常见阴道炎病原体检测及微生态状况分析

王春，曾白华，杨琴

(绵阳市人民医院检验科，四川 绵阳 621000)



常见阴道炎病原体检测及微生态状况分析

王春，曾白华，杨琴

(绵阳市人民医院检验科，四川 绵阳 621000)

目的：了解本地区女性阴道炎患者病原体感染及微生态状况，为阴道炎的临床诊治提供依据。方法：采用阴道分泌物常规显微镜检联合需氧菌阴道炎(aerobic vaginitis,AV)/细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)五项预成酶谱分析技术对21 812例妇科就诊患者的阴道分泌物进行检测。结果：(1)21 812例阴道分泌物送检标本检出假丝酵母菌阴道炎(vulvovaginal candidiasis,VVC)、BV、AV、滴虫性阴道炎(trichomonas vaginitis,TV)单一感染及各类混合感染共计13 510例，总检出率61.94%；13 510例感染标本中，单一感染6 391例占47.31%，混合感染7 119例占52.69%。混合感染中，AV合并VVC 2 323例，占32.63%,构成比最高；其次为AV合并BV 2 113例占29.68%。(2)检测结果按4个月份段进行统计分析，VVC在1～3月检出844例(15.12%)；混合感染在7～9月检出2 328例(42.48%)，检出率均明显高于其他月份段，比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)21 812例阴道分泌物送检标本中，乳酸杆菌失衡检出率78.19%，常见阴道炎与阴道菌群失调密切相关，VVC、BV、AV、TV及混合感染菌群失调的检出百分比分别为83.85%、95.67%、100%、96.97%、100%。结论：本地区常见阴道炎及混合感染发生率高，阴道菌群失调多见，混合性阴道炎以AV混合感染为主，VVC和混合性阴道炎的感染与季节相关。

阴道炎；感染；检测；微生态

阴道炎是妇科的常见病和多发病，感染复发率高，严重影响广大育龄妇女身心健康。如炎症上行还可引起宫腔炎、盆腔炎、宫颈糜烂等，严重者可以导致宫颈癌，与早产、不孕症等生殖道其它疾病相关[1-2]。根据感染病原体的不同，阴道炎在临床治疗上存在很大差异。如果不能明确病原体种类，则治疗效果往往不明显，还可能导致菌群失调或诱发耐药性，明确阴道炎感染类型对准确诊断治疗及降低复发率尤为重要。实验室检测中，阴道分泌物常规检查是确定女性泌尿生殖道感染与否及种类的重要指标，近年来随着检验技术不断进步和发展，阴道分泌物预成酶谱分析技术在临床的应用越来越广泛，其功能学指标联合阴道分泌物常规检测可快速、全面地反映阴道是否存在炎症及微生态的平衡状态，为诊疗阴道炎及其炎症类型提供依据，越来越受到临床的重视[3]。本文通过对2014年10月至2015年9月本院收治的21 812例阴道分泌物标本的常规显微镜检与需氧菌阴道炎(aerobic vaginitis,AV)/细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)五项功能学指标检测结果进行回顾性统计分析，旨在为阴道炎的疾病预防和临床治疗提供一定参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

21 812例标本均为来源于2014年10月至2015年9月因外阴不适、阴道分泌物异常等在绵阳市人民医院妇科就诊患者，年龄12～71岁。受检者检查前24 h内无性生活、盆浴、阴道灌洗及局部上药等。标本由妇科医生用无菌拭子自患者阴道后穹隆处取出阴道分泌物两份，以清晰看到棉签上有分泌物附着为准。一份用于阴道分泌物常规显微镜检测，另一份用于AV/ BV五项联合检测。

1.2 仪器与试剂

AV/BV 五项联合测定试剂盒、恒温干浴器、无菌棉拭子(由北京中生金域诊断技术有限公司提供)；显微镜 (由日本Olympus公司生产 )；10%KOH溶液 (自配)。

1.3 检测方法

取其中1支拭子将阴道分泌物涂于两张载玻片上，1张滴加生理盐水后，直接于光镜下检查阴道清洁度及有无滴虫；另l张玻片上滴入10%KOH溶液后，直接于光镜下检查有无菌丝或芽孢。

