10.16247/j.cnki.23-1171/tq. 20160131