191株血培养病原菌分布及其耐药性分析

周洪经，冯冉冉，张丽霞，张立



191株血培养病原菌分布及其耐药性分析

周洪经，冯冉冉，张丽霞，张立

[摘要]目的：了解血培养标本中常见病原菌的分布及其耐药情况，为临床合理使用抗生素提供科学依据。方法：采用法国生物梅里埃公司BACT/ALERT 3D全自动血液培养仪培养，VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对培养阳性标本进行细菌鉴定以及药敏实验，药敏结果采用CLSI 2012年标准判断。结果：2347例血培养标本中分离病原菌191株，阳性率为8.14%。革兰阳性球菌共78例，占40.84%，革兰阴性杆菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。数量最多的四位病原菌依次为大肠埃希菌(25.13%)、凝固酶阴性葡萄球(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黄色葡萄球菌(7.33%)。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率分别为67.57%和42.86%；产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为60.47%和20.83%。结论：血培养中病原菌种类复杂，以肠杆菌和葡萄球菌为主，主要病原菌耐药情况严重。

[关键词]血培养； 病原菌； 耐药性

随着抗生素的广泛应用以及各种侵袭性操作，血行感染在医院中的发生率越来越高，严重威胁病人生命。血液中病原菌培养是菌血症和败血症诊断和治疗的重要依据，因此对血培养中病原菌分布和耐药性分析至关重要。本文对我院2014年1月-12月血培养阳性标本的病原菌分布及耐药性进行分析，以期为临床正确合理使用抗生素提供重要依据。

1材料与方法

1.1材料(1)标本来源:收集本院2014年1月-12月期间住院患者血培养标本共2 347例，剔除同一患者相同部位的重复标本，分离菌株191株。(2)质控菌株：大肠埃希菌(ATCC25922)，肺炎克雷伯菌(ATCC700603)，铜绿假单胞菌(ATCC27853)，金黄色葡萄球菌(ATCC29213)，粪肠球菌(ATCC29212)，以上标准菌株均购自卫生部。(3)仪器与试剂：BACT/ALERT 3D全自动血液培养仪(梅里埃)，VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统(梅里埃)，比浊仪(densichek plus)，血培养瓶，培养基。药敏方法及判读标准参考CLSI 2012年标准。

1.2方法(1)无菌采集新生儿、儿童血液1～5ml注入儿童瓶，无菌采集成人血液5～10ml注入成人需氧瓶和厌氧瓶，混匀后立即送检。(2)将血培养瓶放入BACT/ALERT 3D全自动血液培养仪培养，仪器报警提示标本报告阳性，涂片革兰染色镜检细菌；接种于血琼脂培养皿、巧克力培养皿、麦康凯培养皿，放置在35℃，5%CO2环境中培养18～24 h，如有细菌生长，按仪器要求操作做鉴定和药敏。对于培养5 d报告阴性的培养瓶，转种于血琼脂培养皿，在35℃，5%CO2环境中培养48 h仍无细菌生长者，报告“无细菌生长”[1]。(3)细菌鉴定与药敏实验：VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统，药敏检测结果MIC法，采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2012年标准判读。

1.3统计学方法采用WHONET 5.6软件进行统计学结果分析。

2结果

2.1血培养分离病原菌分布情况本次共检测血培养标本2347例，分离病原菌191株，阳性率为8.14%。革兰阳性球菌共78例，占40.84%；革兰阴性杆菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。主要病原菌依次为大肠埃希菌(25.13%)、凝固酶阴性葡萄球菌(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黄色葡萄球菌(7.33%)、场球菌(6.81%)、鲍曼不动杆菌(5.76%)。血培养中细菌分布见表1。

2.2主要病原菌科室分布情况血培养病原菌检出率内科最高为54.45%(104/191),其中以大肠埃希菌检出率最高为27.88%(29/104)，其次为凝固酶阴性葡萄球菌检出率为20.19%(21/104)；外科为26.18%(50/191),以大肠埃希菌检出率最高为26%(13/50)；ICU为19.37%(37/191)，以鲍曼不动杆菌检出率最高为18.92%(7/37)。血培养中主要病原菌科室分布，见表2。

表1　血培养中主要病原菌分布及构成

表2　不同科室血培养中主要病原菌分布 (例)

2.3主要革兰阳性菌对抗生素耐药情况在革兰阳性菌中，凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对青霉素G和红霉素耐药率较高，未发现对利奈唑胺和万古霉素耐药的菌株，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率分别为67.57%和42.86%。主要葡萄球菌耐药率，见表3。

表3　主要革兰阳性菌耐药率(%)

2.4主要革兰阴性杆菌对抗生素耐药情况在106株革兰阴性菌中，48株大肠埃希菌中产ESBLs的菌株有30株，占60.47%(30/48)；24株肺炎克雷伯菌中产ESBLs的菌株有5株，占20.83%(5/24)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星耐药率较低，未发现对亚胺培南和美洛培南耐药的菌株，见表4。

表4　主要革兰阴性菌耐药率(%)