另1支附着有阴道分泌物的拭子用于AV/BV五项联合测定，由检验科技术人员严格按照试剂盒说明书进行操作：将试剂盒从2～8 ℃取出平衡到室温开始使用，在取好阴道分泌物拭子的试管中滴加联检稀释液 8～10滴，充分刷洗后用手指轻轻挤压试管壁，使拭子吸附的液体流回试管，得到样本液；在五联检卡的5个孔中每孔滴加 1滴样本液 (约35 μL)，以没过反应孔 1/2 为宜，之后在“唾液酸苷酶”反应孔中滴加1滴“显色液 A”。将反应装置放在恒温干浴器(48 ℃)中显色 10 min后在“凝固酶”反应孔中滴加1滴“显色液 B”，继续反应3 min后判读结果。

1.4 结果判断

阴道清洁度、霉菌、滴虫的常规检验等按照《全国临床检验操作规程》第3版的判断标准[4]。

联合生化检测结果的判读：(1)过氧化氢：阴性红色或紫色，阳性显蓝色，提示阴道微生态被破坏(感染期或感染治疗后未恢复)；(2)唾液酸苷酶：不显色或黄色为阴性，显红、紫、蓝色为阳性，提示BV(致病菌厌氧菌增加)；(3)白细胞酯酶：阴性不显色；阳性显蓝色或绿色，提示有炎症；(4)β-葡萄糖醛酸苷酶：不显色为阴性，显蓝色或绿色为阳性；(5)凝固酶不显色或黄色为阴性，紫红色为阳性。β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶两者同时阳性或其中一样阳性提示AV(致病菌菌需氧菌增加)。

1.5 统计学分析

采用SPSS 15.0进行统计学分析处理，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阴道分泌物送检标本几种常见阴道炎检出情况

21 812例阴道分泌物送检标本检出VVC、BV、AV、TV单一感染及各类混合感染共计13 510例，总检出率61.94%。常见阴道炎检出及构成情况，见表1。

表1 13 510例常见阴道感染检出情况

2.2 不同月份段常见阴道炎及混和感染检出情况分析

检测结果按1～3月、4～6月、7～9月、10～12月4个月份段进行统计分析，其中VVC在1～3月检出844例(15.12%)；混合感染在7～9月检出2 328例(42.48%)，检出率均明显高于其他月份段，比较差异有统计学意义(P<0.05)；常见阴道炎与季节的相关检测情况见表2。

表2 4个月份段阴道分泌物病原学检测阳性率比较

*P<0.05，与其它月份段相比。

2.3 7 119例阴道炎混合感染相关情况分析

在7 119例混合感染中，以AV混合感染为主。感染构成情况，见表3。

表3 7 119例阴道炎混合感染情况分析

2.4 乳酸杆菌失衡检测情况分析

采用阴道炎五联检AV/ BV五项功能学指标检测方法，在21 812例阴道分泌物中检出乳酸杆菌失衡17 054例，总检出率78.1 9%。常见阴道炎与阴道菌群失调密切相关。相关检测情况，见表4。

表4 21 812例阴道分泌物菌群失调检出情况

3 讨论

女性阴道为开放性腔道，正常情况下阴道内阴道菌群以乳杆菌等优势菌为主，构成微生态动态平衡体系，与宿主、环境之间相互制约、相互协调，这种协调作用和动态平衡对抑制病原微生物入侵起着决定性作用。在一些外源及内源等多种因素影响下(如滥用抗生素、不当的阴道灌洗、全身性免疫低下性疾病、性交、性激素的变化、避孕药具等)，这种生态平衡可遭到破坏．从而导致阴道微生态失调，引起阴道炎症。

常见阴道炎包括VVC、BV、AV、TV等，其中VVC主要由念珠菌中的白色念珠菌等感染所致，分为白色念珠菌和非白念珠菌性阴道炎。近年来，非白念珠菌(光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、伪热带念珠菌等)所占比例有所上升。本文统计显示：在13 510例感染标本中，VVC 2 755例占20.39%，检出率为12.63%；BV 2 310例占17.10%，检出率10.59%。VVC检出率高，可能与各种广谱抗菌药物、抗肿瘤药物、肾上腺糖皮质激素、免疫抑制性药物及口服避孕药等的广泛应用、糖尿病患者的增多以及性行为的开放有一定关系[5-6]。BV为阴道优势菌乳酸杆菌大量减少，厌氧菌群大量增生导致的菌群紊乱后临床征候群。本文统计VVC检出率高于BV，与肖冰冰等[7]调查显示一致，而石晓等[8]调查显示，BV检出率高于VVC及TV，表明我国不同地区分布情况存在一定差异。其原因可能与调查的时间、季节、就诊人群、不同地区气候及卫生环境等存在一定差异有关[9]。TV是由阴道毛滴虫感染引起的生殖道炎症，主要经性接触传播，极少数由浴池、厕所间接传播，属性传播感染，本研究统计TV明显减少，检出率仅为1.37%，可能是与卫生习惯的改善及卫生意识提高有关。AV是近年来新发现的一种阴道炎，为由需氧菌感染引起的一种生殖系统疾病，和BV有很多相似的特征，是产科和妇科的高风险疾病[10-11]。当患AV时，阴道乳酸杆菌减少，阴道壁黏膜充血、水肿，出现脓性分泌物，临床以阴道异常分泌物、性交痛为主要表现，AV与混合型感染密切相关。

