大理地区女性人乳头瘤病毒感染亚型分析

李正金，杨锡彤，毕磊，王光明

(大理大学附属医院病理科，云南 大理 671000)

大理地区女性人乳头瘤病毒感染亚型分析

李正金，杨锡彤，毕磊，王光明

(大理大学附属医院病理科，云南 大理 671000)

目的 了解云南省大理地区女性人乳头瘤病毒(HPV)的感染率、感染亚型、感染年龄等特点。方法应用分子导流杂交技术对2012年4月1日至2015年8月31在我院体检中心和妇产科门诊就诊的女性患者3 292例行HPV 21种亚型检测，并对各个年龄段的感染情况进行分析。结果3 292例样本中，检测到HPV阳性445例，阳性率为13.52%，共检出除低危型HPV43型外的20种亚型；感染高危型411例，占92.36%；低危型53例，占11.91%；高危型和低危型混合感染19例，占4.27%；感染高危型病例中，有两型或者两型以上感染者70例，占高危型感染的17.03%；感染低危型病例中，有两型或者两型以上感染者4例，占低危型感染的7.55%；在20种HPV亚型感染中，HPV16型阳性率最高(26.29%)，其次为HPV52亚型(23.15%)。各个年龄段中以＞60岁以上感染率最高(22.95%)，其次为≤20岁以下的感染(18.18%)，不同年龄段样本阳性率差异有统计学意义(P=0.030)。结论云南省大理地区人乳头瘤病毒的感染分布具有异质性，年龄段感染率60岁以上最高，20岁以下次之，因此应加强年轻女性人群HPV感染的宣传和筛查力度。

大理地区；人乳头瘤病毒；高危型；低危型；分子导流杂交

宫颈癌是妇女第二大常见恶性肿瘤，在一些发展中国家和地区的发病率在女性恶性肿瘤中占第一位[1]。中国每年有约10万新发病例，占世界新发病例总数的大约1/5，每年约有3万妇女死于宫颈癌[2]。目前，对适龄女性进行妇科相关筛查是预防和减少子宫颈癌发生的主要手段。流行病学和基础研究发现在几乎所有宫颈癌的标本中均可找到人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)的足迹。进一步研究显示30岁以上的妇女持续感染HPV 8～24个月就有可能发生宫颈癌前病变-宫颈上皮内瘤变，8～12年后可发展为浸润癌[3-4]。目前西方发达国家已经在进行疫苗的开发及其临床应用的研究，但是有研究表明HPV的亚型分布具有明显的年龄和地区特点，因此疫苗的临床应用需要考虑年龄和地区分布的异质性。本研究回顾分析云南省大理地区到大理大学附属医院体检中心和妇产科门诊就诊的3 292例女性患者的HPV感染情况，从而进一步了解大理地区HPV的感染特点，包括各种亚型的分布、年龄分布，以便对相关感染及病变的防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2012年4月1日至2015年8月31日到大理大学附属医院体检中心和妇产科门诊就诊的女性患者标本共3 292例，年龄17～81岁。患者均知情同意。

1.2 标本采集与处理 月经第10～18天均由妇产科医生以专用宫颈脱落细胞采集器采集细胞。

1.3 试剂仪器 PCR仪和杂交仪(荧光定量基因扩增PCR检测系统TL988型和PCR基因扩增热循环仪DTC型)均来自西安天隆科技有限公司(西安，中国)，导流杂交技术及其配套试剂均购自凯普生物科技有限公司(广州市，中国)，对21中常见的HPV基因型进行分型检测，包括15种高危型别：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和6种低危型别：HPV6、11、42、43、44，CP8304(81)，其中中国人常见的基因型HPV53，16和CP8304(81)也在检测范围内。

1.4 检测流程 严格按照凯普生物科技有限公司“人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒(杂交试剂)”的说明书进行操作，简单描述如下：样本DNA提取，PCR扩增(每次扩增分别设置一个阳性和阴性对照)，导流杂交，酶标显色，结果判读，根据芯片是HPV基因型分布相应位点判断检测样本的基因型。

1.5 统计学方法 应用SPSS10.0统计学软件进行数据分析，不同年龄段间的发生率比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 一般情况 共检测3 292例患者，其中HPV感染阳性患者445例，阳性率为13.52%。共检测出20种HPV亚型，包括15种高危型HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和5种低危型HPV 6、11、42、44，CP8304(81)，只有HPV43型亚型未检出，感染高危型占92.36%；低危型占11.91%。

2.2 各个年龄段感染情况 在3 292例患者中，除9例患者年龄不清楚除外，以≥60岁感染率最高(22.95%)，其次为≤20岁的感染(18.18%)，最低阳性率为30～40岁年龄段(12.18%)，各个年龄段阳性率比较差异有统计学意义(P=0.030)，见表1。