3讨论

本资料2 347例血培养标本中分离革兰阳性菌191株，阳性率为8.14%，这与有关报道不符[2]，可能与标本采集时间、用药情况、培养条件及不同地区之间存在差异有关。从全院血培养病原菌分布可见，革兰阳性球菌共78例，占40.84%；革兰阴性杆菌106例，占55.50%；真菌7例，占3.66%。主要病原菌依次为大肠埃希菌(25.13%)、凝固酶阴性葡萄球菌(19.37%)、肺炎克雷伯菌(12.57%)、金黄色葡萄球菌(7.33%)、肠球菌(6.81%)、鲍曼不动杆菌(5.76%)。与卫生部细菌耐药监测网2011-2012年全国血流感染病原菌分布有差异[3]，原因可能与我院患者科室分布有关，多集中于内科，占54.45%，这可能与内科患者伴有呼吸道、心血管、结核、肿瘤等基础疾病有关，另外内科患者使用抗生素、激素、免疫抑制剂以及放疗、化疗、介入等治疗手段，更容易引起病原菌的感染，发生菌血症。内科病原菌分离率最高，内、外科均以大肠埃希菌检出率最高，而ICU最常见的病原菌为鲍曼不动杆菌，这可能与院内感染有关。

从血培养主要病原菌耐药分析可见，革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主。凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药率较高，分别为67.57%和42.86%。本研究未发现耐万古霉素、利奈唑胺葡萄球菌，因此，临床用药仍可选用万古霉素、利奈唑胺，这一结果符合卫生部细菌耐药监测网2011-2012年血流感染耐药监测结果[4]。革兰阴性菌主要以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主，ESBLs阳性率分别为60.47%和20.83%，这一结果要高于国外的某些国家[5-6]。ESBLs是由质粒介导，能不同程度的水解灭活β-内酰胺酶类抗生素如青霉素、头孢菌素等，并可以被β-内酰胺酶抑制剂如克拉维酸抑制的酶，这是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药的主要机制[7]。本次药敏分析结果中未发现对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，故对于血流感染的患者，碳青霉烯类抗生素为首选药物[8]。

血培养中真菌的检出率为3.67%，以白色念珠菌为主，由真菌引起的真菌血症常为医源性，继发于大量抗菌药物的应用、手术、静脉留置导管等[9]。

综上分析，血培养中病原菌种类多，且主要病原菌耐药情况严重，越来越多的同一菌株携带多种耐药基因现象的发现，提示我们要合理使用抗生素，减少耐药已成为我国乃至全世界的共同需求！

[参考文献]

[1]蒋蒸群,卫国,倪语星.应用全自动血培养仪提高血液、无菌体液培养阳性率[J].中华医学检验杂志，1999,2(2):71-73.

[2]马均宝，黄广强，吴智刚，等.2010-2011年血液感染病原菌分布及耐药分析[J].中华医院感染学杂志，2014,24(12)：2893-2895.

[3]马序竹，吕媛，郑波.卫生部全国细菌耐药监测网2011～2012年血流感染细菌耐药监测[J].中国临床药理学杂志，2012,28(12):927-932.

[4]宋娟，华川，于颖，等.血培养标本8223例中病原菌菌群分布及耐药分析[J].解放军医药杂志，2013,25(1)：60-66.

[5]Farrell DJ,Tumidge JD,Bell J,et al.The in vitro evaluation of tigecycline tested against pathogens isolated in eight countries in the Asia Western Pacific region(2008)[J].J Infect,2010,60:440-451.

[6]Gales AC,Castanheira M,Jones RN,et al.Antimicrobial resistance among Gram-negative bacilli isolated from Latin America: results from SENTRY Antimicrobial Surveillance Program(Latin America, 2008-2010)[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2012,73:354-360.

[7]魏泽庆，沈萍，陈云，等.Mohnarin2011年度报告：血流感染细菌构成及耐药[J].中华医院感染杂志，2012,24(22):5497-5502.

[8]Kaiser RM,Castanheira M,Jones RN,et al.Trends in Klebsiella pneumonia carbapenemase positive K.pneumonia in US hospitals: report from the 2007-2009 SENTRY Antimicrobial Surveillance Program[J].Diagn Microbiol Infect Dis,2013,76(3)：356-360.

[9]曹彬，王珊珊，郭萍，等.血培养标本的病原菌构成及耐药性分析[J].中华医院感染杂志，2010,9(20)：1319-1322.

[作者单位] 天津市海河医院 检验科,300350

·论著研究·

Analysis on distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in blood culture

ZHOUHong-jing,FENGRan-ran,ZHANGLi-xia,etal.

(HaiheHospitalofTianjin,Tianjin300350,China)

[Abstract]Objective：To analyze the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in blood culture, and provide a scientific basis for accurate clinical use of antibiotics.Methods：Blood was cultured by using BACT/ALERT 3D automatic blood culture instrument.Positive blood culture for bacterial was identified,drug sensitivity tests were conducted by using VITEK 2 Compact automatic,and drug susceptibility results were analyzed by using CLSI 2012 standard.Results：191 strains of pathogenic bacteria were detected from 2347 cases of blood culture.The positive rate was 8.14%, and there were 78 strains of Gram-positive bacteria (40.84%),106 strains of Gram-negative bacteria (55.50%),and 7 strains of fungi (3.66%).The top four were Escherichia coli (25.13%),coagulase-negative staphylococci(19.37%),Klebsiella pneumonia(12.57%) and Staphylococcus aureus(7.33%).The incidences of MRSCN and MRSA were 67.57% and 42.86%.The extended spectrumβ lactamases (ESBLs) positive rates of E.coli and K.pneumoniae were 60.47% and 20.83%.Conclusion：Pathogenic bacteria from blood culture are complex in variety,most of which are Enterobacteraceae and Staphylococcus spp.The situation of drug resistance to main pathogenic bacteria is serious.

[Key words]Blood culture; Pathogenic bacteria; Drug resistance

收稿日期：(2015-06-10)

[中图分类号]R 446.5

[文献标识码]A

[文章编号]1008-7044(2016)01-0029-03

DOI：10.14126/j.cnki.1008-7044.2016.01.011

[作者简介]周洪经(1985-)，女，检验技师，研究生。