刍议血液进行核酸检测的重要性

时玲玲河南省焦作市中心血站献血办，河南焦作　454000



刍议血液进行核酸检测的重要性

时玲玲
河南省焦作市中心血站献血办，河南焦作454000

［摘要］改革开放带了的不仅仅是科技的发展和经济的进步，而且还带来了一些新型的病毒，例如HIV病毒，乙肝病毒等，特别是HIV病毒，即艾滋病患者携带的病毒，到现在为止，依然没有办法治愈艾滋病，沾染了HIV就相当于宣告了死亡，HIV的传播途径中，有一项是血液传播，而且，每年因为血液接触而患上艾滋病的不再少数，所以对血液进行核算检测是十分重要的。为了分析血液进行核酸检测的重要性，该院对2015年上半年未进行核酸检测和下半年进行核算建成进行对比，并得出结果对无偿献血者进行的核酸检测，不但降低了输血的风险，而且降低了血液浪费。下面首先介绍我血战所做的研究与所得到的结果，其次介绍血液核酸检测的一般方法，最后介绍核酸检测的优点。

［关键词］血液；核酸检测；重要性

核酸检测已经成为发达国家和发展中国家献血者传染病筛查的重要内容，核酸检测主要是通过对某些病毒的DNA进行检测，以鉴定血液中是否存在这些病毒。核酸检测可以有效地缩短病毒特异抗原和抗体免疫测定的“窗口期”，从而减少输血风险，提高输血安全。所谓窗口期是指人感染病毒后到外周血液中能够检测中该病毒抗体的这段时间。核酸检测一般检测的病毒有：（1）乙肝病毒，乙肝核酸检测不仅可以缩短乙肝病毒感染的窗口期，而且还可以减少乙肝病毒携带者以及乙肝病毒变异的漏诊率；（2）丙肝病毒，核酸检测既可以将感染的检测的窗口期，还可以减少免疫静默感染的漏检；（3）人类免疫缺陷病毒，即HIV病毒，可以缩短HIV感染检测的窗口期［1］。

1　该血站血液核酸检测中实践与效果

国内血站血液检测大部分采用ELISA检测方法，由于该方法本身的局限性，使临床输血传播风险依旧存在。2010年我国部分血站开始核酸检测试点，2012年原卫生部颁布血站技术标准，将核酸检测（NAT）纳入血液检测项目，开启了我国血液NAT检测时代。NAT可明显缩短病毒检测的“窗口期”，由于NAT检测与ELLSA检测组成的检测系统可优势互补，提高了血液筛查的质量，降低了输血残余风险，但由于核酸检测代价高，使部分血站不愿意进行核酸检测。该血站于2015年7月在省内率先进行核算检测，先将该站的研究结果汇报：通过研究对比得出，上半年不合格人数占上半年采血量的1%，下半年不合格人数占下半年采血量的0.5%，下半年不合格人数只占全年不合格人数的34%，充分说明进行核酸检测后：①减少了血液浪费，保证了献血队伍。②缩短了窗口期，阻断部分因ELLSA检测“窗口期”漏检而导致的输血传染病发生，从而降低输血传播性疾病风险，血液安全得到了大幅度的提升。③避免了假阳性的的出现，因献血者得知自己如果是阳性病人时，由于对传染病的认识不够，会造成生活，工作，家庭面临着巨大的压力［2］。④从目前国内部分血站的检测数据看：HBV、HCV和HIV检测的窗口期缩短，并且检出了一定数量上ELISA试剂阴性的阳性样品，从理论上分析可以在一定程度上减少输血传播疾病的风险。⑤目前该省已进行集中化检测，该站接受来自省内附近地市如安阳、濮阳、济源、鹤壁的血样，大大降低了血液检测成本［3］。

2　血液核酸检测的一般方法

2.1聚合酶连反应扩增方法

聚合酶连反应，即PCR，它是一种在体外模拟人体内DNA的复制过程，从而扩增核酸的数量，最早使用电泳的方式扩增核酸，这种电泳方式不与外界隔离，所以目标核酸容易被污染，这种方式基本已经被淘汰了。目前临床上最常使用的是，利用荧光定量PCR，不仅可以用于各种传染病的诊断，还可以对疾病治疗之后的效果进行评估。利用荧光标记探针，然后与目标核酸杂交，就可以在PCR增值扩张之后，找到目标核酸，减少其他污染的核酸带来的干扰，这样就提高了核酸检测的灵敏度和特异度［4］。

