吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉抗氧化活性研究

邹碧群，张 业

(1. 广西师范大学化学与药学学院，广西桂林541004；2. 桂林师范高等专科学校化学与药学系，广西桂林541001)

吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉抗氧化活性研究

邹碧群1，张 业2

(1. 广西师范大学化学与药学学院，广西桂林541004；2. 桂林师范高等专科学校化学与药学系，广西桂林541001)

吴茱萸；桑葚；柚子；香蕉；抗氧化活性；自由基

自由基和活性氧因其在多种疾病的发病病理过程中发挥极其重要的调节作用，而受到很多研究者的关注。若人体内存在过多的自由基和活性氧，将会导致脂质、蛋白质和DNA损伤，从而引发诸如动脉粥样硬化、癌症、心血管疾病、衰老等多种疾病[1-3]，及时地补充抗氧化剂可以有效地预防和延缓这些疾病的发生，故寻找与开发具有良好活性的抗氧化剂成为当前的研究热点。目前抗氧化剂已成为抗癌、抗肿瘤药物的候选药物，而在倡导绿色、营养、安全的健康食品的当今社会，天然、高效的抗氧化剂的开发更符合日益增长的社会需求，从天然中草药和可食用果蔬中提取与分离抗氧化剂是其有效途径之一[4-6]。

吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.) Benth.俗称吴萸、米辣子，为芸香科吴茱萸属植物。吴茱萸始载于《神农本草经》，为常用中药，具有抗菌、降压、抗心血管疾病、耐缺氧等药理作用[5-7]。桑葚Fructusmori为桑科植物桑的干燥果穗，桑葚入药始载于唐朝《唐本草》，具有增强免疫功能、促进造血细胞的生长、防止人体动脉硬化、降血糖、降血脂、护肝、抗病毒、抗氧化及延续衰老等功效[8]。柚子Citrusmaxima(Burm.) Merr.是芸香科植物柚的成熟果实，味甘、酸，具有止咳平喘、清热化痰、健脾消食、降血糖、降血脂等药用价值[9]。香蕉MusananaLour.是热带和亚热带“四大果品”之一，文献报道其具有抑制糖尿病模型大鼠的脂质过氧化状态、降低胃溃疡模型大鼠溃疡指数和过氧化水平等药理作用[10]，这些作用均与抗氧化活性密切相关。基于吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉的重要药用价值，它们的药用机制与自由基之间存在密切关系[2-3]，故我们推测吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉可能具有较好的抗氧化活性。鉴于此，我们采用不同溶剂对吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉进行提取，并对其抗氧化活性进行研究，旨在为进一步合理开发利用吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉等提供理论依据。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

吴茱萸、桑葚、柚子、香蕉2015年9月采摘于桂林师范高等专科学校植物园，样品由桂林医学院药学院黄德青老师鉴定。把吴茱萸、桑葚、柚子皮、柚子肉、香蕉皮、香蕉肉分别用粉碎机粉碎成酱状，备用。实验所用水均为二次蒸馏水，DPPH·和ABTS+·购自美国Sigma公司，其他试剂均为分析纯。

KQ5200-B型超声波清洗机(郑州南北仪器设备有限公司)；RE-520旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；AR-1140/C 型电子分析天平(美国Ohaus 公司)；TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；DJ-10A灵巧型粉碎机(上海隆拓仪器设备有限公司)。

1.2 吴茱萸、桑葚、柚子和香蕉提取物的制备

分别称取4份50.0 g吴茱萸酱、桑葚酱、柚子皮酱、柚子肉酱、香蕉肉酱、香蕉皮酱置于1、2、3、4号烧瓶中，1号瓶加入200 mL丙酮，2号瓶加入200 mL无水乙醇，3号瓶加入200 mL蒸馏水，4号瓶加入200 mL乙酸乙酯，常温超声波辅助提取1 h，过滤，滤液减压浓缩。除以乙酸乙酯为溶剂提取香蕉肉得不到提取物外，其余的都得到膏状提取物EAE、EEE、EWE、EAEE、MAW、MEE、MWE、MAEE、SPAE、SPEE、SPWE、SPAEE、SFAE、SFEE、SFWE、SFAEE、BAE、BEE、BWE、BPAE、BPEE、BPWE和BPAEE，收率分别为15.3%、23.4%、21.7%、20.5%、6.3%、7.4%、5.7%、1.5%、8.5%、8.9%、14.6%、6.5%、15.3%、13.4%、14.5%、10.9%、13.3%、12.4%、13.5%、8.7%、7.9%、7.6%和3.5%，与传统的提取方法相比[11-16]，超声波提取时间大大缩短，提取收率明显提高。

1.3 提取物的抗氧化活性测试

SC%=[A0-(AX-AX0)]/A0×100%，

(1)

式(1)中，A0为空白对照液吸光度，AX为加入样品液后的吸光度，Ax0为样品本身的吸光度。分别测试各溶液在自由基最大吸收波长下的吸光度，并绘制自由基清除率对提取物溶液浓度曲线，计算提取物清除自由基50%的质量浓度(IC50)。在相同测定条件下，采用抗氧化剂2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)作为对照品进行试验。BHT和各提取物清除自由基的活性见表1。

