化疗药物卵巢毒性的研究进展

张 婷，贺婉红，俸灵林

（上海市计划生育科学研究所，国家人口计生委计划生育药具重点实验室，上海生殖健康药具工程技术研究中心，上海 200032）

化疗药物卵巢毒性的研究进展

张 婷，贺婉红，俸灵林

（上海市计划生育科学研究所，国家人口计生委计划生育药具重点实验室，上海生殖健康药具工程技术研究中心，上海 200032）

化疗药物治疗年轻女性肿瘤患者引起的生殖系统损伤之一就是卵巢损伤，能使卵巢早衰，导致生育能力下降，有的甚至对生殖系统产生不可逆的永久损害。临床上常用的化疗药物如多西他赛、伊立替康、环磷酰胺、顺铂和多柔比星（阿霉素）对卵巢均有明显毒性，不同药物诱导的卵巢毒性机制也各不相同。卵巢毒性的产生跟卵巢部位急性血管损伤、活性氧族诱导的氧化应激反应、信号转导通路中磷脂酰肌醇-3-激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶通路异常以及类固醇激素分泌通路抑制有关。临床上已采取了一些化疗药物治疗期间保留卵巢生育功能的方法，同时一些防治卵巢毒性的方法也在积极探索中。为了更好地防治化疗药物引起的卵巢毒性，验证了卵巢储备的指标并建立一些卵巢毒性体外研究方法。随着对卵巢毒性机制的深入了解和防治方法的多元化，化疗药物治疗和卵巢生殖功能保留这两者之间未来会有一个较好的平衡点。

化疗药物治疗；毒性；卵巢；卵泡；颗粒细胞

化疗药物治疗年轻女性肿瘤患者中最常见的副作用之一就是雌性生殖系统损伤，特别是卵巢损伤。化疗药物通过对卵巢卵泡、颗粒细胞、卵母细胞和间充质细胞的损伤破坏卵巢功能，其损伤程度与患者年龄、药物剂量高低和治疗范围相关［1］。研究发现，一些常见的化疗药物如多西他赛（docetax⁃el，DOC）、伊立替康（irinotecan，CPT-11）、环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）、顺铂和多柔比星（doxorubicin，DXR）均能引起不孕、流产和胚胎异常。这些化疗药物产生卵巢毒性症状和机制各不相同，如DOC主要影响发育期卵泡的颗粒细胞，激活卵巢颗粒细胞内源性的Ⅱ型凋亡［2］；CPT-11能剂量依赖性地促进小鼠卵巢卵泡凋亡［3］；CTX诱导生殖细胞的失活导致生殖细胞和间质支持细胞间的相互作用停止，最终引起无增殖的体细胞退化［4-6］；顺铂能剂量依赖性诱导黄体化颗粒细胞凋亡，下调其上雌激素受体β和促卵泡激素受体的表达［7］；DXR能穿过血-卵泡屏障，累积在卵母细胞和颗粒细胞中，对小鼠MII期卵母细胞有毒性，还能引起的胚泡期卵母细胞的凋亡［8］。尽管在作用机制方面已取得不少研究进展，但仍有很多问题尚不明确。

据报道，卵巢毒性的发生与卵巢毒性物质引起的卵巢部位的急性血管损伤［9］、活性氧族（reactive oxygen species，ROS）诱导的氧化应激反应［10］，磷脂酰肌醇-3-激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶（phosphoino⁃sitiol-3-kinaseserine/threonine kinase，PI3K/AKT）信号通路的异常［11］和腺苷酸环化酶蛋白激酶A体系（cyclic adenosine monophosphate-protein ki⁃nase A system，cAMP-PKA）中类固醇激素分泌通路的抑制有关［12］。