2.2转录介导法

这种方法包括TMA和核酸序列依赖扩增系统，TMA是利用一种特殊的逆转录酶和一种RNA多聚酶，在一定的温度下，对RNA和DNA进行扩增的方法，其原理是：在逆转录酶的作用下，以病毒的核酸为模板，转录出另一条核酸，然后利用逆转录酶的功能将，原来模板与转录的核酸分离降解，然后利用RNA多聚酶，转录出多个RNA。核酸序列依赖扩增系统与TMA基本上相同，只不过是在核酸提取以及增值产物的方法上有所不同。这两种方法相比较PCR来说，更加简单，因为它需要的温度是恒定的，所以反应过程简单，效率相对较高［5］。

TMA与PCR有一些不同之处，主要表现在：第一，TMA是一种等温的增值，它不需要PCR扩张技术中解链、退火、延伸三个过程中所需要的不同温度；第二，TMA的技术产物是核酸即RNA，而PCR的产物是核糖核酸，即DNA；第三，TMA模拟的是DNA转录RNA的过程，而PCR模拟DNA复制为DNA的过程。两种方法各有各的优点，国内大多都使用荧光标记PCR的技术，但是仍然有一些漏检，所以学者还需要在血液筛查的技术上多做研究［6］。

3　核酸检测的优点

核酸检测是直接将病毒的核酸做检测的一系列技术的合称，它的方法比较复杂，需要用到物理、化学、生物等多门学科的理论知识，通过把某种核酸增值，或将核酸所携带的信号放大，让含量极少的核酸，变成可以直视的、形象的表现，从而判断样本中是否存在该种病毒［7］。

3.1提高检出率，从而使输血更加安全

国内外做过大量的核酸检测的研究，基本可以证明，核酸检测可以减少各种原因导致的病毒漏检，从而使采集到的血液更加安全，也不会污染其他血液［8］。

3.2可以减少疾病再次传播

核酸检测的结果与第三代酶免检测相结合可以反映出献血者是否感染传染病，以及献血者的感染状况，通过对核酸检测阳性的献血者，进一步检查，追踪寻访，可以发现一些处于窗口期的献血者，不仅保障血液的安全性，而且可以提醒献血者及早就医，降低献血者因为不知情而传染给他人的风险［9］。

3.3检测模式更加优化

核酸检测可以使血液检测的模式更加优化，提高了检测的检出率，防止携带病毒的献血者的血液污染其他质量合格的血液，核酸检测可以取代一些其他的血液检测，例如可以取代2次第三代酶免检测中的一次，或许也能取代谷丙转氨酶的检测。所以说核酸检测可以将血站血液检测的过程简化，而不耽误检测的准确度，可以减少浪费，提高血站的工作效率。

3.4对输血的风险进行评估

因为核酸检测的高灵敏性，可以弥补第三代酶免检测中的漏洞，能够将第三代酶免检测漏检的样本重新检测出来，并且通过计算机计算，可以得出我国经过输血传播疾病的残余风险，核酸检测获得的参与风险数据，可以作为金标准检测或校正数学模型推算出来的参与风险的准确性，这样也可以促进数学模型的进化。

虽然说核酸检测有很多的优点，但也有很多因素影响血液核酸检测的结果。在检测过程中要注意：第一，我国乙肝病毒的患者和携带者都比较多，所以，应该十分重视乙肝病毒的核酸检测；第二，要重视核酸检测工作的管理，在选择筛选的试剂时，一定要选择灵敏度和特异度都比较高的的试剂，尤其是乙肝病毒的筛选，一定要比其他病毒的筛选更加灵敏；第三，有的时候，为了降低检测的成本，会将样本混合检测，这种检测虽然降低成本，但是一旦其中有一个样本有病毒，那么整个血液都会被浪费掉，所以要减少混合样本的数量［10］。

