猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗不同免疫方法试验

刘健鹏，刘　伟，郝万东

(1.榆林市动物疫病预防控制中心，陕西榆林 719000；2.神木县尔林兔镇畜牧兽医工作站，陕西神木 719300；3.绥德县动物疫病预防控制中心，陕西绥德 718000)



兽医临床

猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗不同免疫方法试验

刘健鹏1，刘伟2，郝万东3

(1.榆林市动物疫病预防控制中心，陕西榆林 719000；2.神木县尔林兔镇畜牧兽医工作站，陕西神木 719300；3.绥德县动物疫病预防控制中心，陕西绥德 718000)

为掌握不同厂家生产的猪瘟疫苗、猪O型口蹄疫疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗按说明剂量使用的免疫效果，找出适应当前生产中3种疫苗两两组合和3种同时分点注射的免疫方法，进行了不同方法免疫试验。结果表明，3种疫苗两两组合同时分点肌肉注射，互不干扰；3种疫苗同时分点肌肉注射，互不干扰，且可以促进高致病性猪蓝耳病疫苗的免疫效果，但个别猪会出现体温升高、拒食等反应。

猪瘟；口蹄疫；高致病性猪蓝耳病；疫苗；接种方法

猪瘟(Classical swine fever，CSF)、口蹄疫(Foot-and-mouth disease，FMD)和高致病性猪蓝耳病(Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome ，HP-PRRS)均为我国强制免疫的动物疫病，但3种疫苗分3次注射工作量大，费时耗力，因此临床上出现了免疫程序混乱、抗体水平达不到国家标准要求、不能起到有效保护作用的现象，猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫情形势仍然十分严峻。为了有效控制猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫情的发生和流行，准确掌握不同厂家生产的猪瘟疫苗、猪O型口蹄疫疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗按说明剂量使用的免疫效果，找出适应当前生产中3种疫苗两两组合和3种同时分点注射的免疫途径，在确保提高免疫质量的前提下，减少人力和财力的浪费，减少防疫工作的阻力和难度，科学指导动物防疫工作，榆林市动物疫病预防控制中心进行了猪瘟疫苗、猪O型口蹄疫疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗不同免疫方法试验，现将试验结果报告如下。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1试验用猪品种一致、体重相近、40日龄～50日龄、猪瘟、猪口蹄疫和高致病性猪蓝耳病抗体均为阴性的健康仔猪123头。

1.1.2器材体温计，消毒药品，生理盐水，采血器，注射器，针头，药棉，耳标，耳钳，实验室相关仪器和试剂等。

1.1.3疫苗猪瘟疫苗:分别为A集团生物疫苗有限公司、B动物保健品有限公司和C实业有限公司产品;猪O型口蹄疫疫苗:分别为金宇保灵生物药品有限公司、新疆天康畜牧生物技术股份有限公司和中农威特生物科技股份有限公司产品;高致病性猪蓝耳病疫苗:分别为中牧实业股份有限公司、杭州荐量兽用生物制品有限公司和杨凌绿方生物工程有限公司产品。

1.1.4诊断液猪瘟抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液，由中国农业科学院兰州兽医研究所提供；猪O型口蹄疫抗原、阳性血清、阴性血清、稀释液，由中国农业科学院兰州兽医研究所提供；猪繁殖与呼吸综合征抗体检测ELISA试剂盒，由北京天之泰生物科技有限公司提供。

1.2方法

1.2.1试验设计试验分两部分：其一是不同生产厂家的同一种疫苗按说明剂量单独使用免疫效果试验；其二是3种疫苗两两组合分点肌肉注射和3种疫苗同时分点肌肉注射免疫效果试验。试验所采用的检测方法和判定依据都严格按照国家标准，猪瘟和猪O型口蹄疫免疫抗体测定采用正向间接血凝试验法，高致病性猪蓝耳病病毒抗体测定采用ELISA。

1.2.2不同生产厂家的同一种疫苗免疫效果对比试验将健康猪随机分成3大组，猪瘟组30头，口蹄疫组30头，高致病性猪蓝耳病组23头，每个大组再随机分成3小组。

每头猪采集2 mL～3 mL血液，分离血清，进行猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病抗体检测，抗体水平检测结果阴性的猪只用于下一步的试验。

每个大组的3个小组分别注射不同生产厂家的同一种疫苗，注射方法和剂量参照生产厂家说明书进行。

猪瘟组和猪O型口蹄疫组在免疫后21 d后采血检测抗体，高致病性猪蓝耳病组在免疫后28 d后采血检测抗体。

1.2.33种疫苗两两组合和3种疫苗同时分点肌肉注射免疫效果试验将健康猪随机分成4组，每组10头，进行猪瘟、猪O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病抗体检测，抗体水平检测结果阴性的猪只用于下一步的试验。