混合性阴道炎是霉菌、细菌、滴虫等二种及以上同时感染的阴道炎，发生率近年呈上升趋势。由于检测方法不同，单方面从AV或BV的角度对混合型感染进行统计分析的报道较多见，而将两者放在一起进行统计分析的资料相对较少。本文从这方面切入，对混合性阴道感染进行了分析统计，统计显示本地区阴道混合感染的发生率高，构成比为52.69%，与国内报告一致[12]。我国国内报道40%～50%以上的阴道炎为混合型感染，国外报告为30%。混合感染中细菌性感染占主要地位，本文统计显示7 119例混合感染中以AV混合感染为多见，总计占69.06%，BV混合感染总计占30.94%。在AV混合感染中，AV与VVC的混合感染多见，占32.63 %，AV合并BV次之，类型与国外的报告一致[13-14]。混合型阴道感染检出率近年来明显上升除其感染病例确实较多外，可能与检测水平，检测技术的提高，特别是主要引起混合感染的AV近年来的逐渐认识及检测有关。在工作中应重视发现阴道的混合感染状态，明确感染类型，为全面地、有效的治疗及降低复发率提供依据。

为研究阴道感染与季节变化的关系，本文分4个月份段对其感染情况进行了统计分析，统计显示VVC在1～3月份段感染率15.12%，明显高于其它3个月份段，比较差异有统计学意义(P<0.05)；这可能与当地1～3月气候多雨潮湿有关；混合感染在7～9月感染率42.48%，明显高于其它月份段，比较差异有统计学意义(P<0.05)。7～9月为气温最高的季节，这个月份段阴道混合感染发病率高，是否为气温上升导致AV易发生混合感染所致，需要进一步资料证实。

阴道炎是临床常见病多发病，复发率高。资料显示细菌性阴道炎临床治愈率达90%左右，容易在3个月内复发[14]，如果反映阴道微生态平衡的指标未恢复正常，即使阴道炎症状、体征及病原体消失，复发的可能性仍然很大。在正常状态下阴道内的乳杆菌，在维持阴道微生态平衡，防御生殖道感染方面发挥重要作用。乳酸杆菌分泌过氧化氢，阴道炎AV/ BV五项联合检测技术即是通过对反映正常阴道菌群生态状况的过氧化氢的检测作为评价阴道微生态的指标，活性高低直接反映了阴道内乳酸杆菌数量。统计显示，在受检的21 812例患者中，过氧化氢呈阳性，乳酸杆菌失衡17 054例，检出率78.19%，常见阴道炎与阴道菌群失调密切相关，VVC、BV、AV、TV及混合感染菌群失调的检出百分比分别为83.85% 、95.67%、100%、96.97%、100%。而无特殊病原菌的未被定义及分类的阴道微生态失调检出率达49.36%，说明本地区女性阴道炎症中阴道菌群失调症常见，应引起注意。

综上所述，本地区常见阴道炎及阴道炎混合感染发生率高，在女性阴道炎的诊疗中实验室通过菌群和功能检测给临床医生以预见性的提案，可减少因症状消失但阴道微生态平衡未完全恢复而停止治疗的表面治愈，也避免因有症状但未明确感染类型而反复持续用药的过度治疗，对降低女性阴道炎感染复发率，减少细菌耐药至关重要。临床对相应的病原体在进行抗生素或抗真菌治疗的同时，使用一些生物制剂来调整或维护阴道内环境的生态平衡，将治疗理念由纯粹杀菌转向杀菌同时促菌，并合理应用抗生素，是生殖道感染治疗的必然趋势。

[1] Menad JP,Bretelle F.How can the treatment of bacterial vaginosis be improved to reduce the risk of preterm delivery?[J].Women S Health,2012,8(5):491-493.

[2] Capoccia R,Greub G,Baud D.Ureaplasma urealyticum,Mycoplasma hominis and adverse pregnancy outcomes[J].Curr Opin Infect Dis,2013,26(3):231-240.