4　结语

传染病中有很大一部分都是通过血液传播的。所以输血的安全性是全世界都在关注的焦点，核酸检测是一种检测出献血者是否携带病毒的有效的方式之一。该血站研究结果表明，核酸检测可明显缩短病毒检测的“窗口期”，由于NAT检测与ELLSA检测组成的检测系统可优势互补，提高了血液筛查的质量，降低了输血残余风险。核酸检测的方法最常见的为聚合酶连反应扩增方法以及转录介导法，两种方法目的一致，但是，过程有一些不同。核酸检测具有提高检出率，从而使输血更加安全、可以减少疾病再次传播、检测模式更加优化、对输血的风险进行评估等优点，但是因为血液核酸检测的特殊性，我们在检测血液核酸时，也应关注其影响因素把不利因素隆到最低。

［参考文献］

［1］邓雪莲，安万新，梁晓华，等.大连市血液中心血清学检测与核酸检测并行的效果观察［J］.中国输血杂志，2012，25（1）﹕38-40.

［2］王东，于原，臧亮，等.单人份核酸检测在血液乙型肝炎病毒筛查中的应用［J］.国际检验医学杂志，2012，33（7）﹕780-781.

［3］冯晴，孟忠华，吕杭军，等.浙江省血站血液集中化检测工作实践对于规划全省血液核酸检测的启示［J］.中国输血杂志，2014，27（8）﹕880-881.

［4］夏云峰.张家港地区献血者血液核酸检测结果分析［J］.国际检验医学杂志，2013，34（16）﹕2174-2175.

［5］蔡丽娜，陈宝安.核酸扩增技术（NAT）在献血者血液初筛中的应用现状［J］.中国实验血液学杂志，2014，22（4）﹕1171-1177.

［6］李执如，李文，高加良，等.血站NAT检测试剂调查和血液筛检结果分析［J］.现代预防医学，2014，41（14）﹕2619-2622.

［7］李剑军，张鸿满，沈智勇，等.集合核酸检测用于低档场所女性性工作者HIV急性感染诊断及发病率估计［J］.中华流行病学杂志，2014，35（3）﹕259-261.

［8］黄爱琼.2014年广州地区无偿献血者血液核酸检测试剂损耗原因［J］.中外医学研究，2015，13（36）﹕149-151.

［9］刘颖，邓雪莲，薛萍，等.无偿献血者血液HBV核酸筛查研究［J］.国际检验医学杂志，2013，34（6）﹕732-734.

［10］伍晓菲，贾尧，黄宇闻，等.2011-2014年中国国际输血感染预防和控制（CITIC）项目血液筛查核酸检测室间质评结果分析［J］.中国输血杂志，2015，28（11）﹕1410-1413.

Discussion on the Importance of Nucleic Acid Detection in Blood

SHI Ling-ling
Henan Province Jiaozuo City Blood Donation Office，Jiaozuo，Henan Province，454000 China

［Abstract］With the policy of reform and opening to the outside world is not only the progress of science and technology and the development of economy，but also bring some new virus，like HIV，hepatitis B virus，especially HIV，the AIDS patients carrying the virus，up to now，still do not have the means to cure AIDS，was infected with the HIV is a declaration of death，the routes of HIV transmission，is a blood borne，and the annual because of exposure to blood from AIDS is no longer a few，so the blood were accounting detection is very important.The importance of nucleic acid detection in order to analyze the blood，our hospital to 2015 half a year without nucleic acid detection and the second half of the accounting built were compared，and the result﹕nucleic acid detection of unpaid blood donors，not only reduces the risk of blood transfusion，and reduces the waste of liquid blood.Below introduces my bloody research and the obtained results，followed by the introduction of the general method of nucleic acid blood tests，finally introduces the advantages of nucleic acid detection.

［Key words］Blood；Nucleic acid detection；Importance

［中图分类号］R450

［文献标识码］A

［文章编号］1672-5654（2016）03（a）-0107-03

DOI：10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.07.107

［作者简介］时玲玲（1980.6-），女，河南原阳人，本科，护师，主要从事输血招募工作。

收稿日期：（2016-01-05）