冻融胚胎和冻融囊胚移植对分娩结局影响的比较

张雪

冻融胚胎和冻融囊胚移植对分娩结局影响的比较

张雪

目的探讨分析冻融囊胚移植对分娩结局的影响。方法比较1 715例冻融胚胎移植和228例冷冻囊胚移植后两组胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率、早产率、新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿发生情况。结果B组患者的胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率均优于A组（均P＜0.05），两组新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿情况比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论冻融囊胚移植技术是可以提高胚胎种植率，降低妊娠率、异位妊娠率，能够改善后期妊娠结局。

冻融囊胚；冻融胚胎；移植；分娩结局

1983年自从首例冷冻胚胎移植获得圆满成功以来，冻融胚胎技术得以迅速传播和发展，目前冻融胚胎技术已经逐渐成为我们人类辅助生殖技术中的一个重要技术[1]。胚胎的解冻移植技术可以解决因卵巢过度刺激综合症、子宫内膜异常等高风险不能进行自行移植的胚胎问题。此种技术不仅可以减少移植胚胎数目，还能增加积累妊娠率[2]。近些年，随着序贯培养技术的发展，冻融囊胚技术逐渐发展，人类已使囊胚培养和移植成为可能。冻融囊胚移植可以实现胚胎发育和子宫内膜的同步，能够提供一个更加接近子宫的着床环境，可以大大提高胚胎种植率和临床妊娠率，同时还能限制移植囊胚数目，既可以得到高的累积妊娠率，又能降低相关母婴并发症的发生率[3]。本研究通过对1 715例冻融胚胎移植和228例冻融囊胚移植病例的回顾性分析，以探讨冻融胚胎和冻融囊胚对移植周期和分娩结局的影响。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取2014年7月～2016年7月由我院生殖医学研究中心收治的1 715例冻融胚胎移植和228例冻融囊胚移植患者；将1 715例冻融胚胎移植患者定为A组，228例冻融囊胚移植患者定为B组；回顾性分析两组患者的临床资料以及产后资料；其中A组年龄22～36岁，平均（28.5±5.7）岁；B组年龄23～35岁，平均（29.5±4.8）岁；本研究纳入标准：（1）两组患者均采用长方案控制性超促排卵；（2）患者的年龄均在38周岁以内；两组间患者的不孕年限、年龄、子宫内膜厚度、基础性激素水平以及体质量指数（BMI）等资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 胚胎及囊胚的评分 依据胚胎的卵裂球数目和碎片比例将第3 d的卵裂期胚胎分为4个等级[4]：Ⅰ级（碎片比例在5%以内），Ⅱ级（碎片比例5%～20%），Ⅲ级（碎片比例20%～50%），Ⅳ级（碎片比例在50%以上）；优质胚胎定义为6/Ⅱ级以上；囊胚分级依据文献[5-6]，优质囊胚定义为3BB（囊腔完全占据胚胎的总体积，内细胞团数量少，排列松散，滋养层细胞少，结构松散。）以上；依据知情同意原则，选取患者第3 d，剩余3枚以上5/Ⅲ级胚胎进行囊胚培养，并对第5 d 3BC（囊腔完全占据胚胎的总体积，内细胞团数量少，排列松散，滋养层细胞稀疏，大细胞少。）或3CB（囊腔完全占据胚胎的总体积，内细胞团数量很少，滋养层细胞稀疏，结构松散。）以上囊胚和第3 d优质胚胎进行冷冻；囊胚及卵裂期胚胎均使用玻璃化冷冻法，其中囊胚在冷冻前进行激光打孔人工皱缩。

1.2.2 胚胎及囊胚的冷冻与复苏移植 囊胚和胚胎的冷冻采用玻璃化冷冻方法：在常温下（25 ℃左右）将囊胚和胚胎转移至BS平衡液（胚胎冷冻缓冲液）中2 min，然后再转移至ES平衡液（胚胎冷冻平衡液）中8 min，当保护剂进入胚胎后，使其恢复至原体积大小，再将其转移至VS液（胚胎冷冻液）中1 min，并在30 s内从VS液中转移至冷冻载体，最后迅速侵入液氮内保存。Ⅲ级及以上的囊胚在冷冻前行激光打孔人工皱缩。复苏时将囊胚和胚胎从液氮取出，浸入TS（解冻液）平衡液中3 min，然后转移至DS（稀释液）平衡液中3 min以及WS（清洗液）平衡液中5 min，最后转移至囊胚培养液内。冻融胚胎存活细胞数目在1/2以上定义为存活，并培养2 h后进行移植。