[3] 张秋菊，石瑛，郭瑞莹，等.阴道微生态评价在妊娠期妇女阴道感染诊断中的意义[J].检验医学与临床,2014，11(2)：1-4.

[4] 叶应妮,王鋶三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版，南京：东南大学出版社，2006:324.

[5] 曹泽毅.中华妇产科学[M]．第2版，北京：人民卫生出版社,2004:1352-1358．

[6] 乐杰．妇产科学[M].第6版，北京：人民卫生出版社，2004:256-263．

[7] 肖冰冰，刘朝晖，廖秦平，等．妇科门诊不同阴道症状就诊者阴道微生态状况调查[J]．中华妇产科杂志，2009，44(1)：6-8．

[8] 石晓,王素燕.我国阴道炎患者阴道分泌物病原体分布情况[J].中国实验诊断学,2012,16(1):138-140.

[9] 肖彩艳，张洪文，王新，等.2 066例妇女阴道微生态失调构成情况分析[J].国际妇产科学杂志，2012,39(2)：191-192.

[10]Donati L,Di Vico A,Nucci M,etal.Vaginal microbial flora and outcome of pregnancy[J] .Arch Gynecol Obstet,2010,281(4):589-600.

[11]Donders G,Bellen G,Rezeberga D.Aerobic vaginitis in pregnancy[J].BJOG: An Interna-tional Journal of Obstetrics and Gynecology,2011:118(10):1163-1170.

[12]范爱萍，薛凤霞.需氧菌性阴道炎及其混合感染的临床特征分析[J]．中国妇产科杂志，2010,45(12):904-908.

[13]Cepicky P，Malina J，Libalova Z,etal.“Mixed”and“mis-cellaneous”vulv ovaginitis：diagnostics and therapy of vaginal administration of nystatin and nifurateL[J].Ceska Gynekol，2005,70(3):232-237．

[14]Bradshaw CS，Morton AN，Garland SM，etal．Evaluation of a Poin-of-care test．BV Blue．and clinical and laboratory criteria for diag nosis of bacterial vaginosis1[J].J Clin Microbiol,2005，43(3)：1304-1308.

(学术编辑：赵明才)

Pathogen detection of common vaginitis and analysison micro-ecological status

WANG Chun，ZENG Bai-hua，YANG Qin

(DepartmentofClinicalLaboratory，People’sHospitalofMianyangCity,Mianyang621000,Sichuan，China)

Objective：To understand the infections of pathogens and micro-ecological status of local female patients with vaginitis,and provide evidence for clinical diagnosis and treatment of vaginitis.Methods：By using routine vaginal microscopy combined with aerobic vaginitis (AV) / bacterial vaginosis ( BV) five pre enzyme spectrum analysis of vaginal secretion in 21812 cases of gynecological patients were detected.Results：There were altogether 13 510 vaginal secretion specimens that had been detected with vulvovaginal candidiasis(VVC),bacterial vaginosis(BV),aerobic vaginitis(AV) and trichomonas vaginitis(TV) and the total detection rate was 61.94%.Among the 13 510 specimens,6 391 specimens(47.31%) were single infection and 7 119 specimens(52.69%) were mixed infection.Among the mixed infection,there were 2323 cases of AV complicated with VVC,which accounted for 32.63%,2113 cases of AV complicated with BV which accounted for 29.68%.The detected results were divided into four segments of month for statistical analysis.844 cases of VVC (15.12%) were detected 1-3 months and 2328 cases of mixed infections (42.48%) were detected 7-9 months.The detection rates were significantly higher than in other segments of month and the differences were statistically significant (P<0.05).The detection rate of lactobacilli dysbacteriosis was 78.19%.Vaginal dysbacteriosis and common vaginitis was closely related.The lactobacilli dysbacteriosis rate of VVC,BV,AV,TV and mixed infection was respectively 83.85%,95.67%,100%,96.97% and 100%.Conclusion：There is a high incidence of common vaginitis and mixed infection in local region.Common vaginitis and mixed infection rate in the region is high,vaginal flora imbalance,mixed vaginitis mixed with AV infection,VVC and mixed vaginitis infection and seasonal correlation.

Vaginitis；Infection；Detection；Micro-ecology

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.06.028

2016-01-08

王春(1964-)，女，主管检验师。E-mail: 3074627509@qq.com

时间：2017-1-3 22∶01

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170103.2201.056.html

1005-3697(2016)06-0877-04

R711.3

A