中药灌肠疗法对溃疡性结肠炎β-arrestin 2信号通路影响的研究概况

2016-02-21杨一天叶蔚刘彬彬

新中医 2016年12期

关键词：溃疡性结肠炎灌肠

杨一天，叶蔚，刘彬彬

1.浙江中医药大学，浙江杭州 310053；2.杭州市中医院，浙江杭州 310007

中药灌肠疗法对溃疡性结肠炎β-arrestin 2信号通路影响的研究概况

杨一天1，叶蔚2，刘彬彬2

1.浙江中医药大学，浙江杭州 310053；2.杭州市中医院，浙江杭州 310007

本文通过文献复习，对溃疡性结肠炎（UC）中医病因病机、治法，UC与β-arrestin 2信号转导通路的相关性，中药灌肠疗法在UC治疗中的临床应用，中药灌肠疗法对β-arrestin 2通路下游因子NF-κB p65表达的影响等进行综述了分析。认为中药灌肠能够直达病所，充分发挥药物疗效，使病灶局部炎症分泌物减少，血络凝滞改善，加速溃疡愈合；而其机制可能通过加强β-arrestin 2信号通路的活性，从而减轻结肠组织炎症损伤，有效改善溃结临床症状。

溃疡性结肠炎；中药灌肠；β-arrestin 2信号转导

溃疡性结肠炎(UC)是以反复发作性腹泻、黏液脓血便及腹部疼痛为主要症状，病因至今不清的一类炎症性肠病(IBD)，其病变部位局限于结直肠黏膜与黏膜下层，主要以连续性弥漫性分布的慢性非特异性炎症及溃疡形成为特点，易反复发作并能引起癌变[1]。目前国内外已提出多种发病机制的假设，其中β2AR/β-arrestin2/NF-κBp65信号转导通路近年来越来越受到关注。中医在治疗UC上有特色的治疗疗法—中药灌肠疗法，虽然中药灌肠能够直达病所，充分发挥药物疗效，减少病灶局部炎症分泌物，改善血络凝滞，加速溃疡愈合，但其作用机制未知，目前已有多项研究证实中药灌肠可能通过加强β-arrestin 2信号通路的活性，减轻结肠组织炎症损伤，有效改善溃结临床症状。现将中医灌肠疗法对UC β-arrestin2信号通路影响的研究进展概况陈述如下。

1 中医对UC的认识

中医学并无溃疡性结肠炎之具体病名，但可根据其反复腹泻、黏液脓血便等临床症状，归属为中医学肠澼、痢疾、便血等病，目前临床多将其归属于肠澼范畴[2]。根据2003年中国中西医结合学会消化专业委员会分型标准可将UC分为大肠湿热、脾胃气虚、脾肾阳虚、肝郁脾虚、气滞血瘀和阴血亏虚6个证型，其中临床上以大肠湿热型居多。

中医学认为，该病为本虚标实之证，由于感受外邪、饮食不节、情志失调、劳倦内伤等多种原因导致脾胃虚弱，中焦运化、通降功能失调，湿热浊毒不能排出体外，壅塞肠中，阻滞气机，瘀血内生，与肠中糟粕搏结并滞积于肠道，肉腐血败，肠络被伤，腐肉与络血共下，故而见下痢赤白，其本在脾肾，标在大肠[3]。中医临床上除了运用汤药辨证治疗外，还有保留灌肠治疗UC的特色疗法，多个临床研究显示部分中药制剂灌肠对肠黏膜能起到直接的修复与保护作用，促进炎症物质吸收和溃疡愈合；另药物物理的温热刺激还能引起肠黏膜的血管扩张，促进局部血液和淋巴循环，增强新陈代谢，改善局部组织的营养和全身机能[4]。

2 UC与β-arrestin 2信号转导通路

2.1 β-arrestin 2通路简介 β-arrestin 2信号转导通路中主要信号表达包扩β2AR(β2肾上腺素能受体)、β-arrestin2与NF-κBp。其中位于通路下游的NF-κB是一种高度保守的转录因子，它广泛存在于人体各类组织中，可与多种细胞基因启动子、增强子的kB转录序列位发生特异性结合，在免疫和炎症反应、细胞生长、病毒感染等方面发挥重要作用[5]。NF-κB是由p50、p52、p65(-RelA)、RelB及c-Rel组成的同源或异源二聚体复合物[6]，静息状态时能与抑制蛋白结合形成三聚体，以无活性方式存在，当细胞受到通路上游信号因子直接及间接刺激时，NF-κB即可被激活，并移位至细胞核内发生转录，启动炎症级联反应，引起内皮细胞的损伤，从而引发炎症，其功能主要受IκB蛋白家族调控。

