天津市奶牛结核病区域性净化

文│刘莹 孙涛 李洁 刘建文 任景江 张淼洁 付雯 王志成（天津市动物疫病预防控制中心）

天津市奶牛结核病区域性净化

文│刘莹 孙涛 李洁 刘建文 任景江 张淼洁 付雯 王志成（天津市动物疫病预防控制中心）

本项目通过引进国外先进的牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测技术，采用奶牛结核病区域性监测、净化的形式，完成包括监测、检疫、扑杀、消毒、无害化处理和生物安全管理等内容的奶牛结核病净化技术集成，在天津市进行示范推广。天津市奶牛结核病区域性净化的目标是在项目开展三年内，全市存栏奶牛全部达到农业部规定的结核病净化标准，并最终达到奶牛结核病净化的目的。

一、背景

20世纪70～90年代，天津市奶牛结核病处在发病高峰期，阳性率最高达到2.1%，同时人间结核病高发。随后，人们逐渐意识到奶牛结核病净化的重要性，开始奶牛结核病的监测工作。目前，奶牛养殖业已成为天津市农业重要的支柱产业，奶牛结核病净化工作更加重要。2010年，天津市奶牛养殖业产值为24.2亿元，占畜牧业产值的27%。2010年天津市奶牛单产在全国位居第一。2014年年底天津市奶牛存栏13.9万头，其中武清5.1万头，全市奶牛单产平均7.31吨。

二、工作基础

1.天津市各级政府领导高度重视奶牛结核病净化工作，在人力、物力、财力方面得到有力保障。

2.天津市奶牛结核病流行率低，具备净化的条件，2010年奶牛结核病检出阳性率在0.025%～0.037%，低于农业部颁布的奶牛结核病阳性率0.05%的净化标准，许多区县已多年无结核病阳性奶牛报告。

3.天津市奶牛养殖规模化程度较高，生物安全条件较好。

4.天津市奶牛结核病监测技术水平过硬。

经过多年奶牛结核病防治实践，全市已掌握了成熟的防治技术，积累了丰富的管理经验，为净化工作提供了可靠的技术保障。

三、净化原则

天津市奶牛结核病净化工程的实施坚持以下几项原则：坚持依法、科学、规范、统一原则；坚持分类指导、分步实施原则；坚持技术与行政相结合原则；坚持内防与外堵相结合原则；坚持监测净化与健康检测相结合的原则。

◎图1 天津市奶牛结核病净化检测技术路线图

◎图2 天津市奶牛结核病净化检疫技术路线图

四、净化措施

1.实施区域性净化管理。按照农业部《牛结核病防治技术规范》，天津市奶牛结核病净化工作采取以区县为单位进行区域性净化管理。依据奶牛结核病阳性率不同分为未控制区（阳性率＞0.5%）、控制区（阳性率＜0.5%）、稳定控制区（阳性率＜0.1%）和净化区（阳性率＜0.05%）四个区域。该市近年来奶牛结核病报告的阳性率＜0.1%，净化分区划分为控制区、稳定控制区和净化区，并根据各区具体情况分步推进（图1）。

2.引进、集成新技术。引进了牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测技术，作为牛型结核分枝杆菌（PPD）变态反应的平行试验技术。将尾根注射结核菌素法、电推剪毛法和数显游标卡尺测皮厚度法等新方法应用到牛型结核分枝杆菌（PPD）变态反应试验中，显著提高了奶牛结核病监测工作效率。

奶牛结核病净化技术集成奶牛结核病的监测、检疫、扑杀、消毒、无害化处理和生物安全管理技术，在天津市进行示范推广。制定了6项技术规范。其中《奶牛结核病净化技术规范》经市质量技术监督局立项、考核、验收，获批天津市地方标准（DB12/T 527-2014）。

3.检测与扑杀。奶牛结核病检测主要采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验，每半年全面检测一次（犊牛在20日龄首检，100～120日龄复检）。第一年全市存栏奶牛100%检测。第二年进入稳定控制区的区县按50%比例随机抽检，未进入稳定控制区的区县仍按100%比例检测。第三年，拟进入净化区的区县按50%比例抽检，下半年按10%比例抽检。已进入净化区的区县按10%抽检。PPD皮内变态反应检测出的阳性牛和可疑牛要立即隔离，使用γ-干扰素检测技术复检。复检结果为阳性的，则按阳性牛处理；若仍为可疑，再复检，结果仍为可疑者，视同阳性牛处理。

4.检疫监管。加强外埠引进奶牛及跨区调运奶牛的隔离、检疫和监督管理，同时奶牛结核病净化工作与生鲜乳销售监管工作相结合（图2）。一方面，严格进行奶牛调运管理。外埠奶牛调运，需在行政许可大厅申报，经审批方可调入。经过产地检疫后，奶牛需通过天津市专用通道输入，“签证”后方可通过。调入的奶牛需进行隔离饲养，确定无疫病后方可混群。同样，天津市调出奶牛也需要严格的产地检疫。另一方面，天津市每年都对奶牛场进行6种疫病的监测、评估，检疫合格拿到奶牛健康证后，奶牛场才可以销售生鲜乳。

