GC/MS技术检测大球盖菇中11种有机氯农药残留

□陈 双/蓬溪县农业局

GC/MS技术检测大球盖菇中11种有机氯农药残留

□陈 双/蓬溪县农业局

大球盖菇又名酒红球盖菇，球盖菇属，是我国近几年食用菌中的后起之秀。菇体腿粗盖肥，营养丰富，口感极佳。它富含对人体有益的多种矿物质元素及维生素，具有预防冠心病、助消化、疏解人体疲劳之功效。大球盖菇是四川省蓬溪县食用菌产业的龙头产品之一，产品在市场上供不应求。

有机氯是广谱杀虫剂，曾是各国使用最广泛的农药[1]。有机氯农药六六六、滴滴涕等化学性质稳定，脂溶性大，残留期长，毒副作用较大，我国已禁止使用20多年，但是目前在土壤、部分农产品中仍能检出有机氯残留[2,3]。运用气相色谱法检测蔬菜、食用菌中的农残相关研究较多[4,5]，对大球盖菇中的有机氯农药残留检测尚未见报道。本研究采用GC/MS技术，通过组分保留时间和特征离子质量对大球盖菇中11种有机氯农药进行检测，灵敏度高，效果良好。

1 试验材料、试剂及仪器

1.1 试验材料

大球盖菇，抽样于蓬溪县民富蔬菜（食用菌）专业合作社。用食物料理机打碎制样，装入保鲜盒待测。

1.2 试验试剂及仪器

试验试剂：正己烷、甲苯、乙腈（色谱纯）；无水硫酸钠、氯化钠；C-NH2小柱（500mg+500mg/6mL）；六六六等11种有机氯农药标品（100mg/L，1mL）购于农业部环境保护科研监测所。

试验用仪器：Agilent 7890B-5977气质联用仪（EI离子源，质谱库NIST11，美国安捷伦公司）；CombiMax600食物料理机；DC12H氮吹仪；T25高速分散（匀浆）机；XH-C漩涡混合仪。

2 试验方法

2.1 标准溶液的配制

将11种农药标品（α-六六六、β-六六六、γ-六六六、δ-六六六、p,p′-DDE、o,p′-DDD、o,p′-DDT、p,p′-DDT、五氯硝基苯、百菌清、三氯杀螨醇）全部移入50mL容量瓶中，用正己烷淋洗安瓿瓶2～3次，定容至刻度得到2mg/L的菊酯类农药混合标准溶液。低温保存，使用时稀释成0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/L混合标准溶液。

2.2 样品前处理

称取20.0 g大球盖菇试样，加入40.0mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5 g氯化钠的50mL具塞量筒中，收集滤液30～40mL，盖上盖子，剧烈震荡1min，在室温下静止30min，使乙腈相和水相分层。然后从具塞量筒中吸取5.00mL乙腈溶液，65℃氮吹，蒸发近干，加入3.5mL乙腈+甲苯（3+1）溶解残渣，待净化。

净化过程：（1）活化及平衡：用5mL乙腈+甲苯（3+1）预淋洗C-NH2小柱。（2）上样：待净化液过C-NH2小柱上，用10mL玻璃管接收。（3）洗脱：用3.5mL乙腈+甲苯（3+ 1）冲洗后淋洗复合氨基柱，并重复2次。

浓缩、定容：10mL玻璃管接收液，65℃氮吹，蒸发近干。准确取用2.0mL正己烷溶解残渣，装入自动进样瓶中，供GC/MS检测分析。

2.3 色谱-质谱条件

GC色谱柱：HP-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；进样口温度280℃；柱升温程序70℃（2 min）→25℃/min→150℃→3℃/min→200℃→8℃/min→280℃（4 min）；载气：氦气1.5m L/min，纯度不低于99.999％；进样模式：不分流；进样量为1μL。

表1 11种有机氯农药测定的SIM方法

MS离子源（EI）温度：230℃；四级杆温度150℃；色谱-质谱接口温度280℃；溶剂延迟：10min；采集方式：先对混合标样进行全扫描监测（SCAN），得到11种有机氯农药的保留时间，如图1所示，然后利用农药保留时间进行选择离子监测（SIM）；SIM条件见表1。

3 结果与讨论

3.1 有机氯农药图谱

从谱图1中可以得到有机氯农药保留时间。11种有机氯农药没有出现相互干扰的峰，表明该技术方法分离效果较好。

图1 采用SCAN全扫描测定的11种有机氯农药图谱

3.2 标准曲线

分别取0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/L混合标准溶液绘制标准曲线，每个浓度连续进样三次，取平均值。以浓度为横坐标，响应面值为纵坐标绘制标准曲线，得到11种农药的线性回归方程和相关系数R。试验测得相关系数在0.998 8～0.999 9，各种农药皆呈良好的线性关系。

3.3 检出限、定量限、回收率及相对标准偏差

本试验在大球盖菇样品中均添加2mL混合标准溶液，分别是0.5、1.0、2.0mg/L三个浓度水平，按照步骤2.2及2.3进行操作，平行测定6次。依据仪器信噪峰峰比3计算检出限，信噪峰峰比10计算定量限；加标SIM图谱见图2；方法的试验结果详见表2。

表2 方法的检出限、定量限、回收率和相对标准偏差

图2 大球盖菇样品中的加标图谱

表2表明，11种有机氯农药残留的方法检出限（S/N=3）为0.001 0～0.008 3 mg/kg，定量限（S/N=10）为0.004～0.030mg/kg。回收率在82.1％～112.0％范围内，相对标准偏差（RSD）在1.1％～6.4％之间，说明该方法符合农残检测要求。

3.3 结果与讨论

本次对大球盖菇中的有机氯进行了测定，从蓬溪县民富专业合作社不同大棚中抽检样品5份，均未检出有机氯农药残留。

本工作建立了气质联用测定大球盖菇中11种有机氯农药的方法。利用乙腈萃取，C-NH2复合小柱净化，去处色素和杂质，使得准确度高、重现性好，可用于大球盖菇等食用菌中农残检测。

[1]黄晓会,薛建,吴晓波,等.根茎类中药材有机氯及菊酯类农药多残留分析[J].中成药,2012(34):100-104.

[2]Shi Y J,Lu YL,Wang TY,et al.Comparison of organochlorin pesticides occur rence,origin,and character in agricul tural and indust rial soi ls in Bei j ing[J].rch Environ Contam Toxicol,2009,57(3):447-455.

[3]Sun JW,Zhang Y,Wang S.Development of an enzyme-l inked immunosorbent assay for metolcarb residue analysis and investigation of matrix ef fects f rom di f ferent agricul tural product[J].Anal Bioanal Chem,2009,394(8): 2223-2230.

[4]郭素华,廖华军.闽产中成药有机氯农药残留量的测定[J].中成药,2005,27(2):161-164.

[5]仲岳桐,陈春晓.气质联用仪法检测茶叶中联苯菊酯等四种拟除虫菊酯类农药[J].中国热带医学，2010(11): 1373-1374.