目前为止 Arrestin家族共发现六大类成员，其中β-arrestin 1、β-arrestin 2广泛存在于各种细胞中，可调节大多数 G蛋白偶联受体(GPCR)的活性[7]。研究证实，β-arrestin2可以通过以下2种途径抑制NF-κB活化，进而参与免疫调节与炎症抑制[8]。一是与NF-κB的抑制蛋白IκBα结合形成复合物，掩盖核定位信号，进而阻止NF-κB从细胞质转移到细胞核中调节基因转录；二是抑制肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)的自动泛素化负性调节NF-κB的活化[9]。

β-arrestin2是Benovie等[10]在对牛脑中的β-肾上腺素受体激酶(βARK)提纯的过程中发现的。研究证实用β2AR的激动剂异丙肾上腺素(isoprot-erenol，Iso)处理细胞后能够显著增强β-arrestin 2与抑制蛋白IκBα的结合作用，加强抑制NF-κB下游基因转录的作用[11]。这也间接揭示了β2AR和NF-κB间存在着以β-arrestin 2为介导的信号传导通路，并提示交感神经系统调控免疫系统是一种可能的作用方式。

2.2 UC中β-arrestin 2信号通路的表达 β-arrestin2可通过与抑制蛋白IκBα和TRAF6相互作用限制NF-κB的活化，并通过β2AR/β-arrestin2信号通路与另一条信号通路——TLR/NF-κB的交叉对话等机制调节TLR活化的NF-κB活性[12]。因此β-arrestin可以通过调节NF-κB的活化进而影响多种炎症相关基因的表达，参与到IBD的炎症反应和免疫调节的过程中。

有研究表明，UC模型组结肠黏膜表面上皮细胞NF-κB p65表达较正常组显著增强，呈弥漫状分布，固有层也有NF-κB p65的高表达，可总结为UC患者肠黏膜炎性反应越重，NF-κB p65表达越强[13]，说明UC患者可见NF-κB的异常活化。另外Gao等[14]研究发现，β-arrestin 2的氨基末端结构域可以与IκBα的羧基末端结构域直接结合，显著抑制IκB激酶对IκBα的磷酸化过程，通过加强稳定IκBα来阻止NF-κB进入细胞核，从而减弱 NF-κB的活化，证实了β-arrestin 2对NF-κB存在抑制作用。而β2AR受体信号可降低β-arrestin2磷酸化和诱导β-arrestin2的特异性构象改变，加强 β-arrestin2与 IκBα的结合，稳定 IκBα，抑制NF-κB活化。因此β2AR/β-arrestin2/NF-κBp信号通路中，增强β2AR可加强β-arrestin2对NF-κB的抑制作用，为UC的诊治提供新的临床思路。

3 中药灌肠疗法

中药灌肠疗法作为一种中医针对UC局部治疗的特色方法，通过直接使用特定中药制剂灌肠，直达病灶，使局部药物浓度达到最大化，充分延长药物与病灶接触时间，发挥中药疗效。研究表明中药灌肠疗法可减少病灶局部炎症分泌，改善血络凝滞，加速溃疡愈合，药液保留时间越长，吸收可越充分，病情症状改善越快，预后愈佳[15]。

3.1 中医灌肠疗法治疗UC的临床应用中医灌肠疗法能直接使药物与患者病灶接触，缓解炎症，促进溃疡愈合，有明确的临床疗效，有临床推广的意义。如宋丽琴等[16]通过灌肠疗法和柳氮磺吡啶的对比研究，显示治疗组患者应用中药保留灌肠治疗后疗效较对照组显著提高，进一步证实了中药治疗的良好效果。灌肠方由芍药、当归、马齿苋、白头翁、白花蛇舌草、黄连、黄芩、黄柏、木香、槟榔、白芨、五倍子、苦参等组成，诸药合用，共奏清热化湿、凉血解毒和止泻之功效。窦红宇等[17]自拟消溃方，与使用硫酸依替米星联合奥硝唑的对照组对照，结果显示中药保留灌肠组患者近期疗效显著高于对照组(P＜0.05)，说明中药保留灌肠有利于促进溃疡愈合，减轻肠黏膜病变，提示自拟消溃方保留灌肠治疗UC在改善消化道症状方面较西医药物优势明显。席作武[18]拟清溃灌肠方(黄连、白术、白及、地榆、三七粉、赤芍、乌梅等)保留灌肠，并根据不同中医证型配以不同的中成药内服治疗本病，结果显示治疗后中药组Baron评分和Sutherland疾病活动指数评分低于西药组，腹泻、脓血便和腹痛评分低于西药组，总有效率为91.2%高于西药组的75.0%，提示了中药干预措施能促进溃疡的愈合、减轻临床症状、降低疾病活动指数。