第1组，先注射猪瘟疫苗(哈药集团生物疫苗有限公司生产)，7 d后再同时分点肌肉注射猪O型口蹄疫疫苗(新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产)和高致病性猪蓝耳病疫苗(杨凌绿方生物工程有限公司生产的灭活苗)。

第2组，先注射猪O型口蹄疫疫苗(中农威特生物技术股份有限公司生产)，再同时分点肌肉注射猪瘟疫苗(齐鲁动物保健品有限公司生产)和高致病性猪蓝耳病疫苗(杭州荐量兽用生物有限公司生产的灭活苗)。

第3组，先注射高致病性猪蓝耳病疫苗(中牧实业股份有限公司生产冻干苗)，再同时分点肌肉注射猪瘟疫苗(中牧实业股份有限公司生产)和猪O型口蹄疫疫苗(中农威特生物科技股份有限公司生产)。

第4组，同时分点肌肉注射猪瘟疫苗(齐鲁动物保健品有限公司生产)、猪O型口蹄疫疫苗(中农威特生物科技股份有限公司生产)和高致病性猪蓝耳病疫苗(杨凌绿方生物工程有限公司生产)。

按说明书剂量和部位注射疫苗。

在注射疫苗后21 d和28 d分别采集每头猪血液3 mL～5 mL，分离血清后按试剂盒说明书进行抗体检测。

2　结果

2.1单苗免疫抗体水平检测结果

2.1.1猪瘟疫苗组3个厂家生产的猪瘟兔化弱毒疫苗肌肉注射21 d后采血，通过正向间接血凝试验检测抗体，抗体水平都为1∶28。

2.1.2口蹄疫疫苗组3个厂家生产的O型口蹄疫疫苗肌肉注射21 d后采血，通过正向间接血凝试验检测抗体，抗体水平都为1∶28。

2.1.3高致病性猪蓝耳病疫苗组3个厂家生产的疫苗肌肉注射28 d后采血，通过ELISA检测抗体，中牧实业股份有限公司生产的高致病性猪蓝耳病冻干苗肌肉注射28 d后都能产生有效免疫抗体，而杨凌绿方生物工程有限公司和杭州荐量兽用生物制品有限公司生产的灭活苗肌肉注射28 d后检测不到有效免疫抗体。

2.2组合苗免疫抗体水平检测结果

2.2.1组合组第1组肌肉注射猪瘟疫苗21 d (注射口蹄疫苗和高致病性猪蓝耳病苗14 d)、28 d(注射口蹄疫苗和高致病性猪蓝耳病苗21 d)和36 d(注射口蹄疫苗和高致病性猪蓝耳病苗28 d)采血检测抗体，猪瘟抗体和猪O型口蹄疫抗体都为1∶28。检测不到高致病性猪蓝耳病有效免疫抗体。

2.2.2组合组第2组肌肉注射猪O型口蹄疫21 d(注射猪瘟疫苗和高致病性猪蓝耳病苗14 d)、28 d(注射猪瘟疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗21 d)和36 d(注射猪瘟疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗28 d)采血检测抗体，猪O型口蹄疫疫苗抗体水平都为1∶28；注射猪瘟疫苗14d检测抗体水平为1∶23～1∶28，21 d和28 d检测抗体水平都为1∶28；注射高致病性猪蓝耳病疫疫苗14 d和21 d检测不到有效免疫抗体，28 d都可以检测到有效免疫抗体。

2.2.3组合组第3组肌肉注射高致病性猪蓝耳病疫苗30 d(注射猪瘟疫苗和猪口蹄疫疫苗21 d)采血检测抗体，猪瘟和猪口蹄疫疫苗抗体水平都为1∶28；检测高致病性猪蓝耳病抗体，检出率为75%。

2.2.4组合组第4组3种苗同时分点肌肉注射后21 d和28 d采血检测抗体，猪瘟和口蹄疫疫苗抗体水平都为1∶28；21 d和28 d高致病性猪蓝耳病疫苗抗体检出率都为66.67%。

2.3免疫后的应激情况

3种疫苗两两组合同时分点肌肉注射，互不干扰。

3种疫苗同时分点肌肉注射，互不干扰，且可以促进高致病性猪蓝耳病疫苗免疫效果。

个别猪出现免疫副反应，10头试验猪注射疫苗后有2头体温升至41℃，并且拒食。

3　讨论

从单苗免疫效果来看，对于猪瘟疫苗而言，不同的3个疫苗生产厂家生产的猪瘟疫苗都可以使猪群产生有效免疫抗体。对于猪口蹄疫疫苗而言，不同的3个疫苗生产厂家生产的猪口蹄疫疫苗都可以使猪群产生有效免疫抗体。对于高致病性猪蓝耳病疫苗而言，冻干苗可以使猪群产生有效免疫抗体，灭活苗免疫检测不到有效免疫抗体。从疫苗组合免疫效果来看，3种疫苗两两组合同时分点肌肉注射，互不干扰。3种疫苗同时分点肌肉注射，互不干扰，且可以促进高致病性猪蓝耳病疫苗免疫效果，可以考虑应用推广。

