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中药鉴定学新技术新方法研究进展

2016-03-19金立

求知导刊 2016年4期
关键词:鉴定中药技术

金立

摘 要:传统的中药鉴定具有快速、简便的优点;随着当前科学技术的不断发展,新技术、新方法广泛应用于中药鉴定,使得中药鉴定的科学性、准确性得到极大提高。本文主要介绍了中药鉴定学新技术新方法研究的进展,主要从分子鉴定技术、化学鉴定技术、性状显微鉴定新技术、生物效应鉴定技术四方面进行探讨,希望能对同行有所帮助。

关键词:中药;鉴定;技术;方法

中图分类号:R282.5 文献标识码:B 收稿日期:2015-11-12

一、分子鉴定技术

1.蛋白质标记技术

(1)抗血清鉴别技术。抗血清鉴别技术通过中药中的抗原性物质制作出所需要的抗体,采用抗体酶免疫试验或者酶联免疫吸附法等鉴别中药,如阿胶及其代用品采用抗血清进行鉴别。

(2)蛋白质电泳鉴别。是指根据中药中所含蛋白质分子的特性,采用电泳分离的方法对中药进行鉴定的方法。我们比较熟悉的如毛细管电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳可对果实种子、动物类药材进行鉴定。

(3)同工酶鉴别技术。是指根据中药中的同工酶分子活性、免疫性等特质,通过对重要酶活性分析和电泳检测来完成对中药的鉴定的技术。

2.DNA分子鉴定

(1)DNA条形码鉴定技术。2003年,加拿大分类学家PaulHebert提出了DNA条形码。该方法是指利用基因组中一段公认标准且较短的DNA片段作为物种标记而建立的一种鉴定方法,通过对DNA进行筛选确定DNA通用条形码,利用生物信息学分析方法分析比对DNA数据,进行物种鉴定。DNA条形码由于鉴定快速准确,已经成为国内外学者研究的热点。与分子鉴定方法相比,DNA条形码鉴定优点包括鉴定结果可重复使用,通用性强,能建立数据库和鉴定平台。近年来,中药DNA条形码鉴定研究促进了中药鉴定技术的快速发展。

(2)基于PCR的分子鉴定技术。随机和简单限定引物的PCR标记技术采用随机引物对模板DNA进行扩增,如RAPD、AP-PCR等;或对引物进行简单限定,如AFLP、ISSR、DALP、SRAP、TRAP等。目前主要用于生物遗传关系和多样性分析。PCR标记技术研究的前提是事先掌握研究对象的DNA序列信息。

(3)基于分子杂交的DNA分子技术。RFLP是依据序列差异产生特定的限制性内切酶酶切位点,从而导致酶切片段长度的变化或片段数量的增减,以此进行鉴定。该项技术首次应用到北沙参基原植物珊瑚菜的不同居群的鉴别,现在广泛应用到了柴胡等药材或其基原植物的鉴定技术当中。该方法所需DNA的量较大,对DNA的质量要求也较高,因此在推广方面受到了一定的限制。在保留酶切方法、简化杂交技术的基础上建立了PCR-RFLP技术,已经在灵芝、绞股蓝等药材鉴定方面得到了广泛应用。

二、化学鉴定技术

中药化学鉴定的物质基础是其化学成分。中药材所含成分复杂,因此必须选择具有特征的少量化学成分进行鉴定。早期的中药理化鉴定多依据一类成分具有的化学特性来开展鉴定。TLC方法采用对照品、对照药材或对照提取物进行随行对照鉴定,得到应用和普及。与色谱分离、分析技术的飞速发展相对应,HPLC、GC、HPCE等方法及光谱联用技术也有了相应发展,在更高精确度反映中药材化学组分数和量等特征方面发挥着日益重要的作用。

三、性状显微鉴定新技术

物种的遗传特征主要通过生物的性状特征表现出来,因此物种特异性可采用中药物种的方式进行鉴定,因此发掘和明确有效中药材鉴别性状特征随着技术进步一直在不断发展。中药材性状鉴别技术经过长期积累和总结,已经形成了丰富的鉴别经验和有效方法:该方法是一种比较实用、快捷、有效的中药材鉴定方法。生物学中的细胞学确定后,显微镜成为植物药鉴别的重要方法。

四、生物效应鉴定技术

中药生物效应鉴定以生物效应为基础,以生物统计为工具,运用特定的实验设计,通过在一定条件下生物体对不同供试品所产生的反应来测定中药的生物活性与强度差异,并以此作为鉴定中药的主要依据。该技术的优点是直接与中药的有效性和安全性相关,缺点是实验方法专属性强,通用性差。中药生物效应鉴定中的模型、参数、值、处理方法等关键问题,仍需要进一步解决。

参考文献:

[1]陈士林,庞晓慧,姚 辉,等.中药DNA条形码鉴定体系及研究方向[J].世界科学技术(中医药现代化),2011,13(5).

[2]张广春,赵 昕,陈明明.西红花的气相色谱法真伪鉴别分析[J].中医药导报,2011,(7).

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