通过实施一系列严格的检疫、监管措施，切断一切奶牛结核病可能的传播途径，带动奶牛结核病净化工作，保证奶牛结核病的净化效果。

五、生物安全管理

为了保证和维护奶牛结核病的净化成果，奶牛结核病净化项目集成一整套与奶牛结核病净化相关的生物安全措施。该项目重点加强选址、环境、设施设备、引种、消毒管理、疫病监测、人员管理、废弃物处理等内容。要求奶牛场建立生物安全管理档案，并制定“奶牛场生物安全管理规范”，详细规定了奶牛场结构布局、生物安全通道、卫生消毒、人员管理、物流控制等方面的内容。只有完善奶牛场生物安全规范化管理，才能为奶牛结核病净化提供保障。

六、净化成效

按照农业部颁布的奶牛结核病净化标准，由专家组对申请达标区县进行考核验收。该项目创建奶牛结核病净化示范模式，重点建立105个示范场户，三年内共示范奶牛13.8万头，检测奶牛结核病76.61余万头次，检出阳性牛176头，所有阳性牛均按要求进行了扑杀、焚烧、深埋等无害化处理，并向养殖场户发放了扑杀补贴。全市所有奶牛养殖区县均达到净化标准并通过考核验收，区县奶牛结核病净化达标率达到100%。市畜牧兽医局向各区县颁发了奶牛结核病净化达标证书和标牌。

七、分析与讨论

1.奶牛结核病区域性净化。奶牛结核病区域性净化符合农业部《国家动物疫病中长期防治规划（2012-2020年）》要求。动物疫病区域化管理是各国控制动物疫病、保护动物卫生水平、促进动物产品国际贸易的重要措施。世界上约有70%的国家采用区域化管理措施防控动物疫病。区域性净化与主场净化相比较具有很大优势，区域性净化是以面净化，而主场净化是以点净化。如果只以分散的养殖场为单位，难以达到长期净化的目的。只有以面为单位，全面布局净化工作，才能更好地维持净化成果。

天津市奶牛结核病净化在国内率先采用区域性净化模式。综合考虑该市奶牛结核病的防控基础，制定奶牛结核病区域性净化措施及方案，以区县为单位，根据奶牛结核病阳性率不同，制定未控制区、控制区、稳定控制区和净化区四个区域标准。采取“一区一策”的净化方案，根据各区县的具体情况分步推进净化工作。经过实施区域性净化管理，该市奶牛结核病净化工作取得显著成效。

2.引进奶牛结核病γ-干扰素检测技术。该市奶牛结核病净化工作中一直采用国标牛型提纯结核菌素（PPD）变态反应进行监测，检出的阳性牛即按规定进行扑杀和无害化处理。但是，近年来随着检测技术的发展，发现牛型PPD变态反应试验存在明显不足。该方法除了操作烦琐、费时费力外，出现假阳性结果严重，一方面难以剔除禽型PPD阳性牛及其他非致病性分枝杆菌感染引起的假阳性反应，另一方面不能排除结果判定中的人为因素干扰。可见，单纯依靠牛型PPD变态反应检疫的奶牛结核病净化方法存在明显弊端。

γ-干扰素检测技术是近年来开发的一种新型牛结核病检测方法，该方法用于结核杆菌感染的体外检测。在牛体外，通过单克隆抗体夹心ELISA技术检测牛型PPD激发单核细胞产生的血清中γ-干扰素水平。γ-干扰素试验操作简便，省时省力，减少错误扑杀造成的经济损失，因此γ-干扰素检测技术在结核病控制项目中降低了扑杀成本，还显著减少了潜伏性结核假阳性病例的治疗费用。

国外大量临床研究表明，γ-干扰素检测技术具有较高的敏感性和特异性，可以降低假阳性率，可以检测结核病早期感染。另外，γ-干扰素试验有商品化试剂盒提供，容易实现标准化。该方法是目前最具有应用前景的新型牛结核病监测技术，目前在欧盟和美国等发达国家已经得到了广泛应用，成为继变态反应之外的唯一法定活畜诊断技术。该技术成熟度高，目前已有进口的商品化试剂盒供应，但是尚未在国内进行示范推广。

3.集成一整套奶牛结核病净化技术规范。本项目在用PPD变态反应进行常规检疫的基础上，引进牛结核分枝杆菌γ-干扰素检测技术，并集成监测、检疫、扑杀、消毒、无害化处理和生物安全管理等一整套奶牛结核病净化技术规范。单纯的检测净化无法达到净化目的，要想彻底净化奶牛结核病必须是以一整套的技术集成为抓手，实施全面综合防控措施，并以示范推广的形式在全市范围内全面开展奶牛结核病净化工作，为全市达到奶牛结核病净化标准创造了有利条件。

点评：现阶段我国积极实施主要动物疫病净化，如何有效开展主要动物疫病净化工作是重要问题。天津市率先采用区域性净化模式进行奶牛结核病净化，以区域净化为基础，场群净化为主体，点面结合、分区施策、统一标准、集成示范、严格考核，取得较好成效。该市奶牛结核病净化为全国奶牛结核病净化工作开展提供了技术支撑和先进经验，值得学习借鉴。

天津市农业科技示范推广项目，项目编号：201301020

为了实现国人每人每天喝上一斤奶的梦想，畜牧兽医从业者进行着坚持不懈的努力。奶牛结核病作为一种慢性人畜共患病，影响着奶牛养殖业发展，更威胁到人民群众身体健康。为了实现国家和天津市动物疫病中长期防治规划提出的2015年奶牛结核病达到净化标准的目标，天津市动物疫病预防控制中心于2013年申请了市农业科技成果转化与推广项目《奶牛结核病净化集成技术示范推广》。