临床上防治化疗药物治疗中产生的卵巢毒性常用的手段包括激素预防［13-15］、卵巢冷冻、卵母细胞冷冻和胚胎冷冻等，辅助生殖技术已经广泛用于卵巢功能保护，使一些女性肿瘤患者化疗后恢复了生育功能。除此之外，一些更易操作的方法也不断被探索，骨间质干细胞治疗显现出较好的应用前景［16-17］，化学药物和天然物质在对抗环磷酰胺［18-20］、顺铂［21］、DXR［22］引起的卵巢毒性上卓有成效，特别是天然物质对卵巢毒性中产生的氧化应激反应有明显抑制效果［20，23］。目前评估卵巢储备最可靠的指标是抗苗勒管激素（anti-müllerian hormone，AMH），它也同样适用于评估化疗药物化疗之后的卵巢储备［24-25］。卵巢毒性的体外评价方法例如RNA合成法对明确化合物DNA毒性［26］和腔前卵泡培养法快速筛选有卵巢毒性的化合物［27］都有重要的意义。

尽管临床上已采用一些防治化疗引起卵巢毒性的方法，但这些治疗手段依然存在或多或少的问题，这主要是由于化疗药物的卵巢毒性机制研究尚不够透彻。研究这些作用机制对今后化疗药物诱发卵巢毒性的防治均有很大的帮助。医务人员知道卵巢毒性中具体的影响因素，在保留卵巢生育力时会将这些因素很好地考虑进去，可以方便女性肿瘤患者治疗时选择较好的生育力保留方案。

1 化疗药物卵巢毒性及相关机制

据报道，一些临床上常用的化疗药物有明显的卵巢毒性，如多西他赛、伊立替康、环磷酰胺、顺铂和阿霉素。这些化疗药物通过对卵巢卵泡、颗粒细胞、卵母细胞和间质细胞的损伤来破坏卵巢的功能，其损伤的程度与患者的年龄、药物的剂量高低和治疗范围相关［1］。

多西他赛是紫杉醇类化合物，主要治疗晚期乳腺癌、卵巢癌和非小细胞肺癌，对头颈部癌、小细胞肺癌、胃癌、胰腺癌和黑色素瘤等也有一定疗效。研究发现，多西他赛能引起中等程度的卵巢毒性，主要是影响早期发育卵泡中的颗粒细胞。使用终浓度为0.1，1和10 μmol·L-1的DOC对体外培养6日龄小鼠卵巢作用24 h，发现DOC对早期发育的卵泡有影响，能减少初级卵泡的数目，严重影响从腔前卵泡到初级卵泡之间过渡期卵泡和初级卵泡的生长。但DOC只特异性地损伤生长状态的卵泡，对原始卵泡及其储备并无直接的影响。DOC通过对卵泡颗粒细胞的损伤进而引起卵泡的损伤，造成卵泡发育不良。免疫组化和蛋白质印迹实验显示，DOC激活初级卵泡中颗粒细胞内源性的Ⅱ型细胞凋亡，促进颗粒细胞胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶8、BAX蛋白和腺苷二磷酸核糖聚合酶表达水平增高，诱导细胞色素c从线粒体释放到胞浆中。这些结果证明，DOC通过诱导小鼠卵泡颗粒细胞的凋亡产生生殖腺毒性，对卵泡卵母细胞无直接作用［2］。

临床使用伊立替康结合化疗常导致绝经前和围绝经期癌症患者卵巢功能障碍。临床治疗剂量的CPT-11腹腔注射8周龄雌性MCH小鼠，采用转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记（transferase-mediated deoxyuridine triphosphatebiotin nick end labeling，TUNEL）实验检测卵巢中的凋亡细胞，免疫组化法检测胱天蛋白酶3、Fas抗原和Fas配体的表达变化。CPT-11能剂量依赖性地增强小鼠卵巢卵泡凋亡进程，特异性地诱导TU⁃NEL-阳性细胞，增高颗粒细胞中胱天蛋白酶3表达。一般而言，Fas抗原在卵巢大多数细胞中均表达，在黄体细胞中的表达相对较高，Fas配体在正常卵巢中无表达。但CPT-11可剂量依赖性地诱导发育卵泡颗粒细胞中特定的Fas配体表达，使之与颗粒细胞持续表达Fas抗原发生结合反应，从而诱导颗粒细胞的凋亡。CPT-11诱导颗粒细胞出现这种细胞特异性和分化阶段特异性的凋亡被认为是CPT-11结合化疗引起卵巢功能紊乱的主要分子机制［3］。

