老年肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞的临床及意义

姚　斓　王燕嬉　张　伟

(白城医学高等专科学校，吉林　白城　137000)



老年肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞的临床及意义

姚斓王燕嬉张伟1

(白城医学高等专科学校，吉林白城137000)

〔摘要〕目的探讨老年肺癌患者T淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞水平及临床意义。方法该校附属医院80例老年肺癌患者作为观察组，回顾分析外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测结果，与另选的80例健康受检者(对照组)进行对比分析，并于术后20 d复查肺癌患者的外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞，对比缓解者与未缓解者的检查结果。结果外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞表达水平检测中，观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平较对照组明显降低(P<0.05)，CD8+表达水平明显高于对照组(P<0.05)。观察组于术后20 d复查T细胞亚群和NK细胞，根据结果分为两组进行分析，发现缓解组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表达均较化疗前明显上升，CD8+表达显著降低(P<0.05)。而未缓解组各项指标化疗前后无明显变化(P>0.05)。结论NK细胞与外周血T淋巴亚群对诊断、评价肺癌的疗效、判断预后具有重要价值。

〔关键词〕肺癌；T 淋巴细胞；自然杀伤细胞

肺癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势，生存率只有10%~20%，预后差〔1〕。细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的重要机制，T细胞和自然杀伤(NK)细胞是判断和监测免疫状态的重要指标〔2〕。本研究旨在探讨肺癌患者 T 淋巴细胞亚群和 NK 细胞变化及临床意义。

1资料与方法

1.1一般资料2010年1月至2014年12月在我校附属医院住院确诊的肺癌患者80例为观察组，均经病理学或细胞学确诊。其中男48例，女32例，年龄60~78〔平均(67.7±4.6)〕岁。另选我院门诊健康体检者80例为对照组，均无免疫系统疾病或使用过免疫抑制剂。其中男47例，女33例，年龄60~79〔平均(68.5±5.4)〕岁。两组受检者性别、年龄无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法清晨采集所有体检者空腹静脉血2~3 ml，以乙二胺四乙酸三钾(EDTA-K3)抗凝的新鲜血备用，本实验采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(S-P法)。将标本与试剂摇匀，所有TruCOUNT绝对计数管中准确加入20 μl MultiTEST四色试剂盒50 μl全血，充分混匀，15 min后加入450 μl流式细胞(FACS)溶血液，充分混匀。阴暗处再15 min后，向另3个TruCOUNT绝对计数管中分别加入50 μl TruCOUNT Control Beads作为绝对技术质控，运行MultiTEST程序上机监测相关指标〔3〕。观察组患者于术后20 d抽取用肝素抗凝的外周血，复查T细胞亚群和NK细胞。

1.3统计学方法应用 SPSS17.0统计进行t检验。

2结果

2.1两组T淋巴细胞亚群及NK细胞检测结果比较观察组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值与NK较对照组明显降低(P<0.05)，CD8+表达水平明显高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1　两组T淋巴细胞亚群及NK细胞检测结果对比±s,n=80)

与观察组比较:1)P<0.05

1武警白城市支队卫生队

第一作者：姚斓(1982-)，女，硕士，讲师，主要从事生物化学与分子生物学研究。

2.2化疗前后的肺癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞变化观察组患者于术后20 d抽取用肝素抗凝的外周血，复查T细胞亚群和NK细胞。根据结果分为两组进行分析，如表2所示，缓解组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表达均较化疗前明显上升，CD8+表达显著降低(P<0.05)。而未缓解组各项指标化疗前后无明显变化(P>0.05)。

表2　化疗前后的肺癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞变化±s)

与化疗前比较：1)P<0.05

3讨论

肺癌也称支气管肺癌，大多起源于支气管黏膜上皮。据世界卫生组织资料报告，1996年肺癌病例数约有130万。在中国，城市肺癌死亡率达118.08%〔4〕。城市的工业化污染、废气排放及吸烟等不良的生活习惯是使肺癌发病率急剧上升的重要原因，也正因为该病的发病人群趋于年轻化，而几乎所有国家中男性肺癌发病率和死亡率均高于女性。癌肿的致病机制主要为肿瘤产生或分泌大量免疫抑制因子(TDSF)，导致NK细胞活性降低及T细胞亚群异常和比例失调〔5〕。