表1 各个年龄段HPV阳性情况

2.3 单一感染与多重感染情况 单一感染占88.54%，两型或者两型以上混合感染占21.57%，其中仅仅高危两型或者两型以上混合感染占总感染数的16.40%，低危两型或者两型以上混合感染占总感染数的0.90%，高危和低危两型或者两型以上混合感染占总感染数的4.27%，见表2。

表2 单一和多重感染情况(n=445)

2.4 HPV亚型感染分布 高危亚型感染最多的是HPV16亚型，阳性率为(26.29%)，其次为HPV52亚型(23.15%)；低危亚型感染中以HPV81亚型最高(5.84%)，各种亚型的感染情况，见表3。

表3 HPV亚型感染分布(n=445)

2.5 各个年龄段感染亚型情况 在3 292例患者中，有9例患者年龄不清楚除外，其余3 283例患者中，受检患者的年龄以30～50岁居多，占所有检测对象的73.80%。在各个年龄段各种感染亚型的分布具有异质性，见表4。

表4 各个年龄段HPV亚型感染分布(例)

3 讨 论

宫颈癌一般由HPV，尤其是高危亚型持续感染而形成，由宫颈上皮内瘤变发展为浸润癌可长达8～12年[4]。要预防宫颈癌的发生，及早发现、诊断和治疗就显得尤其重要。因此，了解本地区HPV感染情况、亚型分布及其年龄特点对于有效地开展宫颈癌的筛查和以后相关疫苗的使用具有重要的意义[5]。

有研究报道子宫颈癌在两个年龄段(35～39岁和60～64岁)为发病高峰[6-7]，而在我们的研究中显示以≥60岁年龄段感染率最高(22.95%)，其次为≤20岁年龄段的感染率(18.18%)，但是该研究中对女性HPV感染的检测主要集中在30～50岁的人群(73.80%)，而20岁以下病例数较少，无法真实地反应该年龄段的HPV实际感染率。因此需要加强针对所有女性，尤其是年龄在20岁以下的女性的宣传、筛查和防治力度。HPV感染以单一型为主(79.10%)，但是多重感染是否更容易促发宫颈癌仍存在争议，需要加大对HPV感染阳性的随访和研究。

在我们针对大理地区人群的研究中，高危亚型感染最多的是HPV16亚型(26.29%)，其次为HPV52亚型(23.15%)；低危亚型感染中以HPV81亚型最高(5.84%)，其感染亚型与中国人常见的基因型HPV 53、16和CP8304不完全相符，也与国内的有报道的地区，以及与日本、泰国、南非等地的优势感染亚型均不相同[4，6-9]。因此可以说明HPV感染率的高低、不同种族和地区HPV感染的亚型具有一定的异质性，主要取决于病毒因素、宿主因素和环境因素[10-12]。在临床治疗和疫苗开发上，需要考虑不同地区感染亚型的分布。

综上所述，云南省大理地区HPV的感染亚型以及年龄段的感染率和感染亚型均具有异质性，感染人群以年轻育龄阶段的女性居多，但是也呈现了年轻化的特点，因此应该加大对年轻女性群体HPV感染的宣传和筛查力度。

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Research on the genotype distribution of human papillomavirus infection among female in Dali area.

LI Zheng-jin, YANG Xi-tong,BI Lei,WANG Guang-ming.Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Dali University,Dali 671000,Yunnan,CHINA

ObjectiveTo investigate the genotype distribution,infection rate and age characters of human papillomavirus(HPV)infection among females in Dali area of Yunnan Province.MethodsThe genotype analysis was carried out by molecular hybridization in 3 292 female patients with HPV infection,who admitted to Medical Examination Center and Department of Gynecology&Obstetrics in our hospital from 1 April 2012 to 31 August 2015,and the infection situation of different age groups were also analyzed.ResultsOf 3 292 cases,445 cases were infected by HPV, with the positive rate of 13.25%.All the subtypes of HPV except HPV43 were detected.411(92.36%)positive cases belonged to high-risk type HPV infection and 53(11.91%)positive cases belonged to low-risk type HPV.Multi-HPV-genotype infection including high-risk type and low-risk type was observed in 19(4.27%)cases.Of 411 cases of high-risk type,70(17.03%)cases had two or more than two types.In 53 cases of low-risk type,4(7.55%)cases had two or more than two types.In 445 cases infected with HPV,the most common HPV genotypes were HPV-16(26.29%)and HPV-52 (23.15%).The highest positive rate was＞60 years old category(22.95%),followed by＜20 years old category(18.18%). There were significant differences in the positive rate among the various age groups(P=0.03).ConclusionInfection distribution of HPV in Dali region of Yunnan Province has heterogeneity.The highest positive rate was＞60 years old category,followed by＜20 years old category.We should enhance the publicity and the screening of HPV in young women.

Dali area;Human papillomavirus(HPV);High-risk type;Low-risk type;Molecular hybridization

R730.261

A

1003—6350（2016）11—1815—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.11.030

2015-12-11)

王光明。E-mail：gmwang1991@hotmail.com