当归芍药散对激素治疗的阿霉素肾病幼鼠骨保护素的干预作用

边毅 张天照 仲维娜



当归芍药散对激素治疗的阿霉素肾病幼鼠骨保护素的干预作用

边毅 张天照 仲维娜

【摘要】目的 探讨当归芍药散对激素治疗的阿霉素肾病幼鼠骨保护素的干预作用。方法 将48只幼鼠分为4组，实验2周，测定幼鼠尿蛋白定量及血清骨保护素水平。结果 实验过程中对照组尿蛋白逐渐增高，治疗组及西药组尿蛋白逐渐下降；二者比较差异无统计学意义（P＞0.05）；模型组及西药组骨保护素进行性降低，二者比较差异有统计学意义（P＜0.05）；而联合组骨保护素缓慢升高。结论 当归芍药散联合甲泼尼龙片对阿霉素肾病幼鼠尿蛋白有降低作用，可能有升高阿霉素肾病幼鼠骨保护素的作用。

【关键词】肾病综合征；阿霉素；幼鼠骨保护素

长期大剂量应用糖皮质激素治疗肾病综合征会导致骨质疏松[1]，有学者指出[2]，肾病综合征可导致钙、维生素D等内分泌功能异常，使骨代谢紊乱。糖皮质激素可进一步抑制成骨细胞的生成和活性，加重骨质疏松。我院以当归芍药散加减联合糖皮质激素治疗儿童肾病综合征，发现其对患儿骨质疏松具有一定的改善作用，具体报道如下。

1　材料与方法

1.1 实验动物

健康三周龄雄性SD幼鼠共48只，平均体重（130±20）g，随机分为空白组、模型组、西药组及联合组，各12只，所有幼鼠适应性饲养3 d后开始实验。

1.2 动物造膜

除空白组外，所有幼鼠均采用10%水合氯醛0.3 ml/kg腹腔注射麻醉，至幼鼠角膜反射消失。麻醉成功后固定幼鼠，以6.5 mg/ kg体重给予阿霉素尾静脉注射，注射液体总量不超过1 ml/100 g体重[3]。

1.3 给药方法

给药方法：根据动物药物剂量换算公式“幼鼠剂量（g/kg）=儿童剂量（g/kg）×折算系数（6）”，自阿霉素注射后第10 d起记为造模成功，西药组以甲泼尼龙片蒸馏水溶液1ml+蒸馏水2ml灌胃，联合组以甲泼尼龙片蒸馏水溶液1 ml＋当归芍药散煎剂2 ml灌胃，模型组以蒸馏水3 ml灌胃，灌胃持续4周。

1.4 取材与检测

各组幼鼠以造模成功当日为第0周，每周组分别于第2周、第4周各取6只，收集24 h尿，考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量，腹主动脉取血，以酶联免疫吸附法测定血清骨保护素浓度，具体步骤严格遵循ELISA试剂盒说明书。

1.5 统计学方法

所得数据使用SPSS17.0统计学软件进行处理分析，计数资料用n，%表示，采用χ2检验，计量资料以（均数±标准差）表示，采用t检验，P＜0.05，差异具有统计学意义。

2　结果

2.1 尿蛋白定量结果

空白组尿蛋白定量均在正常范围内；其余各组在造模结束时，24 h尿蛋白定量平均达3 g左右。实验过程中，模型组尿蛋白定量进行性增加；第2周时，联合组尿蛋白定量（189.2±10.5）mg，西药组（184.5±8.8）mg，P=0.051＞0.05；第4周时，联合组尿蛋白定量（140.2±5.5）mg，西药组（162.9±4.9）mg，差异有统计学意义，P=0.02＜0.05。

2.2 骨保护素（OPG）结果

除空白组外，其余各组在造模结束时，骨保护素差异无统计学意义；实验过程中，模型组及西药组骨保护素进行性降低，各时间点比较（38.1±1.2）% vs（30.3±2.9）% vs（22.3±1.3）%，差异有统计学意义（P＜0.05），说明甲泼尼龙对骨保护素可进一步降低；而联合组骨保护素缓慢升高。