2 结果与讨论

2.1 提取物对DPPH·清除活性

在提取物对DPPH·的清除活性测试中，所有提取物的IC50均小于标准值10 g/L[19]，说明提取物具有良好的自由基清除活性。此外，提取溶剂的溶剂效应对提取物的DPPH·清除活性也具有重要影响。提取溶剂对吴茱萸提取物清除DPPH·活性影响大小顺序为：丙酮>乙醇>水>乙酸乙酯，结合提取收率，

表1 提取物对·的半清除浓度IC50值

注：1.ND表示没有做这个实验。

故丙酮为优选的提取溶剂；提取溶剂对桑葚提取物清除DPPH·活性影响较小；提取溶剂对柚子皮提取物清除DPPH·活性影响大小顺序为：水>乙醇>丙酮>乙酸乙酯，影响趋势与提取收率大小顺序一致，故可优选水为最好的提取溶剂；提取溶剂对柚子肉提取物清除DPPH·活性影响大小顺序为：水>乙酸乙酯>乙醇>丙酮，结合提取收率，故水为优选的提取溶剂；提取溶剂对香蕉皮提取物清除DPPH·活性影响大小顺序为：丙酮>水>乙醇，影响趋势与提取收率大小顺序一致，说明丙酮为优选的提取溶剂；提取溶剂对香蕉肉提取物清除DPPH·活性影响大小顺序为：丙酮>乙醇>水>乙酸乙酯，结合提取收率，说明丙酮为优选的提取溶剂。

2.2 提取物对ABTS+·清除活性

在提取物对ABTS+·的清除活性测试中，所有提取物的半清除浓度IC50均小于标准值10 g/L[19]，说明提取物具有良好的自由基清除活性，其中提取物EAE的活性甚至优于常用抗氧化剂BHT (IC50=8.15 mg/L)，说明EAE对ABTS+自由基具有优良的清除活性，有望开发成抗氧化剂。此外，提取溶剂的溶剂效应对提取物的ABTS+·清除活性也具有重要影响。提取溶剂对吴茱萸提取物清除ABTS+·活性的影响大小顺序为：丙酮>乙醇>乙酸乙酯>水，结合提取收率，可确定丙酮为优选的提取溶剂；提取溶剂对桑葚提取物清除ABTS+·活性影响大小顺序为：丙酮>乙醇>水>乙酸乙酯，结合提取收率，说明丙酮为优选的提取溶剂；提取溶剂对柚子皮和柚子肉提取物清除ABTS+·活性影响大小顺序为：乙醇>水>丙酮>乙酸乙酯，说明乙醇为优选的提取溶剂；提取溶剂对香蕉肉提取物清除ABTS+·活性影响大小顺序为：丙酮>乙醇>水，结合提取收率，说明丙酮为优选的提取溶剂；提取溶剂对香蕉皮提取物清除ABTS+·活性影响大小顺序为：乙酸乙酯>丙酮>水>乙醇，说明乙酸乙酯为优选的提取溶剂。

2.4 提取物对OH·清除活性

在提取物对OH·的清除活性测试中，所有提取物的半清除浓度IC50均优于常用抗氧化剂BHT[19]，说明提取物对OH·均具有优良的清除活性。此外，提取溶剂对提取物的OH·清除活性也有重要的影响。提取溶剂对吴茱萸提取物清除OH·活性的影响大小顺序为：水>乙酸乙酯>乙醇>丙酮，结合提取收率，说明水为优选的提取溶剂。提取溶剂对桑葚提取物清除OH·活性影响大小顺序为：丙酮>乙醇>乙酸乙酯>水，结合提取收率，说明丙酮为优选的提取溶剂；在提取溶剂的优化试验中，乙酸乙酯优选为柚子皮的提取溶剂；提取溶剂对香蕉肉提取物清除OH·活性的影响大小顺序为：水>乙醇>丙酮，结合提取收率，说明水为优选的提取溶剂；提取溶剂对香蕉皮提取物清除OH·活性的影响大小顺序为：水>乙酸乙酯>乙醇>丙酮，说明水为优选的提取溶剂。

3 结论

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(责任编辑 王龙杰)

Antioxidant Activity of Vodiamine， Mulberry， Pomelo and Banana

ZOU Biqun1， ZHANG Ye2

(1. School of Chemistry and Pharmaceutical Sciences， Guangxi Normal University， Guilin Guangxi 541004， China;2. Department of Chemistry and Pharmaceutical Science， Guilin Normal College， Guilin Guangxi 541001， China)

Evodiarutaecarpa(Juss.) Benth.;Fructusmori;Citrusmaxima(Burm.) Merr.;MusananaLour.; antioxidant activities; free radical

10.16088/j.issn.1001-6600.2016.04.008

2016-04-28

国家自然科学基金资助项目(21501032)；广西自然科学基金资助项目(2014GXNSFBA118050，2016JJA120113)；广西高等学校优秀中青年骨干教师培养工程资助项目(桂教办[2013]258号)；广西植物功能物质研究与利用重点实验室开放基金资助项目(FPRU2013-6)

张业(1981—)，男(壮族)，广西贵港人，桂林师范高等专科学校副教授，博士。E-mail：zhangye81@126.com

R282

A

1001-6600(2016)04-0050-05

注：邹碧群现在桂林师范高等专科学校工作。