孕期接触环磷酰胺会影响胎儿的生育力。研究发现，孕鼠在孕期第10 ～20天，每天ip给予CTX 2 mg·kg-1，第20天处死孕鼠。病理检查发现，胚胎卵巢间质出现一些类网状组织，而且类网状组织里充满大量液体样物质。卵巢体细胞数目下降，卵泡里生殖细胞大量减少。生殖细胞的失活导致生殖细胞和间质支持细胞间的相互作用停止，最终引起无增殖的体细胞退化。因此，产前接触CTX会阻碍胚胎卵泡的形成，诱导胚胎性成熟后卵巢不排卵并导致不孕［4］。发育期小鼠使用CTX后，无论卵巢功能是否出现异常，都可以导致卵巢重量明显下降。18日龄青春期前的雌性C57BL/6J小鼠随机接受对照组，CTX 120或200 mg·kg-1，给药56 d后安乐死。和对照组相比，即使CTX对小鼠的身高和体质量没有明显的影响，但对小鼠股骨、卵巢和子宫有不良影响，小鼠的右侧股骨变短，卵巢重量也明显下降，对子宫的发育影响主要依赖于药物引起的性激素变化，而非药物直接的作用［5］。

顺铂能剂量依赖性诱导卵巢黄体化颗粒细胞凋亡，下调黄体化颗粒细胞上雌激素受体-β和促卵泡激素受体的表达来影响人卵巢黄体化颗粒细胞活性，进而引起卵巢毒性［6］。奥沙利铂属于第三代铂化合物，能抑制肿瘤细胞DNA合成，奥沙利铂治疗期间常观察到的毒性是发生率高达70%血小板减少症，导致化疗延迟甚至中断，这种血小板生成异常也能引起卵巢毒性［7］。

多柔比星是治疗急性淋巴细胞和粒细胞白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌、支气管肺癌（未分化小细胞性和非小细胞性）等肿瘤的有效抗肿瘤药。DXR能穿过血-卵泡屏障，累积在卵母细胞和颗粒细胞中，对小鼠MⅡ期卵母细胞有毒性，还能引起胚泡（germinal vesicle，GV）期卵母细胞的凋亡。与MⅡ期卵母细胞相比，GV期卵母细胞对DXR毒性更敏感。DXR在GV期卵母细胞中释放凋亡信号，激活线粒体并诱导雌激素受体表达增加，并增加钙离子的细胞内流。DXR诱发凋亡机制与染色体异常分裂，线粒体激活，蛋白激酶样内质网激酶和胱天蛋白酶12激活，以及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的失活有关［8］。

2 与卵巢毒性相关的因素

2.1 卵巢毒性和卵巢急性血管损伤的关系

年轻肿瘤患者化疗前后的卵巢血流跟踪研究发现卵巢毒性可能来自药物对卵巢部位的急性血管损伤。年龄可影响这些患者能否重新恢复卵巢生育功能，＜35岁患者卵巢血流恢复较快，研究还发现治疗结束后第12个月恢复绝经前卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平的人数也相当显著。20名平均年龄34岁乳腺癌患者分别在化疗开始时，治疗结束时，治疗结束后6和12个月，检测卵巢脉管阻力指数，脉动指数和AMH的变化。研究发现，化疗开始后卵巢血流下降明显（脉管阻力指数和脉动指数；P=0.01），卵巢血流在化疗结束后6 ～12个月会有部分恢复，＜35岁患者比起＞35岁患者卵巢血流恢复明显要快（P＜0.05）。化疗开始后AMH也显著降低（P＜0.01），实验终点前仅有10名患者恢复AMH水平。不少患者卵巢相关激素水平在化疗后很快表现出绝经期的特征，＞35岁的患者中，FSH的水平恢复率为14/20，能显著回升到绝经前的水平（P=0.04），化疗结束后第12个月有10/20的患者会重新来月经。以曲妥珠单抗为基础的肿瘤治疗方案中血管受损的情况相对较轻，但无统计学差异（P=0.068）。这说明化疗药物的血管毒性对肿瘤治疗后卵巢损伤的恢复具有相当大的影响，降低卵巢血管毒性对减轻卵巢毒性具有积极的意义［9］。