3　讨论

骨密度是评价骨质疏松的金标准，但其对儿童肾病综合征患者早期诊断的意义并不大[4]。骨保护素是一种肿瘤坏死因子受体，具有降低破骨细胞分化和增加骨密度的功能，有学者指出[5]，患儿骨保护素改变受疾病本身及糖皮质激素的双重影响。关于激素引起的骨质疏松的治疗，学者多给予活血[6]、补气[7]、补脾肾[8]等方案治疗，当归芍药散中当归补益脾肾，川芎活血止痛，芍药泻肝木，与川芎、当归养血活血；佐以茯苓、泽泻、白术健脾利湿，倾泻肾热。全方活血利水，补肾健脾，利水而不伤阴液，活血亦不伤正气，共奏补肾健脾，利水渗湿之功。本次研究结果显示，当归芍药散联合甲泼尼龙片能降低阿霉素肾病幼鼠尿蛋白，四周左右效果优于单纯应用甲泼尼龙片；同时，联合用药可提高阿霉素肾病幼鼠骨保护素，说明当归芍药散可能通过调节幼鼠骨保护素水平来缓解其骨质疏松。

参考文献

[1]Briot K, Roux C.Corticosteroid-induced osteoporosis[J].Rev Med Interne，2013（3）：315-323.

[2]林秀芹，郑京，刘加林，等.骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响[J].基础医学与临床，2014，34（9）：1215.

[3]支勇，曹式丽.阿霉素肾病动物模型的国外研究进展[J].中国中西医结合肾病杂志，2008，10（9）：933-935.

[4]Cao Y, Liu X, Xu H, et al.Utility of serum tartrate-resistant acid phosphatase isoform 5b,bone alkaline phosphatase and osteocalcin in osteoporotic franturesin Chinese patients[J].Clin Lab，2012，58（7-8）：45-50.

[5]李玉柳，王华.肾病综合征患儿血清骨保护素改变及糖皮质激素对其的影响[J].中国当代儿科杂志，2014，14（9）：653-654.

[6]邹丽宜，吴铁，崔燎，等.丹参抑制泼尼松大鼠骨质丢失[J].中成药，2006，28（4）：5374.

[7]叶黎青，鲁科达，马红珍.李学铭加味四君子汤治疗肾病经验[J].中华中医药学刊，2011，8（29）：1727-1728.

[8]孟晓东.补肾健脾养胃法治疗骨质疏松症的临床观察[J].吉林中医药，2004，24（11）：294.

The Intervention Effect of Danggui Shaoyaosan in Hormone Therapy of Adriamycin Nephropathy Rats Osteoprotegerin

BIAN Yi ZHANG Tianzhao ZHONG Weina, Heilongjiang Provincial The Traditional Chinese Medicine Hospital, Harbin 150036, China

[Abstract]Objective To investigate the intervention effect of Dangguishaoyaosan hormone on adriamycin induced nephropathy rats bone protective hormone therapy.Methods 48 rats were divided into four groups, 2 weeks of the experiment, rats in the determination of urinary protein and serum level of osteoprotegerin.Results The control group, the urine protein increased gradually, gradually decreased in treatment group and Western medicine group, urinary protein, difference between the two groups had no statistically significance (P＞0.05), during the experiment, model group and Western medicine group and bone protection were decreased, difference have statistical significance (P＜0.05), and the joint group of bone protection pigment increased slowly.Conclusion The danggui shaoyao powder combined with methylprednisolone tablets of in rats with adriamycin nephropathy urine protein decreased, which could may be increased in rats with adriamycin nephropathy osteoprotegerin.

[Key words]Nephrotic syndrome, Adriamycin, Rat osteoprotegerin

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.06.138

【文章编号】1674-9308（2016）06-0184-02

【中图分类号】R28

【文献标识码】A

作者单位： 150036哈尔滨，黑龙江省中医医院