1.3 观察指标

冻融胚胎和冻融囊胚的妊娠结局：胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率、早产率；新生儿状况：新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组患者胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率、早产率比较

B组患者的胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率、早产率分别为 19.7%（45/228）、50.9%（116/228）、1.1%（26/228）、20.6%（47/228）， 均 优 于 A组 的 39.7%（680/1 715）、30.0%（514/1 715）、4.6%（79/1 715）、21.1%（362/1 715），差异均具有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 两组患者胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率、早产率比较

2.2 两组新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿情况比较

B组新生儿缺陷率、男女比例、死胎率、巨大儿率分别为0.9% （2/228）、1.19%（124/104）、0.0%（0/228）、1.3%（3/228），均与A组0.6%（10/1 715）、1.06%（881/834）、0.0%（0/1 715）、1.2% （20/1 715）比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表2。

表2 两组新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿情况比较

3 讨论

囊胚与胚胎的冷冻保存是人类辅助生殖必要且高效的技术。在体外将囊胚与胚胎冷冻保存，并通过合理的限制胚胎移植数目（3个以内），不仅能显著降低多胎妊娠和分娩的发生[7]，还可以为出现流产、想要二胎、首次移植失败等情况的患者提供再移植的机会，同时还能大大降低卵巢过度刺激综合征的发生[8]。

目前阶段在辅助生殖领域广泛使用的低温冷冻技术主要包括慢速冷冻和玻璃化冷冻两种。玻璃化冷冻技术是指使用一种高浓度的冷冻保护剂实现快速降温，在快速降温使溶液变得十分坚固、粘稠，从而形成玻璃样物质以减少或避免细胞内冰晶的形成，进而降低冰晶给细胞带来的损伤[9-10]。与慢速冷冻技术相比，玻璃化冷冻技术主要有以下优点：（1）操作简单、费用低、耗时短；（2）效果好，胚胎存活率高；（3）无冰晶形成，对细胞损伤小。

自然状态下早期胚胎首先在输卵管中停留发育，当到达囊胚期时才开始进入宫腔着床。对于一些不孕不育患者，可在体外利用囊胚培养技术先行囊胚培养，等囊胚形成后再人工将其植入子宫腔内进行着床，从而使胚胎发育和子宫内膜趋于同步。同时随着辅助生殖技术的不断发展，在体外发现染色体异常或发育潜能差的胚胎后，可在其发育到囊胚之前便使其停止发育。这种体外的囊胚期胚胎培养移植的应用可以帮助我们进一步筛选发育潜能优质的胚胎，从而可以提高或改善后期的妊娠结局。

本研究结果显示，B组患者的胚胎种植率、妊娠率、异位妊娠率均优于A组，提示冻融囊胚移植技术是可以改善后期妊娠结局的。同时我们又对比分析了两组新生儿情况，结果显示两组新生儿缺陷、男女比例、死胎、巨大儿情况比较差异并无明显区别。总之，冻融囊胚移植技术是可以提高胚胎种植率，降低妊娠率、异位妊娠率，能够改善后期妊娠结局。

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Comparison of Effects of Frozen Thawed Embryos and Frozen Thawed Blastocysts on Delivery Outcome

ZHANG Xue Reproductive Medicine Center, Xuzhou Maternal and Child Health Care, Xuzhou Jiangsu 221000, China

ObjectiveTo investigate the analysis of the influence of the freeze-thaw blastocyst transplant outcome for delivery.Methods1 715 cases of frozen thawed embryo transplantation and 228 cases of the two groups after transplantation of frozen blastocysts implantation rate, pregnancy rate, ectopic pregnancy rate, premature birth, birth defects, the proportion of men and women, stillbirth, fetal macrosomia incidence.ResultsIn group B patients grow rate and pregnancy rate of embryo, ectopic pregnancy rate were better than that of group A (P＜0.05), two groups of birth defects, the sex ratio, stillbirth, macrosomia situation compare diferences and no signifcant diference (P＞0.05).ConclusionFreeze-thaw blastocyst transplant technology is can increase the rate of embryo planting, decrease the rate of pregnancy, ectopic pregnancy rate, can improve the late pregnancy outcomes, has a certain use value.

Freeze-thaw blastocyst, Freezing and thawing embryo, Transplantation, Delivery outcomes

R714.8

A

1674-9308（2016）36-0081-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.36.044

徐州市妇幼保健院生殖医学中心，江苏 徐州 221000