2.2 卵巢毒性与ROS的关系

当细胞自身调节ROS的功能失灵时，ROS过量产生或抗氧化剂不足即诱发氧化应激反应。目前原始卵泡和初级卵泡的死亡与ROS关系的研究相对较少，但几项研究证明ROS在这些较小卵泡的发育中也起到了作用。很多数据表明ROS参与了毒性化学和物理因子诱发的囊状卵泡的凋亡。卵泡发育的早期如接触有毒化学物质，可引起卵母细胞脂质层的氧化损伤，进而引起卵母细胞损伤。胚胎卵巢中发育的干细胞对毒性物质也很敏感，能引起氧化应激反应，这些研究揭示了ROS参与了卵巢毒性反应的机制［10］。

2.3 卵巢毒性和PI3K/AKT通路的关系

卵巢毒性的机制非常复杂，涉及一系列生物异源物质代谢，细胞反应，细胞周期，细胞死亡的过程。PI3K/AKT信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一，影响下游多种效应分子的活化状态，在细胞内发挥着抑制凋亡、促进增殖的关键作用，PI3K/AKT途径能促进原始卵泡活化和生存。研究发现卵巢暴露于毒性物质能抑制PI3K/AKT信号通路引起发育中的卵泡闭锁和原始卵泡异常活化，通过耗竭原始卵泡导致卵巢功能早衰。原始卵泡暴露于毒性物质能激活AKT1产生大量磷酸化抑制效应，但具体机制仍待研究［11］。

2.4 卵巢毒性和cAMP-PKA类固醇激素分泌通路的关系

cAMP-PKA属于环核苷酸系统，该系统中细胞外信号与相应受体结合，通过调节细胞内第二信使cAMP的水平引起反应。信号分子通常是激素，促性腺激素激活的类固醇生成受cAMP-PKA途径调控。cAMP激活的类固醇急性调节蛋白是孕酮合成中的限速蛋白，也是卵巢毒性物质敏感的作用标靶，蛋白质印迹实验和半定量逆转录PCR结果均显示，卵巢毒性物质能显著性地抑制类固醇急性调节蛋白表达，还能剂量依赖性地抑制大鼠卵巢颗粒细胞的生长和甾类激素的生成，抑制FSH类似物8-溴-环化腺苷酸生成和诱导孕酮生成的黄体酮底物22-羟胆固醇［12］。

3 化疗药物治疗保留生育功能的临床防治方法

在非卵巢癌患者化疗后保护卵巢生育功能是一个艰巨的挑战。据统计大约12%乳腺癌病例发生在＜35岁，因此，年轻女性患者可能会考虑化疗中保留卵巢生育功能和治疗后生育力的恢复。除化疗期间患者暴露在细胞毒剂里，相当数量患者的抗激素治疗还要持续多年。化疗及抗激素治疗后，患者可能会出现卵巢早衰。并且，年轻患者在化疗后不得不推迟怀孕，而怀孕的概率本身就大大降低。年轻患者与绝经后患者相比，绝经前患者比绝经后老年患者有更高的乳腺癌基因突变的可能性，本身可能面临着更糟糕的预后。因此，即使保留卵巢，在卵巢中发现癌症的风险可能很高，卵巢中可能存在相当多的肿瘤细胞［1］。

针对那些接受化疗药物的年轻肿瘤患者，国外的治疗通常会采用最佳治疗方案以最大程度地减少药物对生殖系统的影响。在青春期前，为防止化疗损伤卵巢而将卵巢取出冷冻保存，此外常用的方法还包括激素预防［13-15］、卵母细胞冷冻、胚胎冷冻等，辅助生殖技术已广泛用于卵巢功能保护上。在可行的情况下，从乳腺癌的诊断到化疗开始前可选择紧急体外受精，胚胎冻存来保存生育能力。但目前对于卵巢移植和冻存技术方面，还有许多问题尚未解决：如何寻找最佳冷冻方案以减少卵巢冷冻损伤；如何选择最佳移植位点，以便为卵巢提供良好的生存条件，同时便于检测卵泡成熟；同种移植卵巢的安全性，大多数冷冻卵巢同体移植是为了保存肿瘤患者的生育功能，而恶性肿瘤患者的卵巢中是否存在微小癌灶、卵巢移植是否会将肿瘤细胞移回体内尚待进一步研究，这可能会带来癌症的新风险。