3.2 中药灌肠疗法对β-arrestin 2通路下游因子NF-κB p65表达的影响到目前为止，大多数实验研究通过测量通路中NF-κB p65表达来证实中药灌肠的临床疗效，对 β2AR、β-arrestin2指标含量相对关注较少。如杜群等[19]通过给予四神丸浸膏剂灌胃肠，与对照组进行对比，发现空白组大鼠结肠黏膜NF-κB p65mRNA表达处于较低水平，与空白组比较，模型组NF-κB p65 mRNA表达水平显著升高(P＜0.01)，与模型组比较，四神丸组NF-κB p65 mRNA表达水平明显降低，说明四神丸浸膏剂灌胃肠能显著降低NF-κB p65含量，从而发挥抗炎作用。徐进等[20]通过灌肠复方甘草酸苷剂及SAPA，并与正常对照组及模型组进行对比，结果证实复方甘草酸苷保留灌肠对UC有一定治疗作用并能影响NF-κB p65蛋白表达。陆文洪等[21]采用复方芩柏颗粒剂通过保留灌肠干预治疗，并与正常组、模型组、西药组进行对比，结果提示复方芩柏颗粒剂保留灌肠对UC实验大鼠有良好治疗作用，能有效抑制NF-κB的活性，减轻结肠组织的炎症损伤，从而改善结肠组织病理学分级水平。

4 展望

4.1 临床治法的选择目前UC的治疗药物主要是5-ASA类和激素类，如有激素抵抗和激素依赖的患者则需用免疫抑制剂[22]。但临床上可见5-ASA类价格昂贵；氢化可的松灌肠液效果确切，但不能维持临床缓解，且长期使用可能引发激素不良反应[23]。对病变在远段结肠的患者，笔者推荐局部用药灌肠为主，优于口服给药，中药保留灌肠可通过清热解毒、活血祛瘀、利湿消肿等手段达到控制症状，改善患者的生活质量的作用。笔者查找文献时发现很多实验研究着重于中药灌胃对UC发病的影响，却忽略了最直接的中药灌肠疗法，这也是目前灌肠疗法在临床上难以推广开的原因。

4.2 组方用药的选择纵观大部分中药灌肠治疗，其所用药物或为清热解毒，或为凉血止血，或为健脾燥湿之品，大多数方中包含黄连、生白术、白及、地榆、三七粉、延胡索、赤芍、乌梅等，这提示清热凉血、健脾利湿法在UC诊治中的重要作用，这与上文所提临床多见之大肠湿热型相符合，可见血热、浊毒、湿邪是UC发展过程中重要的病机及病理产物，也为进一步研究中药治疗UC提供了客观依据。

4.3 检测指标的选择虽然许多研究及临床应用也证实中药灌肠法有很好的改善UC症状，减轻患者痛苦的作用，但对中药在体内如何发挥其药理作用却研究甚少。笔者所引用的上述很多实验研究仅仅从通路下游因子NF-κBp65含量来探讨UC的可能发病机制，已证明大部分中药灌肠能抑制NF-κB活化及表达，减少促炎因子的释放，调节UC患者结肠中异常的免疫反应，从而减轻结肠炎症，证实NF-κB的活化是目前所认知的UC发病过程中的重要环节之一。但笔者同时也发现，目前鲜有实验测量β2AR、β-arrestin2的表达浓度并探究其与UC发病的内在关系，所查阅中仅有乌梅丸灌胃、氧化苦参碱肌肉注射等实验中同时检测了上述指标，而对于中药灌肠之指标检测少之又少。若能在实验中留意β2AR、β-arrestin2的表达，则可发现中药灌肠在治疗溃疡性结肠炎的可能机制，并能证实中药灌肠疗法是通过加强β-arrestin2信号通路的活性，从而抑制NF-κB的表达，减轻结肠组织炎症损伤，促进黏膜愈合，有效改善溃结临床症状。

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（责任编辑：冯天保）

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