玉芩蓬口服液对正常小鼠免疫功能的影响
2016-02-07潘丽元
许 伟,潘丽元
(哈尔滨市职工医学院,黑龙江 哈尔滨 150020)
玉芩蓬口服液为中药复方制剂,主要由猪毛菜、玉米须、杜仲炭、黄芩四味中药组成,具有降低血压、调节血脂、消肿利尿等多方面的药理作用,但关于玉芩蓬口服液对免疫功能的影响至今未见报道。本实验从免疫学角度探讨玉芩蓬口服液对小鼠免疫功能的影响,为临床应用玉芩蓬口服液提供理论依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
玉芩蓬口服液由哈药集团三精制药有限公司研制,为棕黑色溶液(相当于生药1.0 g/mL)。玉芩蓬口服液的制备按处方量准确称取干猪毛菜、干玉米须、杜仲炭、黄芩四味中药,水煎煮两次,每次1小时,过滤,合并水煎液,浓缩至每100 ml药液含生药100 g,用10 ml安瓿灌注,封口,灭菌即得。植物血凝素(PHA)上海伊华医学科技有限公司产品。昆明种小鼠购自黑龙江中医药大学动物中心。
1.2 方法
1.2.1 实验分组
取健康小鼠120只,体重18~22 g。随机分为三个实验组,每个实验组又分4组,每组10只,第1组为空白对照组,生理盐水0.5 ml/d;第2组、第3组、第4组为玉芩蓬口服液组,剂量分别为每kg体重2、4、8g生药/d。
第一实验组4组小鼠经灌胃给药第10天,每鼠称重,脱颈处死小鼠,取胸腺、脾脏,用滤纸吸干残血后,用分析天平称重,分别计算胸腺指数、脾指数。
第二实验组4组小鼠,连续6天经腹腔注射给药后,腹腔注射鲜牛肉汤1 ml,24小时后,每只小鼠腹腔注射2%鸡红细胞混悬液0.5 ml,30分钟后,脱颈处死小鼠,腹腔液涂片,瑞氏染色,蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数200个巨噬细胞中含吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数,计算吞噬百分率和吞噬指数。
第三实验组4组小鼠,间日肌肉注射PHA0.6ml/10g,同时,每日肌肉注射给药,连续3日,末次给药后48小时,小鼠剪尾、取血、推片、晾干,瑞氏染色,蒸馏水漂洗晾干。油镜下计数200个淋巴细胞,计算淋巴细胞转化率。
1.3 统计学方法
采用SPSS20.00统计学软件进行分析,计量资料采用“x±s”表示,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 胸腺指数、脾指数测定
结果见表1。
表1 玉芩蓬口服液对小鼠胸腺指数、脾指数的影响(n=10,±s)
表1 玉芩蓬口服液对小鼠胸腺指数、脾指数的影响(n=10,±s)
注:与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
分组 剂量(g/kg) 胸腺指数(mg/g bw) 脾指数(mg/g bw)空白对照组 — 2.49±0.56 4.15±0.86玉芩蓬口服液低剂量组 2 2.64±0.22 4.38±0.56玉芩蓬口服液中剂量组 4 3.21±0.69* 5.98±1.86*玉芩蓬口服液高剂量组 8 3.76±0.44** 5.52±1.43*
由表1可见,玉芩蓬口服液中、高剂量组与空白对照组比较,能显著提高胸腺指数和脾指数。
2.2 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响[1]
结果见表2。
表2 玉芩蓬口服液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(n=10,±s)
表2 玉芩蓬口服液对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响(n=10,±s)
注:与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
分组 剂量(g/kg) 吞噬百分率(%) 吞噬指数空白对照组 — 24.9±3.87 0.47±0.21玉芩蓬口服液低剂量组 2 28.1±4.83 0.56±0.53玉芩蓬口服液中剂量组 4 33.5±6.10** 0.93±0.52*玉芩蓬口服液高剂量组 8 30.8±5.45* 1.02±0.65*
吞噬百分率=(吞噬红细胞的巨噬细胞数/200个巨噬细胞)×100%
吞噬指数=(被吞噬的鸡红细胞数/200个巨噬细胞)÷2
实验结果显示,玉芩蓬口服液中、高剂量组组的吞噬百分率、吞噬指数显著高于正常对照组,表明玉芩蓬口服液能明显增强吞噬细胞吞噬功能。
2.3 对小鼠PHA所致淋巴细胞转化率的影响
结果见表3。
表3 玉芩蓬口服液对小鼠淋巴细胞转化率的影响(n=10,±s)
表3 玉芩蓬口服液对小鼠淋巴细胞转化率的影响(n=10,±s)
注:与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
分组 剂量(g/kg) 淋巴细胞转化率(%)空白对照组 — 61.4±6.23玉芩蓬口服液低剂量组 2 63.4±7.68玉芩蓬口服液中剂量组 4 69.5±8.73*玉芩蓬口服液高剂量组 8 78.6±7.28**
结果表明,玉芩蓬口服液中、高剂量组能明显增强小鼠淋巴细胞转化率,从而提高机体的细胞免疫功能。
3 讨 论
本文主要研究了玉芩蓬口服液对小鼠免疫功能的影响。
胸腺是机体重要的中枢免疫器官,担负着诱导T细胞分化成熟的重任。胸腺指数的提高,预示着机体成熟T细胞数量的增加。脾脏是机体内最大的外周免疫器官[2],是产生致敏淋巴细胞和抗体的场所之一,并能清除衰老细胞和微生物等物质,其中的大量T淋巴细胞,B淋巴细胞及巨噬细胞在机体防御和清除功能中有重要作用。本试验结果提示,玉芩蓬口服液中、高剂量组对小鼠脾脏和胸腺有明显的增重作用,与空白对照组相比有显著差异,证明玉芩蓬口服液可明显提高机体细胞免疫功能。
在机体免疫系统中,巨噬细胞占有极其重要的地位,它担负着吞噬细菌、肿瘤细胞、突变细胞、提呈抗原诱发特异性免疫应答,并参与免疫调节等作用。实验结果显示,玉芩蓬口服液中、高剂量组的吞噬百分率、吞噬指数显著高于正常对照组,表明玉芩蓬口服液能明显增强吞噬细胞吞噬功能。同时玉芩蓬口服液中、高剂量组可使小鼠淋巴细胞对PHA的增值反应性明显增强,能明显增强小鼠淋巴细胞转化率。说明玉芩蓬口服液能增强细胞免疫及非特异性免疫功能。
在实验过程中未见实验动物有任何不良反应。
综上所述,适量玉芩蓬口服液能明显增强吞噬细胞吞噬功能,增加胸腺指数,提高小鼠淋巴细胞转化率,从而增强机体免疫功能,提示如免疫功能下降或体质衰弱者,可口服玉芩蓬口服液来增强免疫功能。
[1] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学[M].第三版,人民卫生出版社,2005:1456-1457
[2] 郑武飞.医学免疫学(第一版)[M].北京,1989:81.