4 化疗药物卵巢毒性治疗方法的探索

4.1 骨间充质干细胞（bone mesenchymal stem cell，BMMSC）

对女性肿瘤患者使用CTX，引起原始卵泡的破坏导致未成熟卵巢损伤。青春期骨间充质干细胞对CTX引起的卵巢损伤有一定保护作用。比较BMMSC和性腺激素释放激素类似物（gonadal re⁃leasing hormone analogue，GnRHa）对化疗引起的卵巢毒性的保护作用，雌小鼠分别接受CTX、CTX+GnRHa、CTX+BMMSC、CTX+GnRHa+ BMMSC，结果显示BMMSC能保护原始卵泡，抑制CTX引起的卵巢胱天蛋白酶9表达增高和TUNEL凋亡水平增高（P＜0.05），保留SRY基因，对CTX引起的DNA损伤有保护作用［16］。

注射间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）能治疗化药诱导的兔卵巢衰竭。从雄兔骨髓中抽提MSC给予雌兔后，与不接受MSC治疗的阴性对照组相比，MSC通过激发卵巢细胞的自愈和再生改善CTX引起兔卵巢早衰，卵泡数有明显增高，卵泡结构也趋于正常。MSC还可使卵巢损伤后升高的FSH明显下降，减缓卵巢损伤后胱天蛋白酶3的表达异常增高，使+ve增殖细胞核抗原增多，增高卵巢血管内皮生长因子表达和分泌以影响卵巢的再生［17］。

4.2 促性腺激素释放激素受体激动剂（gonadal releasing hormone，GnRH）

GnRH受体激动剂与化疗药物合用，能对抗化疗所致的绝经前乳腺癌女性患者卵巢损害。电子文献数据库如Cochrane图书馆、Medline和Em⁃base中，化疗药和GnRH受体激动剂联用或化疗药单用治疗绝经前乳腺癌妇女的随机对照试验临床数据显示女患者接受化疗联用GnRH受体激动剂在化疗后1年内出现卵巢功能早衰（premature ovary failure，POF）的现象明显少于化疗药单用，化疗后的风险比率值为0.40，但两组月经恢复率和自然怀孕率相似。因此化疗药联用GnRH受体激动剂对治疗患乳腺癌的绝经前妇女能防止在化疗后第1年引起POF，但对月经恢复率或自发怀孕率无影响［13］。

动物实验显示促性腺激素释放激素曲普瑞林（triptorelin，T）能对抗CTX诱导的成年小鼠卵巢毒性。未交配性成熟雌性小鼠分别给予对照组，低剂量组曲普瑞林（triptorelin low dose，TL）组，高剂量（triptorelin high dose，TH）组，CTX组，TL+CTX组和TH+CTX组。TL+CTX组和TH+CTX组均能对抗CTX组诱导的卵巢毒性，对卵巢有保护作用。使CTX诱导的卵巢结构破坏减轻，原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和有腔卵泡均有显著性的增多（P＜0.05或P＜0.01）。因此，GnRH受体激动剂能剂量依赖性地对抗化疗药对卵巢毒性影响，对生育力的维护有一定的作用［14］。

但GnRH受体激动剂治疗和冷冻保存的卵巢原位移植治疗相比，接种冷冻保存卵巢的小鼠在观察期能恢复正常体质量，在更短的时间内恢复正常的发情周期，显示卵巢冷冻保存原位移植优于GnRH受体激动剂治疗，可较快地恢复接受化疗后小鼠的生育［15］，因此，GnRH受体激动剂对损伤卵巢保护功能还需要更多的实验确认。