在细胞免疫中T淋巴细胞是机体免疫防御系统的重要组成部分，各T淋巴细胞亚群在正常机体血液中，通过相互作用和协调，来维持机体的正常免疫功能。对T亚群进行检测是临床上观察机体细胞免疫的重要方法之一〔6〕，T细胞及亚群在正常情况下处于动态平衡状态，免疫功能稳定有赖于辅助性T细胞(Th)与抑制性T细胞比值的协调〔7〕。CD4 主要表达于Th细胞，是Th细胞受体(TCR)识别抗原的共受体，与主要组织相容复合体(MHC)Ⅱ类分子的非多肽区结合，参与辨识肿瘤细胞分泌的可溶性抗原，参与细胞毒T细胞、巨噬细胞、B细胞和NK细胞的激活，杀伤肿瘤细胞。CD8+T细胞通过表面的MHCⅠ分子与CD4等其他免疫细胞的MHCⅡ分子结合，从而识别其他免疫细胞表面结合的抗原物质。细胞正常情况下CD4+/CD8+比值>1.4，若CD4+/CD8+比值或T细胞总数发生变化时，反映机体免疫功能低下，即可引起免疫调节紊乱，易发生肿瘤或自身免疫疾病〔8〕。

NK细胞来源于骨髓的大颗粒细胞，是T细胞的调节细胞，有自发溶解肿瘤细胞的能力，在机体中对肿瘤细胞具有高度细胞毒性作用的淋巴炎细胞，对细胞维持和调节细胞免疫和体液免疫中有作用，在体内相对较少〔9〕。

本研究说明肺癌患者免疫功能受到不同程度的抑制，降低了清除肿瘤细胞的能力，无法有效抑制肿瘤持续生长〔10〕。由于NK细胞对肿瘤有直接杀伤作用，检测结果减少表明肺癌患者免疫功能降低、紊乱及处于免疫抑制状态。本研究提示，若化疗有效，则能在一定程度上改善患者免疫功能，降低肿瘤的负荷〔11〕。

综上所述，外周血中T细胞亚群和NK细胞活性的检测可帮助监测免疫功能，为肺癌的诊断和疗效判断等提供参考依据，对估计预后有重要意义。

4参考文献

1邢应如，孟阿娜，阮建华.570例肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的分析研究〔J〕.中国当代医药，2013；20(11)：93-4.

2Yachida S，Zhong Y，Patrascu R，etal.Establishment and characterization of a new cell line，A99，from a primary small cell carcinoma of the pancreas〔J〕.Pancreas，2011；40(6)：905-10.

3江金华，严汀华，卢德万，等.外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞检测在肺癌诊断及治疗中的意义〔J〕.肿瘤研究与临床，2013；25(2)：90-3.

4刘坚，宋泽庆.肺癌的研究现状〔J〕.广东医学院学报，2011；29(5)：536-9.

5吴姗姗，严峰，邓玉玲，等.小细胞和非小细胞肺癌晚期患者CD3+、CD4+及CD3+CD8+T淋巴细胞亚群的差异〔J〕.中国免疫学杂志，2015；31(1)：114-6.

6Tomasello E，Pollet E，Vu Manh TP，etal.Harnessing mechanistic knowledge on beneficial versus deleterious IFN-I effects to design innovative immunotherapies targeting cytokine activity to specific cell types〔J〕.Front Immunol，2014；5(6)：526.

7张瑞萍，徐冰心，王社论，等.晚期非小细胞肺癌调节性T细胞与预后的关系〔J〕.现代肿瘤医学，2013；21(3)：521-4.

8任林广，张健，徐广伟，等.肺癌患者外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义〔J〕.中国实验诊断学，2013；17(10)：1873-4.

9Jiang JT，Shen YP，Wu CP，etal.Increasing the frequency of CIK cells adoptive immunotherapy may decrease risk of death in gastric cancer patients〔J〕.World J Gastroenterol，2010；16(48)：6155-62.

10邹静，刘斌，陈雪华，等.肺癌患者外周血 T 淋巴细胞亚群变化特点及临床意义〔J〕.中国免疫学杂志，2010；26(11)：1016-20.

11黄宏君，周燕玲，吴白平.肺癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性分析及临床意义〔J〕.实用预防医学，2010；17(1)：151-2.

〔2015-10-25修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)

通讯作者：张伟(1980-)，男，主治医师，主要从事全科医学临床工作。

基金项目：吉林省教育科学“十二五”规划课题(No.GH150639)

〔中图分类号〕R734

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)04-0860-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.04.042