陆国林等[1]的研究表明，对未实施程序化免疫的养猪场(户)和农村散养的生猪, 采用猪瘟弱毒疫苗、口蹄疫灭活疫苗、高致病性猪蓝耳病灭活疫苗分点同时接种的免疫方法是可行的。特木尔巴根等[2]的试验结果表明，O型口蹄疫、猪瘟和猪蓝耳病疫苗同时分点免疫注射，临床上3个试验点免疫猪无严重的不良反应，免疫抗体差异不显著。张长龙等[3]的试验结果表明，先免疫接种猪瘟疫苗，1 周后免疫接种口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗，二者有明显的协同促进作用，适宜在农村散户中使用；3 种疫苗同时分点注射，相互之间干扰较大，猪瘟病毒抗体产生时间推迟，不宜推广使用。黄文忠等[4]采用猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫多肽苗(或灭活苗)和高致病性猪蓝耳病灭活苗同时分点注射，结果发现3种疫苗联合免疫，临床上未发现严重的免疫副反应，对猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫多肽苗的免疫效果无明显的干扰或抑制作用，对高致病性猪蓝耳病和猪O型口蹄疫灭活苗免疫效果有显著的干扰或抑制作用。曹世祯等[5]的试验结果表明，猪瘟脾淋苗、猪O 型口蹄疫缅甸98 灭活疫苗(浓缩)和高致病性猪蓝耳病灭活苗同时分点注射，对猪瘟和猪O型口蹄疫产生的抗体水平无明显的免疫抑制或干扰作用，但对高致病性猪蓝耳病免疫效果有显著的抑制或干扰作用。

从本试验结果和上述参考文献的试验结果来看，猪瘟、O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗同时分点免疫注射时，3种疫苗相互之间会产生不同的影响，但各个试验结果均存在一定的差异，甚至有相反的试验结果出现。看来非常必要对猪瘟、O型口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗联合免疫程序进行深入的研究，摸索出3种疫苗联合免疫的标准化方案，以供全国参考应用。

[1]陆国林，陈伟杰，洪建伟，等.高致病性猪蓝耳病、猪瘟、口蹄疫疫苗分点同时接种免疫效果试验[J].中兽医医药杂志，2009(5)：28-30.

[2]特木尔巴根，李瑞刚，马立峰，等.猪蓝耳病、猪瘟和口蹄疫疫苗联合免疫效果评价[J].兽医导刊，2009(7)：32-33.

[3]张长龙，严宝英，贾文孝，等.猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗有效免疫试验初探[J].动物医学进展，2009，30(7)：101-103.

[4]黄文忠，徐志斌，吕粤，等.猪瘟、猪O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗联合免疫效果评价[J].云南畜牧兽医,2011(2):5-7.

[5]曹世祯，李景云，严建鹏，等.猪瘟猪O型口蹄疫高致病性猪蓝耳病疫苗联合免疫试验报告[J].当代畜牧，2012(7)：25-26.

Immune Effect Test Using Different Inoculation Methods of Classical Swine Fever,Foot-and-mouth Disease Type O and HP-PRRS Vaccines

LIU Jian-peng1，LIU Wei2，HAO Wan-dong3

(1.AnimalDiseasePreventionandControlCenterofYulinCity，Yulin,Shaanxi,719000,China；2.AnimalHusbandryandVeterinaryStationofErlintuTownShenmuCounty，Shenmu,Shaanxi,719300,China;3.AnimalDiseasePreventionandControlCenterofSuideCounty,Suide,Shaanxi,718000,China)

In order to understand the immune effects of classical swine fever vaccine,swine foot-and-mouth disease type O vaccine and highly pathogenic PRRS vaccine according to the manufacturer instructions,and find out the suitable combination immunization methods of three kinds of vaccines,the immune method experiments were carried out.The results showed that the combination of three kinds of vaccines by pairwise and equinox intramuscular injection and by three points at the same time injection,do not interfere with each other,and can promote the immune effect of high pathogenic PRRS vaccine,but individual pigs appeared immunological side effects.

Classical swine fever；Foot-and-mouth disease；Highly pathogenic PRRS；vaccine；inoculation method

2016-04-25

刘健鹏(1966-)，男，陕西绥德人，高级兽医师，硕士，主要从事动物疫病预防控制等方面工作。

S858.28;S852.52

B

1007-5038(2016)10-0116-03