4.3 化学药物

有报道称沙利度胺能减轻化疗所致性腺毒性。在小鼠卵巢衰竭模型中，烷基化化疗前用沙利度胺可保护卵巢卵泡，并有助于动情周期的恢复［19］。

雌激素受体竞争调节剂他莫昔芬（tamoxifen）能对抗化疗药物CTX和DXR引起的卵巢毒性，减少卵泡损伤，促进生育。体外培养新生大鼠卵巢模型显示该药能对抗CTX引起的卵泡数目减少和细胞凋亡，其机制可能与减少多个炎症基因，如脂肪氧合酶介质花生四烯酸盐5-脂氧合酶和前列腺素生成信号磷脂酶A21b、前列腺素F受体，细胞结合因子白介素1受体和白细胞介素2受体γ，细胞凋亡因子肿瘤坏死因子受体超家族成员1A，第二信使信号丝分裂原激活蛋白激酶1、丝裂原激活蛋白激酶14、和磷脂酶γ1，以及组织重构因子缓激肽B2受体和血管舒张因子激肽释放酶15的表达有关［20］。

枸橼酸西地那非对顺铂诱导的卵巢损伤有保护作用，能缓解顺铂诱导的卵巢损伤，选择性地保存动物的生育能力。顺铂5 mg·kg-1可使雌性小鼠原始卵泡、二、三级卵泡显著性减少（P＜0.05），预处理枸橼酸西地那非能显著保留雌性小鼠的原始卵泡数（P＜0.05），还可使卵巢AMH明显增高（P＜0.05）［21］。

右雷佐生（右丙亚胺，dexrazoxane，Dexra）是催化拓扑异构酶-2抑制剂，它能对抗蒽环霉素DXR化疗引起的卵巢毒性，保护卵巢。还可抑制DXR引起的gammaH2AX磷酸化和有腔卵泡中foci阳性颗粒细胞形成和数量，减弱DXR引起的AKT1磷酸化和胱天蛋白酶9激活，阻止DXR引起的卵巢细胞DNA双链断裂和DNA损伤，消除卵巢早期凋亡信号［22］。

4.4 天然物质

橘皮苷可对抗CTX化疗引起的卵巢损伤，保护卵巢。橘皮苷预处理能对抗CTX引起雌性Wistar大鼠卵巢中的一氧化氮、丙二醛（malondialdehyd，MDA），过氧化物酶活性增加，以及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的显著降低（P＜0.001），减弱CTX引起的卵巢卵泡排卵数量和卵巢重量降低，针对CTX诱导的卵巢毒性提供生育力保护［20］。

欧洲越桔对顺铂诱导的大鼠卵巢毒性有一定的对抗作用，降低顺铂引起的卵巢毒性，保护卵巢。顺铂能引起卵巢中MDA水平显著增加（P＜0.05），SOD、过氧化氢酶、GPx和谷胱甘肽-s-转移酶的活性下降（P＜0.05），出现严重的水肿，血管充血、出血、卵泡退化等卵巢损伤。欧洲越桔和顺铂联用能降低MDA水平，增加抗氧化酶SOD、过氧化氢酶、GPx、谷胱甘肽-s-转移酶水平，减轻顺铂引起的自由基损伤和大鼠卵巢损伤［23］。

5 评估卵巢储备的检测指标

目前，最可靠的评估卵巢储备指标是AMH，用于定量评估青春期前女性卵巢储备，但化疗之后它是否适用还不明确。POF患者常见的血液激素指标之一是FSH持续维持在＞40 U·L-1，因此，FSH也经常作为血液学激素指标衡量卵巢功能。18日龄青春期前和成年小鼠分别给予CTX后卵泡数目明显下降，AMH也出现明显下降，仅48%青春期小鼠和81%成年小鼠的FSH出现增高，并随时间持续增高（P＜0.05），但AMH未见相应的降低，显示组织学检查和血清标志物之间并无相关性。因此，FSH可用来作为定性指标，而AMH可作为卵巢残留储备功能的变化指证［24］。另一项研究也证明AMH是衡量CTX损伤卵巢后评估卵巢储备较好的标志物［25］。

6 卵巢毒性的体外研究方法

筛选制药、化工和环境化合物对生殖健康的影响长期依赖于体内研究，很有必要建立一些好而高效的体外方法。目前体外常用评价卵巢毒性的方法有卵巢培养法，卵巢薄片培养法，腔前卵泡培养法等，均在体外评估卵巢毒性发挥较大的作用。通常，评估化学物质（喜树碱、依托泊苷、丝裂霉素C）引起DNA损伤和生物危险主要是基于复制时DNA聚合酶的活性。但是，DNA损伤不仅仅与复制有关，还与转录过程有关，检测DNA转录时的损伤效应对检测化学物质诱导的突变效应和致癌性也非常重要。通过测定尿苷类似物溴尿苷到新生的RNA的数量变化，RNA合成法成为一种较好的检测化疗药物诱导的DNA损伤体外方法［26］。体外腔前卵泡法可用来确定化合物对卵巢功能的影响，区分有无生殖毒性化合物，并提供体外方法来评估化合物对生殖功能和健康的影响［27］。

7 展望

育龄年轻女性肿瘤患者，由于其病症的特殊性，往往在治疗过程中为了最大程度杀灭肿瘤细胞，而忽略药物对生育能力的影响，造成相当一部分年轻女性肿瘤患者治疗后无法进行正常的生育而抱憾终生，为了重新获得生育力也给患者的家庭带来沉重的经济负担。迄今为止，治疗上注重药物的治疗功能而对其引起的生殖功能损害的毒副作用并未给予足够的重视。在综合治疗上，国外的医疗已开始寻找预防和治疗手段，国内的医疗也逐步开始重视并采取一些干细胞的治疗方法［28-29］。随着卵巢毒性机制和影响因素研究的进一步深入，治疗方法的加强，化药治疗和卵巢生殖功能保留未来将会取得一个较好的平衡点。

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Ovariantoxicityinducedbychemotherapy：researchprogress

ZHANG Ting，HE Wan-hong，FENG Ling-lin
（Shanghai Institute of Planned Parenthood Research，National Population and Family Planning Key Laboratory of Contraceptive Drugs and Devices，Shanghai Engineering Research Center of Reproductive Health Drug and Devices，Shanghai 200032，China）

For young women with tumors，one of the adverse effecs induced by chemotherapy is ovarian toxicity，which can cause ovarian premature failure，leading to a decline in fertility.In some cases，it can even cause permanent irreversible damage to the reproductive system.Commonly-used chemotherapeutical drugs such as docetaxel，irinotecan，cyclophosphamide，cisplatin and doxorubicin（adriamycin）have been found to possess obvious ovarian toxicity and their drug-related ovarian toxic mechanism is different.The influencing factors of ovarian toxicity are believed to be associated with ovarian acute vascular injury，oxidative stress induced by reactive oxygen species，abnormality of phosphatidylinositol-3-kinase serine/threonine kinase pathway，and suppression of steroid hormone secretion pathway，respectively.Some approaches to preservation of fertility functions have been adopted in clinical use during chemotherapy，while some prevention methods for ovarian toxicity are actively explored.Fertility preservation detection parameters have been validated and research methods for ovarian toxicityin vitrohave been gradually established in order to better understand and explore prevention methods.With a better understarding of chemotherapy-induced ovarian toxic mechanisms and the diversification of prevention methods，cancer therapy and ovarian fertility preservation will strike a better balance in the future.

chemotherapy；toxicity；ovary；follicles；granular cells

ZHANG Ting，E-mail：fuzzyting@163.com

R979.1

A

1000-3002-（2016）08-0879-07

10.3867/j.issn.1000-3002.2016.08.013

Foundation item：The project supported by Shanghai Natural Science General Project（13ZR1435500）

2015-11-23 接受日期：2016-08-01）

（本文编辑：齐春会）

上海市自然科学基金（13ZR1435500）

张 婷，女，博士，高级工程师，主要从事女性生殖药物的药理毒理研究。

张 婷，E-mail：fuzzyting@163.com